Метод определения генотипа вируса гепатита с
Hepatitis C Virus (HCV) опасен не только скрытыми симптомами. Патология может годами разрушать печень человека и при этом не вызывать значимых клинических проявлений. На основании отличий в порядке расположения аминокислотных остатков, специалисты выделяют несколько разновидностей вирусного патогена.
Генотипы гепатита С разнятся по симптоматике, скорости прогрессирования некротических поражений печени и вероятности развития осложнений. Именно генотип является основополагающим фактором подбора эффективной терапии.
Периодически в медицинской литературе появляется информация об открытии новой разновидности вирусной инфекции. В итоге данные, сколько генотипов у гепатита С, разнятся. Некоторые специалисты называют цифру 11 (без учета квази-типов). Но практикующие гепатологи руководствуются рекомендациями Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ), в соответствии с которыми выделяют 6 генотипов вируса HCV.
Молекулярные методы диагностики позволяют с высокой точностью изучить структуру патогена, обнаруженного в плазме крови или биоптате тканей печени пациента. Таким образом специалисты могут с высокой точностью установить тип патогена, и на основании полученных результатов доктор назначает соответствующую терапию.
Что такое генотип и как его определить?
Чтобы объяснить принцип разделения HCV на генотипы и как одна разновидность патогена отличается от другой, доктора сравнивают структуру вируса с цепочкой. Набор звеньев цепи одинаков вне зависимости от типа возбудителя инфекции, но порядок их расположения отличается. Схожие группы объединены в типы, причем внутри каждого выделяют несколько субтипов, которые лишь незначительно разнятся друг от друга.
Вопрос, как узнать, какой генотип вируса у больного, целесообразно решать только после подтверждения диагноза. Подобное исследование проводится с использованием молекулярных методик путем постановки полимеразной цепной реакции. Нередко определение разновидности HCV проводят в комплексе с количественной оценкой вирусемии. Для проведения анализа пациенту следует сдать кровь из вены, срок выполнения – до 5 дней.
Многих пациентов интересует вопрос, меняется ли генотип в процессе терапии. Ответ однозначен: структура вируса неизменна, поэтому при гепатите С достаточно однократно определить разновидность заболевания до начала терапии. Резистентность к проводимому лечению объясняют не мутацией патогена уже после инфицирования, а индивидуальными особенностями пациента.
После сдачи крови на определение генотипа и получения результатов доктор может сориентировать пациента относительно следующих вопросов:
- риск развития осложнений;
- прогнозируемая эффективность терапии (на основании клинических испытаний);
- длительность лечения;
- вероятность возникновения внепеченочных проявлений заболевания.
Терапия различных генотипов отличается. Для разновидностей HCV, сложно поддающихся лечению, разработаны многокомпонентные лекарственные препараты. Но если на фоне приема противовирусных лекарств улучшения не наступает, исследование на определение разновидности HCV и прочие диагностические тесты проводят повторно для уточнения диагноза и исключения других факторов, негативно влияющих на эффективность лечения.
Сколько генотипов у HCV
Генотипы вирусного гепатита С разнятся по территориальной распространенности. Статистика диагностируемых разновидностей патологии приведена в таблице.
| Наименование стран и/или континентов | Наиболее часто диагностируемые типы HCV (в порядке убывания по распространенности) |
| Российская Федерация и страны бывшего СССР, ближнее зарубежье (Польша, Чехия, Болгария) |
|
| Страны Европейского Союза |
|
| Азия |
|
| Канада и США |
|
| Страны Южной Америки |
|
| Индия, Ирак, Иран, Пакистан и рядом расположенные территории |
|
| Африканский континент | Встречаются с 1 по 6 генотипы HCV, их распространенность зависит от конкретной части континента. Например, в Алжире, Египте, Ливии и Марокко чаще диагностируют 4, 3 и 1 разновидности. В странах западного побережья – 1, 4 и 2 генотипы. В центральной части – преимущественно 4, реже – 1. На востоке и юге континента встречаются все типы HCV. |
| Австралия |
|
Но статистика распространенности определенного генотипа меняется из-за военных действий, постоянных миграционных перемещений населения, активного развития экзотического туризма. С этими же факторами связывают и постоянно растущее количество инфицированных. Если в Европе, США, Канаде, России удалось достичь контроля над заболеваемостью (своевременная диагностика, соответствующая информационная политика), население стран с неразвитой медициной (например, на территории Африки) является носителем и источников распространения болезни.
