Микробиологическое исследование крови на гепатиты в с

В перечне наиболее распространенных вирусных заболеваний лидирующие позиции заняты ВИЧ-инфекцией и гепатитом. Они долгое время развиваются бессимптомно, из-за чего выявить их на ранней стадии довольно сложно. Чтобы определить точную причину недомогания, врач использует специфические методы диагностики. К ним причисляют ИФА, иммуноблотинг, ПЦР, ПНР. Расшифровка анализа крови на ВИЧ и гепатит С и В – это начальный этап. Диагноз ставят, опираясь на данные всего комплекса. В противном случае нет полной уверенности в его достоверности.

При отсутствии своевременного лечения ВИЧ-инфекция провоцирует возникновение синдрома приобретенного иммунодефицита. Впоследствии в анамнезе появляются злокачественные образования и вторичные инфекции. ВИЧ может протекать по-разному. Ослабленная иммунная система не способна воспрепятствовать жизнедеятельности болезнетворных микроорганизмов.

Гепатит В – инфекционное заболевание, поражающее печень. Патология бывает хронической и острой. Возбудитель попадает в организм через кровь и другие биологические материалы. Риск возникновения недуга особенно велик у медицинских работников. В 1982 году была разработана вакцина, благодаря которой вероятность заражения можно минимизировать. Прививка от гепатита В входит в календарь профилактических прививок, который утвержден Минздравом.

Гепатит С – это еще одна форма тяжелого вирусного заболевания. В группу риска входят люди, которые:

принимают наркотики;
работают в больнице;
ведут неправильный образ жизни;
посещают стоматологический кабинет, салоны красоты;
делают татуировки и пирсинг.

Неправильный образ жизни

Заразиться гепатитом С можно при переливании крови и гемодиализе. Клиническая картина у всех разновидностей заболевания довольно схожа. В ней присутствует сильная усталость, желтуха, суставные боли, изменение цвета урины и кала, зуд кожи. Недуг вызывает патологические изменения паренхиматозной ткани печени, которые со временем приводят к циррозу и раку печени.

Нормальные показатели анализа

Для определения антител к HIV (вирус иммунодефицита) используют ПЦР и ИФА. Эффективность последнего метода равна 99%. К дополнительным преимуществам иммуноферментного анализа относят доступность и приемлемую стоимость. Для проведения клинических исследований необходима кровь пациента. Кровь на ВИЧ и гепатит (В и С) берут из вены на голодный желудок. Результат будет известен через 5–10 дней. Иммуноферментный анализ покажет наличие антител, если инфицирование произошло больше двух месяцев назад. Защитные антитела также присутствуют в слюне и урине больного человека, но исследования, осуществляемые на их основе, считаются недостаточно информативными.

Анализ крови

Анализ крови на гепатит В назначают:

при подготовке к вакцинации, беременности, обнаружении HBs-антигена, повышении АСАТ (АЛАТ);
для определения первопричины хронических патологий желчного пузыря и печени;
если в клинической картине имеются симптомы, характерные для данной патологии.

Специфическое исследование крови – этап, который должны проходить доноры и пациенты, входящие в группу риска. Результатом подробного анализа становится реакции на маркеры, которые обозначаются, как:

HBsAg, HBeAg.
Анти-HBs, анти-HBc (core) IgG, анти-HBc (core) IgM.
HBV-ДНК.

Показания к проведению клинического исследования на гепатит С те же, что и в предыдущем случае. Больной здоров, если антитела на ВИЧ и гепатит (С и В) не выявлены. В случае с вирусом иммунодефицита отрицательный результат (норма) возможен в первые несколько недель инфекционного периода. Исключением из правил также считается серонегативная разновидность гепатита С.

Ложноположительное значение

При ложноположительном результате назначается повторный анализ

Ни один диагностический метод нельзя назвать точным на 100%. Получение ложноположительного результата свидетельствует о присутствии в крови белковых соединений, которые по строению схожи с возбудителем ВИЧ-инфекции, гепатита В и С. В подобной ситуации врач направляет больного на повторное прохождение анализа или назначает более эффективное исследование. В случае с ВИЧ пациент сдает биологический материал для проведения иммуноблотинга.

