Ложно положительные результаты анализа на гепатит в
В мире официально зарегистрировано более 350 миллионов людей с хронической инфекцией гепатита В и С. ВОЗ отнесла заболевание к категории опаснейших, поскольку оно трудно поддается лечению. Показатель смертности по причине гепатита в 2016 году достиг уровня гибели людей от туберкулеза и ВИЧ. Поэтому при обнаружении в результатах исследования значения «положительно», пациент воспринимает это как приговор. Важно знать при каких обстоятельствах может быть выявлен ложноположительный анализ на гепатит С и В.
Особенности вирусного гепатита
Вирус характеризует высокая степень устойчивости в окружающей среде: к химическому или физическому разрушающему воздействию. Вирусы гепатита В и С способны сохранять жизнеспособность в течение нескольких недель, находясь на различных предметах, а в крови – до полугода.
Наиболее частые пути заражения – через кровь, инфицирование половым путем и от матери к ребенку происходит в меньшем проценте случаев.
Гепатит С именуются «ласковым убийцей», поскольку вирус может длительное время нарушать работу клеток печени, при этом маскируясь под симптомы других патологий. Поэтому его выявление чаще происходит случайно при подготовке к операции, беременности или донорству. Более 40 лет человек может являться носителем вируса, не зная об этом.
Прогноз исхода во многом зависит от наличия или отсутствия сопутствующих болезней. Особую угрозу для жизни пациента представляет обстоятельство сочетанного инфицирования вирусом гепатита С и ВИЧ. Носительство вируса гепатита В менее опасно для жизни и реже заканчивается летальным исходом, при условии отсутствия сопутствующей инфекции.
Диагностические методы
Для диагностики гепатита применяют 2 метода исследования:
- полимеразная цепная реакция (ПЦР) – выявление в биоматериале нуклеиновых кислот (ДНК или РНК) путем многократного копирования отдельных их специфических участков. Преимущество – специфичность и чувствительность методики достигает абсолютных значений. Риск получения ошибочных результатов сведен к минимуму;
- иммуноферментный анализ (ИФА) – определение наличия специфических белковых иммуноглобулинов (антител) класса М и G.
Иммуноферментный анализ крови
После прохождения вирусом первых барьерных структур начинается ответная реакция иммунитета человека. Следует отметить, что достаточная концентрация для обнаружения иммуноглобулинов накапливается через 1–3 месяца после заражения. Известны случаи их отсутствия более чем 12 месяцев, у 5% инфицированных они не выявляются вообще.
Для острой стадии болезни характерны иммуноглобулины класса М и G к специфическому белку нуклеокапсида core. При хронизации инфекции выявляется преимущественно класс G к белкам core и NS. В случае необходимости проведения подтверждающего теста определяются оба класса иммуноглобулина к двум типам белка.
При необходимости определения конкретного генотипа вируса ставится полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени. В зависимости от генотипа подбирается лечение. Первый генотип наиболее трудно вылечить, для него характерны наиболее тяжелые последствия для здоровья человека. При этом 2 и 3 генотип излечиваются в 80% случаев за полгода.
Причины ложноположительного результата
Причиной ложноположительного результата является ошибки врачей
По статистике, результаты анализа ИФА в 15% случаев показывают ошибочно ложные данные, а среди беременных женщин процент ошибок достигает 20–30%.
Среди основных причин можно выделить недостаточную компетентность врача, который не проинформировал пациента о правилах подготовки к сдаче биоматериала и не учитывает возможность получения ложноположительных результатов. Увидев в строке результатов «положительно», врач выносит окончательный диагноз – гепатит и назначает лечение. Подобный подход в корне неверный, поскольку постановка диагноза по однократному анализу недопустима.
Не следует исключать и человеческий фактор в виде ошибки лаборантов. По неопытности или невнимательности сотрудник лаборатории может случайно перепутать пробирки, маркирующие штрих-коды или сами результаты анализов.
Данные статистики гласят, что 60% ошибок случается именно на преаналитическом этапе. Неправильное взятие или хранение взятых образцов крови – еще одна причина получения ложноположительного результата анализа.
Биоматериал в современных лабораториях собирается стерильной одноразовой иглой-бабочкой в вакуумную пробирку с консервантом. После чего кровь аккуратно перемешивается с консервантом, это необходимо для исключения ее гемолиза (разрушения красных кровяных клеток). После взятия кровь отстаивается 30–40 минут при комнатной температуре с целью формирования сгустка. Затем хранится или транспортируется (при необходимости) в температурном диапазоне от +2 до +8 С°. Нарушение стандартной методики недопустимо.