В большинстве отечественных медицинских публикаций, посвященных проблеме HCV, практически не встречается информация, чем отличаются 5 и 6 генотипы патогена. Эти разновидности инфекции диагностируются крайне редко и только в странах Африки и Азии.
Генотипы 1b и 1а
Для первой разновидности гепатита Ц характерно наличие трех подтипов, но обычно диагностируют один из двух – 1а или генотип 1b (б).
Отличительными чертами вида служат:
- высокая распространенность, встречается по всему миру, в России диагностируется с частотой 58–61% от всех случаев инфицирования;
- преимущественно хроническое течение (вероятность такого исхода превышает 80%), при этом острая фаза обычно проходит быстро, без клинической симптоматики;
- высока вероятность рецидива.
Первый тип HCV отличает резистентность даже к современным противовирусным препаратам. По сравнению с другими генотипами патологии, реже регистрируется быстрый вирусологический ответ (лабораторно неопределяемые концентрации на 4 неделе лечения). При подобной форме гепатита С максимальную вероятность выздоровления врачи прогнозируют только на начальных стадиях инфекции до 3–4 лет с момента инфицирования.
Тип 2
HCV 2 типа подразделяется на три подгруппы – a, b и c. Второй генотип встречается относительно редко. На территории РФ и стран ближнего зарубежья практически не диагностируется.
Характерны такие особенности:
- вероятность самостоятельного разрешения инфекции (эрадикация патогена возможна под влиянием иммунитета без дополнительного приема медикаментов);
- низкая вероятность осложнений;
- реактивация инфекции регистрируется в единичных случаях;
- медленное прогрессирование.
Генотип 2 хорошо «отвечает» на современные методики терапии. Более того, инфекция достаточно легко лечится и по устаревшим схемам, которые подразумевают применение комбинации интерферонов и рибавирина. Но в медицинской литературе описаны случаи сочетания второй разновидности патологии с другими генотипами HCV и гепатитом В, что негативно влияет на прогноз терапии.
Гепатит с генотип 3
На территории России гепатит С генотип 3 является вторым по распространенности после первой разновидности. Выделяют два типа: a и b.
Третий генотип отличается:
- Высокой вероятностью развития осложнений. После анализа рандомизированных клинических исследований установлено, что тяжелые формы цирроза и гепатоцеллюлярный рак отмечаются на 5–8% чаще у пациентов с третьим генотипом.
- Более быстрыми сроками патогенных изменений в печени. В среднем, начальная стадия цирроза диагностируется на 3–5 лет раньше, чем при 1 генотипе.
- Преимущественно гематогенным путем передачи. Часто болезнь выявляют у лиц с пристрастием к инъекционным наркотикам.
- Возрастной группой. Это значит, что патологию обычно выявляют у людей активного трудоспособного возраста – 25–35 лет.
Срок, сколько живут пациенты с подобной разновидностью патологии, напрямую зависит от момента диагностирования. В целом, 3 генотип хорошо поддается лечению, при условии применения современных таргетных средств. Но если болезнь выявлена на поздних стадиях, когда изменения структуры печени приобрели необратимый характер, шансы на полное выздоровление невелики. Кроме того, такой тип HCV опасен злокачественным перерождением клеток органа. Рак печени считается одним из самых тяжелых форм онкологии. Количество пациентов, переступивших пятилетний порог выживаемости, не превышает 4–6%.
Разновидности 4, 5, 6
Генотип 4, как и 5, 6 разновидности HCV диагностируются реже всего. В большинстве отечественных лабораторий определение подобных типов вируса даже не предусмотрено. Исследование на эти группы гепатита С назначают только при негативном результате на определение 1–3 типа. В связи с низкой распространенностью такие разновидности патологии изучены в недостаточной степени.
Установлено, что для них характерно:
- преимущественно острое течение;
- высокая вероятность эффективного иммунного ответа и самостоятельного излечения;
- длительное латентное течение без изменения параметров виремии в большую сторону;
- низкий риск осложнений (случаи рака печени у пациентов с 4, 5 или 6 типами практически не зарегистрировано).
Четвертый генотип подразделяется на 10 квази-типов. Что касается пятого и шестого, на сегодняшний день известно только об одной подгруппе – а. Терапия данных типов HCV не представляет сложности. Достаточно стандартного курса пангенотипных противовирусных средств. Но вероятность осложнений течения инфекции повышается, если заражение произошло уже на фоне поражения ткани печени.