При постановке диагноза врач должен быть уверен в достоверности полученных сведений. Иначе терапевтическая схема не принесет желаемого эффекта. Тест на ВИЧ окажется ошибочно положительным, если:

в анамнезе больного есть венерические заболевания и (или) вирусный гепатит;
пациент страдает от аллергической реакции;
у больного имеются проблемы с почками и кишечником (воспаление функциональной ткани и слизистых оболочек, появление новообразований);
присутствуют гормональные нарушения и сбои в ферментном составе крови.

Ложноположительный результат при гепатите выявляют в 15% обратившихся пациентов. Он может быть спровоцирован следующими факторами:

Медикаментозная терапия

Медикаментозная терапия (иммунодепрессанты, альфа-интерфероны).
Особенности иммунной системы.
Повышенная концентрация криоглобулинов.
Аутоиммунные патологии.
Начальная стадия вирусного гепатита (недостаточная концентрация защитных антител, небольшая вирусная нагрузка на организм).
Наличие гепарина в крови.
Беременность.
Злокачественные или доброкачественные опухоли.
Тяжелые инфекционные заболевания.
Ошибки медицинского персонала (несоблюдение условий хранения, переноски или анализа биологического материала).
Иммунизация против столбняка и гриппа.
Парапротеинемия (появление в крови функционально неполноценных белков).

Чтобы избежать сомнительных результатов при клинических исследованиях на ВИЧ или гепатит, необходимо использовать диагностические наборы от одного изготовителя.

Положительный результат

На ранней стадии гепатита В (в фазе обострения) выявляют положительную реакцию на маркеры HBeAg, HBV-ДНК, HBsAg. Возможно получение ответа на антитела анти-HBc (core) IgM и IgG. О вирусном гепатите в запущенной форме свидетельствует получение данных о анти-HBe (HBeAg при этом будет отрицательным). Если больной пошел на выздоровление, клинические анализы покажут присутствие анти-HBs, анти-HBc (core) IgG, анти-HBe.

Результаты учитывают в качественном и количественном суммарных показателях. Эти сведения получают в ходе расширенного анализа крови на гепатит В. В большинстве случаев больному предлагают сдать биологический материал только на антитела или антигены. Этого будет достаточно для полноценного скрининга. Развернутую форму исследования на гепатит назначают при получении положительного результата.

Для диагностики часто используют ПЦР, с его помощью можно обнаружить ДНК или РНК возбудителя. Иммуноферментный анализ и метод полимеразной цепной реакции применяют в стационаре. Для их проведения требуется специальная аппаратура. В домашних условиях делается только экспресс-тест. Данные, полученные таким образом, считаются ориентировочными. Впоследствии может потребоваться подтверждение результата.

Если у пациента подозревают гепатит С, то его направляют на иммуноферментный анализ антител. В составе крови могут присутствовать иммуноглобулины G или М. Наличие последнего компонента свидетельствует об активной фазе заболевания.

При обнаружении соединения G подозрения относительно гепатита С не подтверждаются. Иммуноглобулин этого типа появляется в крови тех, кто самоизлечился от заболевания или перенес вакцинацию (в случае с гепатитом В). Положительный результат фиксируют при выявлении следующих белковых соединений:

Иммуноферментный анализ антител

Анти-ВГС IgM – репликация возбудителей вирусного гепатита С.
Анти ВГС IgG – иммунная защита от гепатита.
Ag ВГС – наличие возбудителей гепатита С.
РНК ВГС – интенсивное воспроизводство вирусов.

Иммуноферментный анализ при ВИЧ-инфекции дает положительный результат при обнаружении в крови антител IgM (обозначение неизлечимого состояния). Вероятность их обнаружения возрастает с течением времени. Через 84 дня после заражения показатель будет равен 95%. Для его подтверждения врач может назначить дополнительные клинические исследования.

ВИЧ и гепатит – тяжелые вирусные недуги, которые провоцируют возникновение патологических изменений. Успешность терапии во многом зависит от периода обнаружения заболевания. Чем раньше пациент обратится в медицинское учреждение, тем больше шансов на восстановление пораженных органов. Самостоятельно разобраться в показателях, полученных в результате иммуноферментного анализа, нельзя. Сохранить качество жизни без вмешательства традиционной медицины невозможно.

