Набор реагентов для количественного определения днк вируса гепатита в
[09-009]
HBV, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]
2890 руб.
Исследование для выявления возбудителя гепатита B (HBV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (ДНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.
ДНК HBV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HBV, определяемых тест-системой, составляет 75,0 — 1,0*10^8 МЕ/мл.
Синонимы русские
Вирус гепатита В (ВГВ), количественное определение ДНК.
Синонимы английские
Hepatitis B Virus DNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood; HBV Viral Load; Hepatitis B Virus DNA Quant.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Единицы измерения
МЕ/мл (международная единица на миллилитр).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Вирусный гепатит В (ВГВ) – инфекционное заболевание печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV). Среди всех причин развития острого гепатита и хронической вирусной инфекции вирус гепатита В считается одной из самых распространенных в мире. Действительное количество инфицированных неизвестно, так как у многих людей инфекция протекает без специфических симптомов и за медицинской помощью они не обращаются. Нередко вирус обнаруживают при проведении профилактических лабораторных исследований. По приблизительным подсчетам, в мире около 350 миллионов человек поражено вирусом гепатита В и ежегодно от его последствий умирает 620 тысяч. В России количество носителей HBV превышает 5 миллионов человек.
Источник инфекции – больной ВГВ или бессимптомный вирусоноситель. HBV передается с кровью и другими биологическими жидкостями. Заразиться можно при незащищенном половом контакте, использовании нестерильных шприцев, переливании крови и пересадке донорских органов, ребенка может заразить мать во время или после родов (через трещины в сосках). В группу риска входят: медицинские работники, у которых возможен контакт с кровью пациента, пациенты, получающие гемодиализ, инъекционные наркоманы, люди, ведущие беспорядочную половую жизнь, дети, рождённые от матерей с ВГВ.
Инкубационный период заболевания – от 4 недель до 6 месяцев. Вирусный гепатит В может протекать как в виде легких форм, длящихся несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции. Основные признаки гепатита: желтушность кожных покровов, лихорадка, тошнота, утомляемость, в лабораторных анализах – нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. Считается, что после перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет. Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.
Есть несколько специфических тестов для выявления существующего или перенесенного вирусного гепатита В. Для подтверждения наличия инфекции и уточнения периода заболевания используют определение антигенов вируса, антител к ним и ДНК вируса.
Полимеразная цепная реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки позволяет оценить интенсивность развития болезни, эффективность проводимой терапии или развитие устойчивости к противовирусным препаратам.
Существует зависимость между концентрацией вируса в крови и исходом острого вирусного гепатита В. При низком уровне виремии вероятность перехода инфекции в хроническую форму близка к нулю, а инфицированный человек неопасен для окружающих. При высокой вирусной нагрузке (5 копий/мл) хронизация возникает часто и больной является потенциальным источником инфекции. Доказана связь между количеством ДНК вируса в сыворотке крови, присутствием HBeAg, повышенной АЛТ и развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы (рака печени).
Эффективность противовирусной терапии оценивается по уменьшению количества ДНК вируса в крови. Через 3-6 месяцев после начала лечения вирусная нагрузка при адекватном терапевтическом ответе должна уменьшиться на 1-2 порядка. Отсутствие уменьшения количества вируса или его увеличение на фоне проводимого лечения требует пересмотра и изменения терапии.
Количественное определение ДНК вируса гепатита В совместно с клинической картиной заболевания и биохимическими показателями, маркерами инфекции, а также результатом пункционной биопсии печени позволяет дать прогноз заболевания и оценить необходимость противовирусной терапии.
Для чего используется исследование?
- Для прогнозирования течения вирусного гепатита В.
- Для подтверждения хронической формы вирусного гепатита В.
- Для выявления носителей вирусного гепатита В и мониторинга активности размножения вируса.
- Для выявления скрытых и мутантных штаммов вируса гепатита В.
- Для оценки эффективности противовирусной терапии гепатита В и принятия решения о дальнейшей тактике лечения.
Когда назначается исследование?
- При качественном обнаружении ДНК вируса гепатита В.
- При остром и хроническом вирусном гепатите В.
- При микст-гепатитах.
- До и во время противовирусной терапии.