Смешанные типы
Смешанных генотипов HCV не существует. В некоторых случаях диагностируют комбинированный субтип. Это происходит, если по результатам генотипирования однозначно установлена разновидность патологии, но определить подтип затруднительно (тогда запись в карточке пациента выглядит, например, следующим образом – генотип 3аb). Крайне редко возможно заражение другой группой HCV на фоне уже присутствующей в организме инфекции. Как правило, таким пациентам назначаются длительные курсы пангенотипных противовирусных медикаментов.
Генотипирование – анализ на генотип гепатита С
Сдать анализ на генотип гепатита С можно практически в любой частной лаборатории. Исследование проводится методом полимеразной цепной реакции. Техника выполнения исследования состоит в следующем: обнаруженные в плазме крови образцы РНК патогена сравнивают с изолятами генотипов, а далее – подтипов.
Показаниями к проведению генотипирования служат:
- наличие иммуноглобулинов класса М или G;
- позитивный результат качественной ПЦР;
- определяемая методом количественной ПЦР виремия.
Сдавать кровь для генотипирования необходимо после подтверждения диагноза, но до начала терапии.
В некоторых случаях необходимо повторное исследование. Это:
- сохранение прежнего уровня виремии, увеличение вирусологической нагрузки на фоне применения противовирусных препаратов;
- положительные результаты ПЦР после окончания курса лечения вне зависимости.
Если в ходе стандартного исследования определить разновидность патологии не удается, проводят расширенное генотипирование вируса. Такой анализ подразумевает диагностику не только трех наиболее распространенных типов, но и выявление 4, 5 или 6 разновидностей. Данный тест показан и в том случае, если предполагается инфицирование в странах, где встречаются более редкие типы патологии.
Способ, как определить генотип по анализам, прост. Срок проведения исследования – от 3 до 5 дней. Пациенту выдается бланк с результатами тестирования, где указан точный тип и подтип патологии. С результатами анализа необходимо обратиться к врачу для назначения курса терапии.
Какой генотип самый опасный
Наряду с вопросом, какие бывают типы HCV, еще до получения результатов всех диагностических тестов пациенты интересуются, какой генотип гепатита С самый опасный. Если анализировать данные клинических исследований, неблагоприятный исход чаще отмечают при 1b разновидности патологии.
Именно эта группа инфекции обычно диагностируется на стадии необратимого некроза гепатоцитов и разрастания соединительной ткани в печеночной паренхиме. С учетом тенденции к рецидивам и резистентности доктора чаще назначают современные лекарственные средства, в состав которых входит 2 или 3 противовирусных ингредиента в фиксированной комбинации.
Но учитывая патогенез HCV, у некоторых пациентов даже сравнительно легкие разновидности инфекции могут вызвать серьезных осложнения. Вероятность успешной терапии существенно снижается при коинфекции ВИЧ и других тяжелых системных заболеваниях. Также результат лечения и риск осложнений во многом зависит от диеты, готовности больного отказаться от вредных привычек, употребления спиртного.
Какие типы имеют самый благоприятный прогноз
Легче лечится вторая разновидность вирусной инфекции, но она практически не диагностируется в России. Поэтому обычно на вопрос, какой генотип гепатита С лучше всего поддается лечению, отечественные инфекционисты называют третий тип. Хотя данная группа патологии чаще сопровождается различного рода осложнениями, высока вероятность полного излечения при условии своевременной диагностики.
Третий подвид болезни – не самый легкий, но при использовании современных противовирусных средств возможно выздоровление без значимого влияния на продолжительность жизни пациента. Чтобы снизить вероятность тяжелого течения патологии, необходимо следовать всем рекомендациям врача, четко соблюдать прописанный доктором режим питания.
После выздоровления следует продолжать прием медикаментов, обладающих гепатопротекторной активностью. Также сохраняются правила относительно диеты и отказа от спиртных напитков.
Инфицирование HCV не сопровождается формированием специфического иммунитета. Поэтому перенесенная болезнь не исключает необходимости соблюдения всех мер профилактики в дальнейшем.
Схема лечения в зависимости от типа HCV
Ранее терапия HCV вне зависимости от типа проводилось сочетанием интерферона и рибавирина. Подобное лечение часто вызывало побочные реакции. Причем степень их тяжести нередко становилась причиной отказа от терапевтической схемы. Впоследствии рекомендации относительно медикаментозной терапии изменились. Вместо интерферонов со стандартной продолжительностью действия доктора стали чаще прописывать пролонгированные формы, которые требовалось колоть только 1 раз в 7 дней.