Источник: medgepatit.com

Источник

Вирус гепатита В — семейство Hepadnaviridae род Orthohepadnavirus.

Морфология:ДНК-содержаший вирус сферической формы. Состоит из сердцевины, состоящей из 180 белковых частиц, составляющих сердцевинный НВс-антиген и липидсодержащей оболочки, содержащей поверхностный HBs-антиген. Внутри сердцевины находятся ДНК, фермент ДНК-полимераза, обладающая ревертазной активностью, и концевой белок НВе-антиген.

Геном представлен двунитевой ДНК кольцевой формы.

Культуральные свойства. Не культивируется на куриных эмбрионах, не обладает гемолитической и гемагглютинирующей активностью. ВГВ культивируется только в культуре клеток.

Резистентность. Высокая к факторам окружающей среды и дезинфицирующим веществам. Вирус устойчив к длительному воздействию кислой среды, УФ-излучению, действию спирта, фенола.

Антигенная структура. Сложная. В суперкапсиде вируса находится HBs-антиген, который локализован в гидрофильном слое на поверхности вириона. В формировании HBs-антигена участвуют 3 полипептида в гликозилированной форме:preSl — большой полипептид; preS2 — средний полипептид; S — малый полипептид.

Эпидемиология: Развитие инфекционного процесса при попадании в кровь. Заражение происходит при парентеральных манипуляциях (инъекциях, хирургических вмешательствах), переливании крови.

Патогенез и клиника заболевания.Инкубационный период 3—6 месяцев. Инфекционный процесс наступает после проникновения вируса в кровь. ВГВ из крови эндоцитозом проникает в гепатоцит. После проникновения вируса происходит достраивание плюс-нити ДНК ДНК-полимеразой до полноценной структуры. Клиническая картина характеризуется симптомами поражения печени, в большинстве случаев сопровождается развитием желтухи.

Иммунитет.Гуморальный иммунитет, представленный антителами к HBs-антигену, защищает гепатоциты от вируса, элиминируя его из крови.

Клеточный иммунитет освобождает организм от инфицированных гепатоцитов благодаря цитолитической функции Т-киллеров. Переход острой формы в хроническую обеспечивается нарушением Т-клеточного иммунитета.

Микробиологическая диагностика.Используют серологический метод и ПЦР. Методами ИФА и РНГА в крови определяют маркеры гепатита В: антигены и антитела. ПЦР определяют наличие вирусной ДНК в крови и биоптатах печени. Для острого гепатита характерно обнаружение HBs антигена, НВе антигена и анти-HBc-IgM антитела.

Лечение. Использование интерферона, интерфероногенов: виферона, амиксина, ингибитора ДНК-полимеразы, препарата аденинрибонозида.

Профилактика.Исключение попадания вируса при парентеральных манипуляциях и переливаниях крови (применением одноразовых шприцев, проверкой на гепатит В по наличию HBs-антигена в крови доноров крови).

Специфическая профилактика осуществляется вакцинацией рекомбинантной генно-инженерной вакциной, содержащей HBs-антиген. Вакцинации подлежат все новорожденные в первые 24 часа жизни. Длительность поствакцинального иммунитета — не менее 7 лет.

Вирус гепатита Сотносится к семейству Flaviviridaeроду Hepacivirus.

Морфология.Сложноорганизованный РНК-содержащим вирус сферической формы. Геном представлен одной линейной «+» цепью РНК, обладает большой вариабельностью.

Антигенная структура.Вирус обладает сложной антигенной структурой. Антигенами являются:

1. Гликопротеины оболочки

2. Сердцевинный антиген НСс-антиген

3. Неструктурные белки.

Культуральные свойства. ВГС не культивируется на куриных эмбрионах, не обладает гемолитической и гемагглютинирующей активностью. Резистентность.чувствителен к эфиру, УФ-лучам, нагреванию до 50С.

Эпидемиология.Заражение ВГС аналогично заражению ВГВ. Наиболее часто ВГС передается при переливаниях крови, трансплацентарно, половым путем.

Клиника:Часто встречаются безжелтушные формы, течение инфекции в острой форме, в 50 % случаев процесс переходит в хроническое течение с развитием цирроза и первичного рака печени.