Что означают результаты?
Референсные значения: не обнаружено
- «Не обнаружено» – ДНК вируса гепатита В не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (50 МЕ/мл);
- от 75 до 1,2*10^5 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, низкая виремия;
- от 1,2*10^5 до 1,2*10^6 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, средняя виремия;
- более 1,2*10^6 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, высокая виремия;
- > 1*10^8 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.
Линейный диапазон концентраций ДНК вируса гепатита В, определяемых тест-системой, составляет 75,0 — 1,0*10^8 МЕ/мл.
Важные замечания
- Количественное определение ДНК вируса гепатита В является обязательным исследованием до назначения противовирусной терапии. Во время курса лечения анализ необходимо повторить через 3-6 месяцев.
- Вирусный гепатит В нередко сочетается с вирусным гепатитом D.
Также рекомендуется
- HBsAg
- anti-HBc, IgM
- anti-HBc, антитела
- anti-HBe, антитела
- anti-HBs, антитела
- HBеAg
- HBV, ДНК [реал-тайм ПЦР]
- anti-HDV, антитела
- Anti-HCV, антитела, ИФА
- Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)
- Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
- Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
- Фосфатаза щелочная общая
- Альбумин в сыворотке
- Билирубин общий
- Холестерол общий
- Тромбиновое время
- Фибриноген
Кто назначает исследование?
Инфекционист, гепатолог.
Литература
- Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. — К.: Здоровье, 2000 – Т.1.: 601-654.
- Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling, and others. Use of Hepatitis B Virus DNA Quantitation To Predict Hepatitis Be Antigen Reversion in Cases of Chronic Hepatitis B. J Clin Microbiol. 2003 October; 41(10): 4793–4795. PMCID: PMC294957
- Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
- Management of Hepatitis B. An NIH Consensus Development Conference. Program and Abstracts. October 20–22, 2008.
Источник
Документ показан в сокращенном демонстрационном режиме! |
Получить полный доступ к документу
Для покупки документа sms доступом необходимо ознакомиться с условиями обслуживания
Я принимаю Условия обслуживания
Продолжить
Утверждена
приказом Председателя
Комитета фармацевтического
контроля МЗ РК
от 24 ноября 2009 года № 36
Инструкция
по применению изделия медицинского назначения для потребителя
(аннотация-вкладыш)
Название изделия медицинского назначения
Набор реагентов РеалБест ДНК ВГВ для выявления и количественного определения ДНК вируса гепатита В методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени
Состав и описание изделия
ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на выделении нуклеиновых кислот из сыворотки (плазмы) крови совместно с предварительно внесённым внутренним контрольным образцом и проведении реакции амплификации выбранного фрагмента ДНК с детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени.
Применённый в наборе метод дополнительного концентрирования нуклеотидного материала позволяет повысить чувствительность детекции и определения ДНК ВГВ.
Количественное определение ДНК ВГВ обеспечено применением в каждой постановке положительного контрольного образца (ПКО), охарактеризованного в международных единицах (МЕ/мл) по стандарту ВОЗ (WHO international standard for Hepatitis B virus NIBSC 97/746) и служащего образцом сравнения для расчета вирусной нагрузки.
Определение количества вирусной ДНК в исходной пробе проводится путём сравнения количества раундов — Ct, необходимых для достижения пороговой флуоресценции для анализируемого образца и охарактеризованного положительного контроля — ПКО, выполняющего роль образца сравнения, с введением дополнительной поправки на эффективность выделения ДНК.
2. Состав набора.
Комплект реагентов для выделения ДНК:
концентрирующий раствор — 4 фл. по 14 мл;
лизирующий раствор № 1 — 4 фл. по 4 мл;
лизирующий раствор № 2 — 4 фл. по 7 мл;
сорбент (суспензия магнитных частиц) — 1 фл., 1 мл;
осадитель ДНК — 4 фл. по 12 мл;
раствор для отмывки № 1 — 4 фл. по 8 мл;
раствор для отмывки № 2 — 4 фл. по 5 мл;
элюирующий раствор — 4 фл. по 2 мл.