Следует отметить, что ложноположительный результат характерен для дам в положении. Ситуация объясняется масштабной перестройкой всего организма женщины после зачатия, одна из которых затрагивает синтез цитокинов. Кроме этого, изменяется концентрация макро- и микроэлементов, перестраивается эндокринная система и гормональный фон. Это делает невозможным однозначную интерпретацию результатов анализа, особенно методом ИФА.
Во время беременности анализ на гепатит может показать ложноположительный результат
Установлена прямая зависимость между сроком беременности и частотой получения ложноположительных результатов в анализе на гепатит В или С. Чем выше срок, тем более велика вероятность ошибочных данных.
Патологии, влияющие на результат анализа
Важно знать, что антитела к вирусу гепатита могут сохраняться в кровотоке человека от 8 до 10 лет, а у некоторых – до конца жизни. Их функциональная активность после успешной терапии инфекции до сих пор неизвестна. Они не способны защищать от повторного инфицирования человека ввиду того, что не проявляют противовирусной активности.
Данный факт обуславливает получение положительных результатов при использовании метода ИФА. Поэтому методика применяется для первичной диагностики и скринингового обследования, но ее проведение нецелесообразно для оценки эффективности лечения и выздоровления пациента.
Среди патологий, влияющих на результат анализа, следует выделить аутоиммунные заболевания, злокачественные новообразования и смешанную инфекцию.
Аутоиммунные заболевания
Аутоиммунные патологии сопровождаются выработкой защитных белковых антител против собственных нормальных клеток и тканей. В норме подобные механизмы запускаются исключительно при попадании чужеродного биоматериала (антигенов) или аномальной мутации своих клеток (рак).
Известна форма аутоиммунного гепатита, частота встречаемости которого не превышает 20 случаев на 100000 обследуемых людей. Заболевание поражает людей вне зависимости от пола и возраста. Природа возникновения остается предметом дискуссий, а подбор эффективных методов лечения составляет серьезнейшую проблему в современной гепатологии. Согласно данным статистики, более половины выявленных случаев характеризуются тяжелой стадией, когда цирроз печени уже сформирован. Крайне важно дифференцировать вирусную форму гепатита от аутоиммунной, делать это вправе врач высокой категории.
Злокачественные поражения органов могут привести к выработке неспецифических для патологии иммуноглобулинов, которые ошибочно будут идентифицированы как антитела к вирусу гепатита В или С.
Смешанная инфекция активирует все защитные системы и механизмы в организме человека. Не исключена возможность выявления иммуноглобулинов класса М и G, вырабатываемых в ответ на микроорганизм, не связанный с вирусом гепатита. Ситуация усугубляется при выраженном иммунодефиците у человека.
Как не допустить ошибочного результата
Для исключения риска получения ложных данных ВОЗ рекомендует минимум трехкратное проведение анализа, желательно в разных лабораториях. Современные частные лаборатории при получении сомнительных или положительных результатов назначают бесплатные подтверждающие тесты. При этом сначала лаборатория сама повторяет анализ, а после отправляет биоматериал для исследования в экспертном НИИ.
Пациенту следует ознакомиться с правилами подготовки к сдаче биоматериала и неукоснительно их соблюдать. В случае ежегодного профилактического обследования достаточно сдать анализ методом ИФА, для дифференциальной диагностики предпочтение следует отдавать ПЦР.
Нежелательно проходить исследования в сомнительных частных лабораториях. Каждое лабораторное отделение должно иметь соответствующие лицензии на взятие и проведение медицинских анализов.
При сдаче крови обязательно нужно предупредить сотрудника лаборатории о наличии хронических патологий и аллергических реакций. Желательно за 1 сутки до анализа исключить прием любых лекарственных препаратов после предварительной консультации с врачом. При невозможности отмены следует проинформировать о принимаемых лекарствах лаборанта или врача.
Физические и эмоциональные нагрузки могут повлиять на работу органов и состав крови, поэтому за 12 часов их следует избегать. Спортивную тренировку вечером накануне визита в лабораторию желательно отменить.
Таким образом, получение ложноположительных результатов анализа на гепатит В или С имеет ряд весомых и обоснованных причин. Соблюдая правила подготовки к сбору биоматериала и выбирая компетентных специалистов и лаборатории, пациент существенно повышает точность полученных данных. Недопустима постановка окончательного диагноза по результатам одного исследования, а расшифровку проводит исключительно лечащий врач. Получение положительных результатов диктует необходимость повторных подтверждающих тестов в различных лабораториях.
Источник
Прежде чем перейти к тому, почему результат анализа может быть ложноположительным, необходимо немного внимания уделить самой болезни.