Микробиологическая диагностика:Используются ПЦР и серологическое исследование. Подтверждением активного инфекционного процесса является обнаружение в крои вирусной РНК ПЦР. Серологическое исследование направлено на определение антител к NS3 методом ИФА.

Профилактика и лечение.Для профилактики – тоже, что и при гепатите В. Для лечения применяют интерферон и рибовирин. Специфическая профилактика – нет.

Вирус гепатита D — дефектный вирус, не имеющий собственной оболочки. Вирион имеет сферическую форму, который состоит из однонитчатой РНК и сердцевинного HDc-антигена. Эти белки регулируют синтез генома вируса: один белок стимулирует синтез генома, другой — тормозит. Различают три генотипа вируса. Все генотипы относятся к одному серотипу.

Резервуаром BFD в природе являются носители ВГВ. Заражение BFD аналогично инфицированию ВГВ.

Микробиологическая диагностика осуществляется серологическим методом путем определения антител к BFD методом ИФА.

Профилактика: все те мероприятия, которые используют для профилактики гепатита В. Для лечения используют препараты интерферона. Вакцина против гепатита В защищает и от гепатита D.

Source: StudFiles.net

Источник

Гепатиты представляют собой серьезные заболевания, которые при неблагоприятном стечении обстоятельств могут приводить к раку печени, циррозу или печеночной недостаточности. В основе патологии лежат воспалительные процессы, обусловленные инфекционными или токсическими поражениями печени. Распространению гепатитов в обществе способствуют наркомания, алкоголизм, беспорядочные половые связи и низкое качество медицинских услуг.

Ключевым фактором в успешном лечении заболевания является его ранняя и точная диагностика при помощи лабораторных исследований крови. Рассмотрим основные виды анализов, которые необходимо сдать, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие гепатита.

Какой анализ сдать? Маркёры вирусных гепатитов

Анализ может сдать любой желающий. Также пройти обследование рекомендуется лицам, у которых наблюдаются желтушность, изменение цвета экскрементов, слабость, тошнота, утрата аппетита, лихорадочные состояния, суставно-мышечные боли, тяжесть в правом подреберье. Если клинические симптомы вирусного гепатита отсутствуют, основанием для анализов являются повышенные концентрации внутриклеточных ферментов АсАт и АлАт, холестаз (уменьшение выделения желчи в двенадцатиперстную кишку) и контактирование с инфицированными гражданами. Обязательно сдавать кровь должны сотрудники медицинских учреждений, больные, которым предстоят операции, доноры крови и беременные женщины.

Гепатит A

(болезнь Боткина) передается через жидкости организма, продукты питания, воду и предметы быта. Патология может протекать в острой, подострой и субклинической (бессимптомной) формах. Она считается самой доброкачественной из всех форм инфекции и практически не вызывает хронических поражений печени. Смертность составляет менее 0,4%. Чаще всего симптомы патологии исчезают за 2 недели, а период восстановления функций печени не превышает 1,5 месяцев. Заболеваемость в странах СНГ составляет 20–50 человек на 100 000 населения.

Для диагностики проводятся следующие качественные методы исследования сыворотки крови:

определение специфичных участков РНК вируса в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени – обеспечивает 100% точность результата;
иммуноглобулины класса М–IgM обнаруживаются при первых клинических симптомах и далее 90–180 дней вплоть до полного выздоровления;
антитела класса G–IgG начинают вырабатываться во время болезни и остаются в организме навсегда. Исследование сыворотки крови на данные маркёры гепатита А может проводиться в целях контроля проведенной вакцинации, поскольку эти антитела показывают наличие иммунитета к заболеванию.

Гепатит B

вызывается вирусом Hepadnaviridae, передается половым путем или через кровь. Протекает в острой и хронической формах. Он приводит к значительному поражению печени, а нередко – к циррозу или раку. В данный момент около 300 млн людей на планете являются носителями этой инфекции. Для уточнения диагноза следует сделать такие тесты:

качественные или количественные анализы на антиген HBsAg, а также антитела Anti-HBc IgG, которые есть у больных, выздоровевших лиц и здоровых носителей. Содержание HBsAg в плазме крови у здорового человека не превышает 0,05 МЕ/мл;
качественные тесты на белок HBeAg и антитела Anti-HBc IgM, свидетельствующие об остром течении болезни;
определение ДНК вируса методом ПЦР в режиме реального времени.