Но в настоящее время перечень медикаментов, применяемых при различных генотипах, расширился противовирусными препаратами прямого действия.
Основные принципы лечения инфекции в зависимости от разновидности приведены в таблице:
| Тип патологии | Рекомендуемое лечение |
| 1а и 1b |
|
| 2, 3а, 3b |
|
| 4 |
|
| 5 |
|
| 6 |
|
Определение генотипа является ключевым для выяснения дальнейшей тактики терапии гепатита С. Но вне зависимости от разновидности патологии конечный результат лечения во многом зависит от самого пациента. Недостаточно приема противовирусных средств. Обязательно соблюдение диеты №5, полный отказ от алкоголя и вредных привычек.
Источник
Вирусный гепатит С — это серьёзное заболевание, которое требует своевременной диагностики и грамотного лечения. В противном случае возникают осложнения, ухудшающие уровень жизни пациента. Основным фактором результативной борьбы с болезнью является грамотно составленный план лечения. Для этого необходимо определение генотипа вируса гепатита С. Как правило, человек является носителем только одного вида. Однако на практике встречаются случаи, когда организм содержит два генотипа. В этом случае, врач назначит лечение, которое будет содержать в себе индивидуальную схему.
Виды генотипа вируса гепатита С
В настоящее время их насчитывается 11 разновидностей, болезнь считается чрезвычайно мутагенной. Для диагностики важны первые 5 типов. В частности, субтипы: 1а, 1b, 2a, 2b, 3a.
Опаснейшим из видов считается первый генотип. Вероятность излечения в таком случае составляет не более 50%. Это низкий показатель. Он отличается и наиболее длительным сроком терапии, который составляет не менее 48 недель. Пациенты, в организме которых содержится эта разновидность вируса, должны тщательно подходить к выполнению врачебных рекомендаций и внимательно следить за состоянием своего здоровья.
Самая эффективная борьба наблюдается врачами в случае с 2 и 3 генотипами. Они проще остальных поддаются лечению. Вероятность выздоровления равна 80%. Срок лечения по сравнению с 1 генотипом сокращается в два раза.
Первые три вида получили широчайшее распространение по всему миру. На территории Востока и западной Европы чаще остальных фиксируются случаи гепатита с вирусами 1 и 2 генотипа. В Америке распространены виды 1a и 1b. Жители африканских стран страдают гепатитом с 4 генотипом.
Примечательную статистику имеют жители Российской Федерации. В крови около 50% пациентов фиксируется вирус 1b, 20% — 3a, 10% — 1a, 5% — 2.
Каждая из разновидностей имеет свои особенности, оказывающие влияние на течение заболевания. Поэтому при постановке диагноза необходимо оперативно провести исследование на определение генотипа. Оно проводится в оснащённых лабораториях.
Зачем определять генотип
Генотип определяется для того, чтобы разработать грамотный терапевтический курс и определить нужную лекарственную дозировку. От этого зависит будущее состояние пациента, возвращение к полноценной здоровой жизни путём достижения ремиссии заболевания. Международная врачебная практика признаёт составление схемы лечения любого заболевания важнейшей задачей для борьбы с ним. Отсутствие чёткого терапевтического плана приводит к осложнениям и летальному исходу.
Таким образом, при обнаружении гепатита C в крови пациента необходимо тут же провести исследование его генотипа.
В зависимости от вида генотипа назначается индивидуальный терапевтический курс, который включает в себя разные методы борьбы с гепатитом C. Среди них использование лекарственных препаратов, физиотерапия, лечебная физкультура. Кроме того, применяют специальную диету, а иногда — способы народной медицины. Составленные схемы лечения отличаются по длительности.
Терапия назначается с учётом многих других факторов. Среди них:
Чем моложе пациент, тем больше шансов на быстрое выздоровление
- Возраст пациента. Чем моложе больной, тем больше есть шансов на быстрое выздоровление.
- Пол. По статистике женский организм гораздо легче поддаётся лечению, чем мужской.
- Наличие сопутствующих заболеваний, которые значительно осложняют процесс выздоровления и требуют консультации и наблюдения соответствующих специалистов.
Кроме того, генотип гепатита C влияет и на сложность протекания болезни. Благодаря его определению появляется возможность обозначить способы борьбы с клиническими проявлениями недуга у конкретного пациента.
