Определение поверхностного антигена гепатита в

Инфицирование вирусом гепатита В – сильнейшая патология, способная разрушить функциональность печени за небольшой период времени. Выявление патологии происходит при помощи маркеров антител, одним из которых является поверхностный антиген вируса гепатита В.

Характеристика поверхностного антигена

Гепатит В на протяжении многих лет считается одной из главных проблем человечества. Патология характеризуется массовой гибелью клеток печени (гепатоцитов). Негативные процессы возникают вследствие активности воспалительного процесса, влекущего за собой развитие печеночной недостаточности. Болезнь способна протекать без характерных признаков, постепенно переходя в хроническую стадию.

Антитела к гепатиту

Инфицирование осуществляется при контактировании с биологическим материалом зараженного человека. Это может быть кровь, желчь, моча или слюна. При диагностировании заболевания проводятся лабораторные анализы на антитела. После проникновения вируса в организм наблюдается синтезирование белковых соединений. Они имеют название антитела к вирусу. Изучение позволяет установить характер осложнения воспалительного процесса или определить качество назначенного лечения.

Поверхностная оболочка вируса представляет собой белок HBsAg. Это один из главных маркеров, позволяющий установить характер зараженности организма человека. Выявление проводится в пределах 4–6 недель после попадания вируса. Метод с максимальной точностью выявляет инфицирование. Случаи стремительного исчезновения HBsAg сразу же после проявления симптоматических признаков могут свидетельствовать о начальном этапе развития гепатита фульминантного типа. При устранении белка на протяжении 3 месяцев ставится заключение о выздоровлении больного. У пациента исчезают симптоматические проявления, восстанавливаются обменные процессы. Если по прошествии полугода в биологическом материале обнаруживается поверхностный антиген, то это свидетельствует о переходе заболевания в хроническую фазу.

Отличительная особенность HBsAg заключается в стойкости. Имеет способность выживать в условиях различной среды (кислотной, щелочной), может подвергаться воздействию со стороны высоких и низких температур. Характеристики дают возможность вирусу проникать в клетки печени и проводить последующее разрушение внутреннего органа. Белок играет роль при формировании собственных защитных функций организма против гепатита В. После проведения вакцинации может проводиться лабораторное исследование крови, при этом в биологическом материале он не обнаруживается.

Разрушение печени вирусом

Разновидности анализов

При подозрении о наличии в организме вирусного гепатита В важно иметь представление не только о том, какие анализы рекомендуется сдавать, но и какая подготовка требуется от пациента. Подобные мероприятия проводятся с целью получения в дальнейшем максимально достоверных результатов. Основные требования включают в себя:

• проведение процедуры по забору крови натощак;
• последний прием пищи рекомендуется проводить не позднее, чем за 8–12 часов до анализа;
• из рациона за несколько дней до проведения исследования желательно исключить кофе и чай, так как эти напитки способны повлиять на полученные результаты;
• рекомендуется придерживаться разгрузочных дней, во время которых запрещается употребление жирной, острой и жареной пищи. Такие блюда способны провоцировать выработку ферментов, влияющих на результаты анализа.

Примерно за 2 недели до назначенной процедуры пациенту необходимо приостановить прием лекарственных препаратов. При отсутствии такой возможности следует сообщить об этом лечащему врачу.

При подозрении присутствия в организме человека вирусного гепатита пациент направляется на сдачу крови. Он называется количественный анализ. Метод позволяет установить активность патологии и шансы на полное выздоровление больного. В процессе расшифровки врач получает информацию относительно эффективности подобранной терапии, насколько организм пациента восприимчив к применению препаратов противовирусной направленности, готов ли больной к терапевтическим мероприятиям, направленным на устранение воспалительного процесса в области печени. Анализы сдаются не только при подозрении на присутствие гепатита, но и при подготовке к иммунизации организма.