Гепатит B это очень опасное инфекционное заболевание, во время которого поражается печень человека. А, как известно, если начались проблемы с печенью, то весь организм постепенно будет давать сбои. С момент заражения до появления первых симптомов может пройти от полутора месяцев до пяти. Все будет зависеть от иммунной системы человека, а также от других имеющихся хронических заболеваний.
После того, как вирус активизировался, выделяют две стадии развития. Первая (ее еще называют вялотекущей) характеризуется незначительным ухудшением состояния. Так, появляется слабость, иногда бессонница. В тот момент, когда вирус уже начинает действовать активнее, самочувствие человека ухудшается, моча становится темнее, кожи приобретает желтоватый оттенок. И в некоторых случаях начинают желтеть белки глаз.
Одной из особенностей болезни, которая делает ее еще более опасной, является бессимптомное течение.
В большинстве случаев гепатит С протекает бессимптомно до того момента, пока не начинается цирроз печени. А до этого незначительное ухудшение самочувствия, такое как быстрая утомляемость и изменение цвета мочи, многими людьми списывается на стресс, хроническую усталость и неправильное питание. Именно потому, что в основной массе случаев гепатит С протекает бессимптомно, им очень легко заразится. Человек может даже не знать о болезни и передать ее другому, особенно во время полового акта.
Более 80 процентов людей, у которых имеется гепатит С, говорят, что узнали о болезни случайно, когда в один момент им нужно было пройти обследование и одним из пунктов была сдача анализов на кровь и гепатит. Около 20-30 процентов пациентов вылечиваются, но при этом качество их жизни значительно ухудшается из-за поражения печени.
Также, примерно столько же человек перенесли острую форму болезни и могут считаться просто носителями вируса. Но большая опасность состоит в том, что болезнь переходит в хроническую стадию, и, несмотря на излечение, они являются носителями.
У таких людей есть следующие симптомы:
- Частая тошнота.
- Болезненные ощущения в области живота, которые могут быть как периодическими, так и постоянными.
- Боли в суставах, которые многие пациенты называют изнуряющими.
- Понос, который возникают часто и внезапно.
- Небольшое пожелтение кожи.
Считается, что распознать гепатит С самому практически невозможно, так как даже опытные врачи могут поставить диагноз, основываясь только на полученных результатах анализов.
Гепатит и HBsAg
Итак, антиген HBsAg – один из компонентов оболочки вируса гепатита В (HBV). В контексте лабораторных исследований он является маркёром (индикатором) вируса. Если говорить о составе капсида (внешняя оболочка вируса) гепатита В подробнее, то это сложная комбинация белков, гликопротеинов, липопротеидов и липидов клеточного происхождения.
HBsAg в данном случае отвечает за процесс адсорбции вируса клеткой, то есть обеспечивает поглощение HBV гепатоцитами – клетками печени. Как и любой другой вирус, после внедрения в благоприятную среду, он начинает реплицировать (продуцировать) новые ДНК и протеины, необходимые для дальнейшего размножения (копирования) вируса. Фрагменты вируса, в нашем случае – HbsAg, поступают в кровоток, по которому распространяются дальше.
Диагностические методы
Для диагностики гепатита применяют 2 метода исследования:
- полимеразная цепная реакция (ПЦР) – выявление в биоматериале нуклеиновых кислот (ДНК или РНК) путем многократного копирования отдельных их специфических участков. Преимущество – специфичность и чувствительность методики достигает абсолютных значений. Риск получения ошибочных результатов сведен к минимуму;
- иммуноферментный анализ (ИФА) – определение наличия специфических белковых иммуноглобулинов (антител) класса М и G.
Иммуноферментный анализ крови.
Для диагностики гепатита применяют 2 метода исследования
После прохождения вирусом первых барьерных структур начинается ответная реакция иммунитета человека. Следует отметить, что достаточная концентрация для обнаружения иммуноглобулинов накапливается через 1–3 месяца после заражения. Известны случаи их отсутствия более чем 12 месяцев, у 5% инфицированных они не выявляются вообще.
Для острой стадии болезни характерны иммуноглобулины класса М и G к специфическому белку нуклеокапсида core. При хронизации инфекции выявляется преимущественно класс G к белкам core и NS. В случае необходимости проведения подтверждающего теста определяются оба класса иммуноглобулина к двум типам белка.
При необходимости определения конкретного генотипа вируса ставится полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени. В зависимости от генотипа подбирается лечение. Первый генотип наиболее трудно вылечить, для него характерны наиболее тяжелые последствия для здоровья человека. При этом 2 и 3 генотип излечиваются в 80% случаев за полгода.
Какой анализ сдается для скрининга?