Гепатит C

считается самым распространенным и наиболее опасным среди всех разновидностей заболевания. Часто он протекает бессимптомно на начальных стадиях и обнаруживается только при появлении таких серьезных осложнений, как цирроз или карцинома. Вирус передается преимущественно через жидкости организма и плохо поддается лечению. Его носителями в настоящее время считаются 500 млн людей.

Положительный анализ на гепатит С предполагает наличие соответствующего РНК-вируса в крови больного. Присутствие Anti-HCV и HCV IgG в организме, выявляемое качественными методами тестирования, говорит об острой стадии болезни. Количественные методы определения РНК методом ПЦР используются для оценки результативности терапии. Для генотипирования вируса и выбора тактики лечения необходимо исследование на интерлейкин-28-бета. Для проверки скрининговых анализов при положительном результате используется тест на антитела – рекомбинантный иммуноблот для выявления IgG-антител к различным антигенам вируса гепатита С.

Гепатиты D, G

. Активность вируса гепатита D зависит от наличия в организме вируса типа B. Заболевание протекает очень тяжело. Если заражение двумя типами вируса происходит одновременно, то у больного диагностируется патология в острой стадии, если же дельта-вирус (гепатит D) развивается на фоне уже имеющейся печеночной инфекции, то отмечается обострение заболевания. Гепатит G предположительно активизируется при наличии других типов инфекции, сам же он не вызывает активную форму болезни.

Лабораторное тестирование предусматривает выявление РНК-цепочек вирусов, а также выявление антител класса IgM, позволяющих отличить острую форму заболевания от хронической. Эти исследования являются качественными.

Гепатит E

по своему течению имеет сходство с вирусом типа А. Он передается через жидкости организма, сопровождается выраженным болевым синдромом и может принимать молниеносные формы. Эта патология особенно опасна для беременных женщин. У них болезнь может осложниться острой печеночной недостаточностью и энцефалопатией. В 20–30% случаев заболевание заканчивается смертью беременной. Если при лабораторном тестировании у пациента обнаруживаются антитела класса IgG и IgM, то это свидетельствует о патологии в острой стадии.

Подготовка к сдаче анализа и процедура забора крови

Биоматериал необходимо сдавать строго натощак. Также в течение суток перед посещением лаборатории следует воздерживаться от употребления жирной пищи и алкоголя. Результаты качественных тестов в большинстве случаев готовы уже через четыре часа после забора крови. На проведение количественного исследования может уйти до одного рабочего дня, не считая дня сдачи анализов.

Расшифровка результатов анализов на гепатит

Особенности расшифровки ответов зависят от типа исследования. Качественный тест позволяет установить факт наличия или отсутствия инфекции, а количественный дает возможность определить конкретную концентрацию исследуемого вещества. В некоторых случаях позитивным знаком является полное отсутствие антигена или белка, а в некоторых – содержание вещества в количестве ниже установленного уровня.

«Отрицательный» результат

Формулировка «анализ на гепатит – отрицательный» в бланке анализа свидетельствует об отсутствии заболевания. Подобный результат можно получить при прохождении качественного исследования методом ПЦР, объектом которого является РНК- или ДНК-цепочка вируса. Отрицательный ответ при проведении количественного иммунологического анализа говорит об отсутствии положительной реакции на наличие антигенов соответствующего типа. Но иногда при серологических (иммунологических) исследованиях в бланке анализов пишут величину ниже определенного значения, и в таком случае результат количественного теста считают отрицательным. Например, для вируса гепатита B пороговый уровень содержания антигена HBsAg в сыворотки крови составляет 0,05 МЕ/мл (единиц на миллилитр), когда показатель ниже – результат отрицательный, выше – положительный. На самом деле концентрацию ниже 0,05 МЕ/мл оборудование просто не может обнаружить, но, если де факто HBsAg присутствует в сыворотке крови в сколь угодно малом количестве – это означает инфицирование. Нормой является полное отсутствие как ДНК- или РНК-цепочек вирусов, так и их антигенов в биоматериале. А вот наличие антител к антигенам при отсутствии последних свидетельствует о том, что у вас выработан иммунный ответ на определенный вирус, либо вы переболели вирусным гепатитом ранее или прошли вакцинацию.