Расшифровка результатов

Антиген HBsAg дает возможность установить характер развития или утихания патологического процесса. Положительный результат анализов может свидетельствовать о различных факторах:

• обострении имеющегося в организме заболевания;
• переходе патологии в хроническую стадию;
• ранее перенесенных процедурах переливания крови, при этом в биологическом материале донора присутствовал антиген HBsAg.

Расшифровка анализа крови

Выявление титра основных показателей должно проводиться с целью определения необходимости проведения иммунизации организма. Она осуществляется за счет использования вакцины против гепатита В. К тому же после прививки у человека формируется продолжительный иммунитет. Нормальный показатель при расшифровке результатов соответствует количественному значению 0–10 мМЕ/мл. Суммарное количество соответствует предельной норме 500 мкг/мл. Аналогичный показатель соответствует численности собственных белков сыворотки крови в организме. Конечный результат определяется в формате положительного, отрицательного или сомнительного заключения.

Расшифровывать данные должен квалифицированный специалист, при этом важно соблюдать точность и последовательность действий. От этого во многом зависит установление конкретного заключения, так как нередко в результате пациент получает сомнительный или ложный отрицательный результат.

Что делать, если результат положительный

Обнаружение положительного результата – повод обратиться к медицинскому специалисту. Подобной проблемой занимается врач-инфекционист. Для подтверждения диагноза требуется проведение ряда дополнительных диагностических исследований. После установления заключения больной госпитализируется, после чего назначается терапия.

Повторный анализ крови

Как правило, после получения подтверждающего результата пациент направляется на повторную процедуру. Это связано с тем, что при изучении могли быть использованы реагенты с неподходящими антителами. Обнаружение антигена к вирусу гепатита В не является поводом для паники. Современные методы терапии позволяют устранить патологию даже в самых запущенных стадиях. Пациенты в детском возрасте тяжелее переносят болезнь. Нередко она способна переходить в хроническую фазу.

Поверхностный антиген HBsAg является одним из маркеров гепатита В. Его обнаружение в крови человека свидетельствует о необходимости проведения лабораторных исследований, так как полученные данные одного маркера не способны дать полную информацию относительно имеющейся патологии. От активности действий больного зависит последующее течение заболевания и эффективность подобранного лечения. Терапия требует от пациента терпения, так как является продолжительной. Не следует пренебрегать врачебными рекомендациями, это снижает шансы избавиться от заболевания.

Комплексное исследование при подтвержденном вирусном гепатите В (HBV). Анализ маркеров инфекции позволяет установить клиническую стадию заболевания, иммунологический статус обследуемого, а также оценить эффективность лечения. Включает в себя определение белков вируса (антигенов), основных классов специфических антител, а также обнаружение ДНК вируса в крови.

Венозную кровь.

• Исключить из рациона жирную пищу в течение 24 часов до исследования.
• Не курить за 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит B (HBV) – инфекционное заболевание, которое является причиной серьёзных поражений печени. Зачастую гепатит B переходит в хроническую форму, его течение становится затяжным и провоцирует возникновение цирроза и рака печени.

Вирус гепатита B (Hepadnaviridae) содержит двухцепочечную ДНК, окруженную нуклеокапсидом размером 27 нм, в состав которого входит антиген HBcAg, и внешней оболочкой, содержащей антиген HBsAg. Этот антиген обнаруживается в крови за 6 недель до появления симптомов заболевания и может выявляться длительное время как при их наличии, так и в при их отсутствии (при хроническом гепатите и носительстве). На ранних стадиях заболевания присутствует у 90-95 % больных.

Особенностью вируса гепатита B является то, что он поступает непосредственно в кровь и циркулирует в ней на протяжении всего периода заболевания. У некоторых пациентов вирус в крови сохраняется всю жизнь. По этой причине источником заражения могут стать не только те, кто болен гепатитом в его острой форме, но также те, кто уже перенес данное заболевание, а также люди, у которых заболевание не проявляется, однако они являются носителями вируса.

Полное выздоровление регистрируется у 92-95 % больных острым гепатитом В, и лишь у 5-8 % из них отмечается переход заболевания в хроническую форму.