Комплект контрольных и калибровочных образцов:
раствор для восстановления контрольных образцов (РВК) — 2 фл. по 4 мл;
положительный контрольный образец (лиофилизированный концентрат), (ПКО) — 1 фл.;
отрицательный контрольный образец на основе инактивированной сыворотки крови человека, не содержащей ДНК ВГВ, (ОКО) — 2 фл. по 10 мл;
внутренний контрольный образец (лиофилизированный концентрат), (ВКО) — 2 фл.;
калибровочные образцы КО1 и КО2 (используются в случае необходимости проверки адекватности работы аналитической системы, см. приложение 2), лиофилизированный концентрат — по 1 фл.;
Комплект реагентов для проведения ПЦР
Готовая реакционная смесь для ПЦР, лиофилизированная (ГРС) — 48 пробирок.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
(чувствительность набора)
Набор гарантированно выявляет ДНК ВГВ в концентрации 5 МЕ/мл при выделении ДНК из 1 мл пробы или 50 МЕ/мл — при выделении ДНК из 100 мкл пробы.
4. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
Источник
Комплектация | Кат.№ | Наименование | Форма | Срок изготовления | Кол-во тестов |
---|---|---|---|---|---|
FRT, набор реагентов полной комплектации, включает реагенты для всех этапов ПЦР-анализа, флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам | ТR-V5 (RG,iQ,Мх) | Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита В (HBV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» «АмплиСенс® HBV-FRT» Набор реагентов полной комплектации для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV). | вариант FRT 48F полная комплектация | со склада | 48 |
FRT, набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа, флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам | R-V5 (RG,iQ) | АмплиСенс HBV-FRT Набор реагентов для амплификации ДНК вируса гепатита B (HBV) Для выделения ДНК HBV используется автоматическая станция «NucliSENS easy-MAG» или наборы РИБО-сорб К2-1-Et-100 или РИБО-преп К2-9-Et-100. | вариант FRT 50F ПЦР-комплект | 15 суток | 76 |
FRT, набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа, флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам | R-V5-Mod (RG,iQ,Mx,Dt) | АмплиСенс® HBV-FL Набор реагентов для амплификации ДНК вируса гепатита B (HBV). Для выделения ДНК HBV используются наборы РИБО-сорб К2-1-Et-100 или РИБО-преп К2-9-Et -100)(для приборов «Rotor-Gene», «iQ5», «Mx3000P», «ДТ-96»). | вариант FRT 100F ПЦР-комплект | со склада | 120 |
FRT, набор реагентов полной комплектации, включает реагенты для всех этапов ПЦР-анализа, флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам | ТR-V5-M(RG,iQ,Mx) | Набор реагентов для количественного определения ДНК вируса гепатита В (HBV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» «АмплиСенс® HBV-Монитор-FRT» Набор реагентов полной комплектации для КОЛИЧЕСТВЕННОГО определения ДНК вируса гепатита B (HBV) с выделительным комплектом реагентов «РИБО-сорб». | вариант FRT 48F полная комплектация | со склада | 48 |
FRT, набор реагентов полной комплектации, включает реагенты для всех этапов ПЦР-анализа, флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам | TR-V5-Р-M (RG,iQ,Мх,Dt) | АмплиСенс HBV-Монитор-FRT НОВЫЙ ФОРМАТ Набор реагентов полной комплектации для КОЛИЧЕСТВЕННОГО определения ДНК вируса гепатита B (HBV) с выделительным комплектом реагентов «РИБО-преп». | вариант FRT, 50F, полная комплектация | 15 суток | 50 |
FRT, набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа, флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам | R-V5-М (RG,iQ,Mx) | АмплиСенс HBV-Монитор-FRT Набор реагентов для амплификации ДНК вируса гепатита B (HBV) (КОЛИЧЕСТВЕННОЕ определение). Для выделения ДНК HBV используется автоматическая станция «NucliSENS easy-MAG». | вариант FRT 50F ПЦР-комплект | со склада | 76 |
FRT, набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа, флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам | R-V5-MC (RG,iQ,Мх,Dt) | АмплиСенс® HBV-Монитор-FRT Набор реагентов для амплификации ДНК вируса гепатита B (HBV) (КОЛИЧЕСТВЕННОЕ определение), включает набор калибраторов для расчета коэффициента ВКО(для приборов «Rotor-Gene», «iQ5», «Mx3000P», «ДТ-96»). | вариант FRT, 50F, ПЦР- комплект | 15 суток | 80 |