Смысл скрининга – проверить как можно больше людей как можно быстрее и дешевле. В качестве скрининга на гепатит С используется анализ Anti-HCV-total (суммарные антитела к антигенам вируса гепатита C) методом ИФА. Антитела – это белки иммуноглобулины крови человека, которые иммунная система продуцирует в ответ на вирусы, бактерии, вредные и не очень вещества (аллергия) а иногда и на собственные клетки (аутоиммунные заболевания).
Каждое антитело специфично, оно связывает и нейтрализует только один вид бактерий или вирусов и не действует на другие. Таким образом, анализ Anti-HCV-total ищет не сам вирус, а белки крови, которые сталкивались с вирусом гепатита С или с чем-то похожим на этот вирус. Этим и объясняется низкая специфичность такого анализа – только у 90% получивших положительный результат на Anti-HCV-total действительно есть или был гепатит С.
Не стоит также забывать, что 30% людей, заразившихся гепатитом С, спонтанно от него излечиваются в течении первых полугода болезни, а антитела к этому вирусу могут оставаться у них годами. В итоге имеет то, что меньше 2/3 положительных результатов теста действительно говорят о гепатите С. Является ли та ложноположительная 1/3 ошибкой врача или лаборатории? Нет, это погрешность самого метода
Что такое ложноположительный результат?
Ложноположительный анализ исследования на наличие специфических антител к гепатиту фиксируется в том случае, если результаты анализа носят положительный характер, однако при этом вирусный возбудитель в организме отсутствует. Это может происходить в результате воздействия внешних или внутренних факторов.
Ложный анализ выявляется при проведении дополнительного исследования путем ПЦР – диагностики, при которой вирус гепатита не обнаруживается. Таким образом, результат анализа крови на гепатит нельзя считать достоверным на 100%. Именно поэтому для установления точного диагноза и в целях недопущения врачебной ошибки пациенту назначается комплексное обследование с проведением различных исследований.
Ложноположительные результаты
Тесты, применяемые в Центре крови, обладают высокой специфичностью, однако, несмотря на это, в отношении небольшого числа фактически совершенно здоровых людей они могут показать ложный результат вирусоносительства. Такие результаты называются ложноположительными.
Все донорские пробы, показавшие положительные реакции, проверяются при помощи других, подтверждающих методов. Если другие методы дают отрицательный результат, то первичные результаты считаются ложноположительными. Ложноположительную реакцию могут вызвать факторы, не связанные с конкретным возбудителем болезни, например хронические заболевания, употребляемые лекарственные препараты или наркотики, беременность или индивидуальные особенности организма.
Ложноположительные результаты
В случае ложноположительной реакции через несколько месяцев проводится повторный анализ, и исходя из его результатов принимается решение, пригоден ли посетитель для донорства в данный момент или же забор крови следует отложить на более длительный период. Независимо от того, обнаружена в крови инфекция или нет, при ложноположительном результате теста использовать донорскую кровь для приготовления из нее компонентов не разрешается.
Если донор не обладает достаточной информацией, то ложноположительный результат нередко вызывает у него смятение и страх. Поэтому информированию доноров мы отводим очень важное место. Мы всегда готовы отвечать на дополнительные вопросы и разъяснять все аспекты проблемы. Для получения дополнительной информации просим обращаться к врачам Центра крови.
Почему получаются ложноположительные результаты
Редко, при наличии определенного ряда обстоятельств, имеет место ложноположительный результат.
Причина, при которой может быть ложноположительный результат следующая:
- сбивается гормональный фон;
- имеет место аутоиммунная патология;
- наличие инфекционных болезней;
- присутствие доброкачественного или ракового образования.
Встречается это, когда похожие белковые молекулы, которые выработаны иммунитетом в ответ на действие болезнетворных веществ, попали в кровеносную систему беременной женщины при вынашивании ребенка.
Нужно получить необходимые анализы и предотвратить воспалительный процесс.
Как избежать получения недостоверных результатов
Чтобы получить истинно верный результат, необходимо подготовиться к исследованию.
Сдавать кровь можно только при хорошем самочувствии, а если недавно переболели, то лучше подождать две недели, прежде чем делать ИФА.
Чтобы правильно интерпретировать результаты анализа, врач должен знать о наличии хронических заболеваний, аллергических реакциях, принимает ли пациент какие-либо медикаменты.
Кровь для анализа берется из локтевой вены. Забор материала должен проводиться натощак, поэтому в лабораторию нужно приходить утром. За день до сдачи крови нельзя есть соленое, копченое, острое или жирное, также необходимо отказаться от употребления алкоголя и курения.
Источник