Анализ на гепатит «положительный»

Если результаты оказались положительными, то пациенту рекомендуется повторно пройти обследование, так как в некоторых случаях ложноположительный ответ может объясняться нарушением техники проведения тестирования, некачественными реактивами, неправильной подготовкой к процедуре (проведением теста после приема пищи), чувствительностью и специфичностью метода исследования, точностью анализаторов. Позитивный результат также может наблюдаться у человека, который некоторое время назад переболел острой формой вируса или является его здоровым носителем.

Согласно постановлениям Главного государственного санврача РФ от 22.10.2013 г. № 58 и от 28.02.2008 г. № 14, а также приказу Управления Роспотребнадзора по г. Москве от 01.10.2008 г. № 122 сведения о положительных результатах исследований на маркёры вирусных гепатитов передаются в ОРУИБ центров Госсанэпиднадзора.

Для того чтобы пройти обследование, нужно предъявить сотруднику диагностической лаборатории паспорт или документ, заменяющий его. Документ должен содержать информацию об адресе регистрации больного, а также его фотографию. При желании пациент может пройти тестирование анонимно, но подобные результаты не принимаются для оказания медпомощи.

При получении положительного ответа больной должен обратиться к врачу-инфекционисту, который назначит дополнительные исследования с целью подтверждения диагноза. Во время терапии тестирование может проводиться раз в 3 дня с целью отслеживания динамики состояния больного и эффективности лечения. При хроническом гепатите анализы сдаются каждые 6 месяцев с целью контроля состояния пациента.

Полное излечение возможно при своевременном проведении и правильно выбранной тактике терапии. Эффективность лечения зависит от конкретной инфекции, стадии болезни и общего состояния больного. Необходимость госпитализации определяется индивидуального для каждого пациента, в зависимости от тяжести его состояния. После выздоровления у человека сохраняются антитела, обеспечивающие ему пожизненный иммунитет либо устойчивый иммунный ответ на несколько лет, что зависит от многих факторов: возраста, индивидуальных особенностей организма и других.

Может ли анализ на гепатит быть ошибочным?

Ошибочные результаты нередко фиксируются при использовании некачественных реактивов, проведении исследования на устаревшем оборудовании или нарушении технологии тестирования. Иногда точность метода исследования предполагает определенный процент ошибки. Ложноотрицательный ответ возможен при тестировании на слишком ранней стадии заболевания, когда антитела еще не начали вырабатываться в нужном количестве, ложноположительный – на последней стадии острого гепатита, в период выздоровления.

Стоимость анализа

В государственных клиниках по направлению врача можно сдать анализ на гепатит бесплатно. Исследование на платной основе проводится в большинстве крупных городов страны. Цена зависит от конкретной лаборатории, используемого оборудования, сроков проведения, типа теста, региона и ряда других факторов.

Качественный тест на антитела к РНК- и ДНК-вирусу можно сделать в Москве и Санкт-Петербурге по цене 550–900 рублей. Стоимость количественного исследования варьируется в пределах 1200–10 000 рублей в зависимости от конкретного антигена, метода исследования, класса медицинского оборудования. Например, оценка вирусной нагрузки с детекцией в режиме реального времени, необходимая для определения эффективности лечения гепатита С, обойдется в 17 000–22 000 рублей. Выявление антигенов качественным методом в таких городах, как Новосибирск, Мурманск, Кострома, Махачкала, Симферополь будет стоить 300–800 рублей.

Сдача анализа на гепатит позволяет оперативно выявить заболевание и начать его лечение. А своевременно проведенная терапия в большинстве случаев обеспечивает полное выздоровление пациента или подавление активности вируса. Одним из главных способов профилактики гепатита B (наряду с соблюдением правил гигиены, а также с избеганием беспорядочных половых связей и отказом от приема наркотиков) является вакцинация. Ее обязательно нужно проводить тем, кто находится на гемодиализе, часто меняет сексуальных партнеров, работает с кровью или проживает в одной квартире с лицами, страдающими хронической формой болезни. Самые эффективные вакцины – отечественные. Они прицельно рассчитаны на те штаммы (генотипы) вируса, которые преобладают в нашей стране. Кроме того, современные российские вакцины производят без консерванта, в основе которого содержится ртуть.

Источник