FEP, набор реагентов полной комплектации, включает реагенты для всех этапов ПЦР-анализа, готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска | TV5-R0,5-FEP | Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита В (HВV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией по «конечной точке» «АмплиСенс HBV-FEP» Набор реагентов полной комплектации для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV). | вариант FEP 50R. пробирки 0,5 полная комплектация | со склада | 50 |
FEP, набор реагентов полной комплектации, включает реагенты для всех этапов ПЦР-анализа, готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска | TV5-R0,2-FEP | Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита В (HВV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией по «конечной точке» «АмплиСенс HBV-FEP» Набор реагентов полной комплектации для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV). | вариант FEP 50R. пробирки 0,2 полная комплектация | со склада | 50 |
FEP, набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа, готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска | V5-R0,5-FEP | АмплиСенс® HBV-FEP Набор реагентов для амплификации ДНК вируса гепатита B (HBV). Для выделения ДНК HBV используется набор РИБО-сорб К2-1-Et-100 или РИБО-преп К2-9-Et-100. | вариант FEP 50R. пробирки 0,5 ПЦР-комплект | 15 суток | 64 |
FEP, набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа, готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска | V5-R0,2-FEP | АмплиСенс HBV-FEP Набор реагентов для амплификации ДНК вируса гепатита B (HBV). Для выделения ДНК HBV используется набор РИБО-сорб К2-1-Et-100 или РИБО-преп К2-9-Et-100. | вариант FEP 50R. пробирки 0,2 ПЦР-комплект | 15 суток | 64 |
FEP, набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа, флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам | V5-FEP | АмплиСенс® HBV-FL Набор реагентов для амплификации ДНК вируса гепатита B (HBV). Для выделения ДНК HBV используется набор РИБО-сорб К2-1-Et-100. | вариант FEP 100R. пробирки 0,5 ПЦР-комплект | 8 суток | 120 |
ЭФ, набор реагентов полной комплектации, включает реагенты для всех этапов ПЦР-анализа, готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска | ТV5-100-R0,5 | Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле «АмплиСенс® HBV-EPh» Набор реагентов полной комплектации для выявления ДНК вируса гепетита В (HВV). | Вариант EPh, 100R, пробирки 0,5, полная комплектация | со склада | 100 |
ЭФ, набор реагентов полной комплектации, включает реагенты для всех этапов ПЦР-анализа, готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска | ТV5-100-R0,2 | Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле «АмплиСенс® HBV-EPh» Набор реагентов полной комплектации для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV). | вариант EPh 100R. пробирки 0,2 полная комплектация | со склада | 100 |
ЭФ, набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа, готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска | V5-100-R0,5 | Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле «АмплиСенс® HBV-EPh» Набор реагентов для амплификации ДНК вируса гепатита B (HBV). Для выделения ДНК HBV используется набор РИБО-сорб К2-1-Et-100 или РИБО-преп К2-9-Et-100. | вариант EPh 100R. пробирки 0,5 ПЦР-комплект | со склада | 110 |
ЭФ, набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа, готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска | V5-100-R0,2 | Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле «АмплиСенс® HBV-EPh» Набор реагентов для амплификации ДНК вируса гепатита B (HBV). Для выделения ДНК HBV используется набор РИБО-сорб К2-1-Et-100 или РИБО-преп К2-9-Et-100. | вариант EPh 100R. пробирки 0,2 ПЦР-комплект | со склада | 110 |
ЭФ, набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа, готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска | V5-200 | Набор реагентов для выявления ДНК вируса гепатита B (HBV) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле «АмплиСенс® HBV-EPh» Набор реагентов для амплификации ДНК вируса гепатита B (HBV). Для выделения ДНК HBV используется набор РИБО-сорб К2-1-Et-100 или РИБО-преп К2-9-Et-100. | вариант EPh 200. ПЦР-комплект | 8 суток | 220 |
Источник