Генотип вирусного гепатита C определяется единожды. Однако в случае повторного заражения процедуру проходят ещё раз, поскольку некоторые пациенты могут быть носителями разных видов. Но один из них всегда доминирующий.
Гепатит C регулярно мутирует и видоизменяется. Это становится причиной возникновения новых подтипов, ввиду чего замедляются и усложняются составление плана лечения и терапевтический процесс в целом. Становится необходимостью постоянно создавать новые вакцины и проводить сложнейшие исследования. Современные научные разработки в области вирусного гепатита C имеют большой потенциал. Ведущие учёные в области гепатологии проводят активные исследования, которые затем послужат основой для создания новых эффективных вакцин против гепатита C различных генотипов. На основе этих разработок создаются усовершенствованные терапевтические курсы, появляются новые способы борьбы с заболеванием.
Способы определения
Существуют различные методы определения генотипа HCV. Они отличаются по специфике, но каждый из них эффективен и активно используется в медицине.
- Иммуноферментный анализ (сокращённо ИФА). Это высокочувствительный лабораторный метод. Способ базируется на специфической реакции антиген-антитело. ИФА разработан с опорой на актуальные научные течения в области иммунологии, химии и физики. Он считается одним из самых стремительно развивающихся направлений в энзимологии. ИФА пользуется большим распространением и популярностью, что обуславливается демократичной стоимостью, возможностью разработки каскадных систем повышения химических сигналов, а также простыми способами регистрации. Его отличает повышенная стабильность реагентов. Помимо медицины ИФА применяется в различных секторах промышленности, сельского хозяйства и области микробиологии. Он становится основой для научных трудов, разработок и исследований в сферах химии, биологии, гепатологии. ИФА имеет большое значение для актуальной на сегодняшний день области — охраны окружающей среды. В случае высокой оснащённости клиники и наличия необходимых для проведения анализа реактивов, подготовка результата займёт около 24—48 часов с момента забора крови. В ситуациях, требующих срочного определения генотипа, срок способен сократиться до 2—3 часов. Интерпретацией результатов анализа должен заниматься исключительно компетентный врач. Этот метод отличается дороговизной в сравнении с другими способами определения генотипа.
- ПЦР — лабораторный метод, который базируется на одновременной амплификации. Для количественного определения используют два пути — флуоресцентные красители, интеркалирующие в двухцепочечные молекулы ДНК и модифицированные олигонуклеотиды (ДНК-зонды), которые флюоресцируют после гибридизации с комплементарными участками ДНК. К преимуществам такого подхода относят высокую чувствительность, универсальность и точность. Результат бывает готов уже через 5—7 часов с момента забора крови. Способ отличается сравнительно низкой стоимостью. Кровь нужно сдавать строго натощак. Это достаточно информативный метод определения генотипа вируса гепатита C. Этот способ популярен в различных областях медицины. Расшифровка ПЦР анализа помимо определения генотипа позволяет обнаружить наличие грибковых заболеваний, вирусов папилломы человека, онкологических клеток, ВИЧ- и СПИД-инфекций.
- Иммуноблоттинг (иммуноблот) — специфичный высокочувствительный способ, который применяется для подтверждения неопределённых результатов анализов пациентов, что получают посредством РПГА или ИФА. Материалом исследования служит сыворотка или плазма крови. Для исследования на одном стрипе необходимо 1,5—2 мл крови или 15—25 мкл сыворотки. Этот метод намного точнее, чем ИФА. Он считается одним из сложнейших и совершенных современных способов. На подготовку результатов обычно уходит от 1 до 10 дней. Иммуноферментный анализ имеет сравнительно низкую стоимость, ввиду чего является доступным и популярным.
Эти способы помогают правильно определить генотипы вируса. Процедура имеет ключевое значение при составлении плана лечения заболевания. От грамотности и оптимальности терапевтической схемы зависит успех борьбы с недугом: остановка развития патологических процессов, сохранение нормального состояния ткани печени, ликвидация появления осложнений. Генотип вируса также определяет срок лечения и дозировку лекарственных средств. Традиционно человеческий организм содержит в себе один вирусный генотип, но встречаются случаи, когда разновидностей может быть две. Повторная диагностика, как правило, проводится при вторичном заражении. Это также требуется для определения оптимального терапевтического плана, который разрабатывается исходя из особенностей генотипа вируса.
Источник