Гепатит B лечится исключительно в условиях стационара. Это заболевание в случае длительного течения является фактором риска развития первичной гепатоцеллюлярной карциномы (рак печени).

В жизнедеятельности вируса гепатита В различают две фазы: фазу репликации и фазу интеграции. В фазе репликации происходит воспроизведение (размножение) вируса. ДНК вируса проникает в ядро гепатоцита, где с помощью ДНК-полимеразы синтезируется нуклеокапсид, содержащий ДНК вируса, антигены HBcAg, HBeAg, которые являются основной мишенью иммунной системы. Затем нуклеокапсид мигрирует из ядра в цитоплазму, где реплицируются белки внешней оболочки (HBsAg), и, таким образом, происходит сборка полного вириона. При этом избыток HBsAg, не использованный для сборки вируса, через межклеточное пространство попадает в кровь. Полная сборка (репликация) вируса заканчивается презентацией его растворимого нуклеокапсидного антигена – HBeAg на мембране гепатоцита, где происходит его «узнавание» иммуноцитами. Антиген HBcAg серологическими методами не определяется, потому что отсутствует в крови в свободном виде. Определяется наличие в крови антител (anti-HBc) к этому антигену, вырабатывающихся вследствие его высокой иммуногенности.

Маркерами фазы репликации вируса гепатита В являются:

• выявление в крови антигенов HBeAg и anti-HBc (Ig M).

У 7-12 % больных хроническим вирусным гепатитом В возможен спонтанный переход фазы репликации в нерепликативную фазу (при этом из крови исчезает HBeAg и появляются anti-HBe). Именно фаза репликации обусловливает тяжесть поражения печени и контагиозность больного.

В фазе интеграции происходит интегрирование (встраивание) фрагмента вируса гепатита В, несущего ген HBsAg, в геном (ДНК) гепатоцита с последующим образованием преимущественно HBsAg. При этом репликация вируса прекращается, однако генетический аппарат гепатоцита продолжает синтезировать HBsAg в большом количестве.

Вирусная ДНК может быть интегрирована не только в гепатоциты, но и в клетки поджелудочной железы, слюнных желез, лейкоциты, сперматозоиды, клетки почек.

Фаза интеграции сопровождается становлением клинико-морфологической ремиссии. В этой фазе в большинстве случаев формируется состояние иммунологической толерантности к вирусу, что приводит к купированию активности процесса и носительству HBsAg. Интеграция делает вирус недосягаемым для иммунного контроля.

Серологические маркеры фазы интеграции:

• наличие в крови только HBsAg или в сочетании с anti-HBc (IgG);
• отсутствие в крови ДНК-вируса;
• сероконверсия HBeAg в anti-HBe (т.е. исчезновение из крови HBeAg и появление anti-HBe).

Пациенты, перенесшие инфекцию и имеющие антитела к вирусу, не могут повторно заразиться гепатитом B. В некоторых случаях полное выздоровление не наступает и человек становится хроническим вирусоносителем. Вирусоносительство может протекать бессимптомно, но в некоторых случаях развивается хронический активный гепатит B. Ключевым фактором риска активного вирусоносительства является возраст, когда человек был заражен: для грудных детей уровень риска превышает 50 %, в то время как для взрослых остается на уровне 5-10 %. Исследования показывают, что мужчины чаще становятся носителями, чем женщины.

HBsAg – поверхностный антиген вируса гепатита В

Поверхностный антиген вируса гепатита В (HВsAg) является белком, который присутствует на поверхности вируса. Обнаруживается в крови при остром и хроническом гепатите В. Самый ранний маркер. Достигает максимума к 4-6-й неделе заболевания. Сохраняется до 6 месяцев при остром гепатите, свыше 6 месяцев – при переходе заболевания в хроническую форму.

HBeAg – ядерный ‘е’-антиген вируса гепатита В

Антиген, находящийся в ядре вируса. Появляется в крови одновременно с HBsAg и сохраняется в течение 3-6 недель. HBeAg появляется в крови больного острым гепатитом В одновременно с HBsAg или вслед за ним и сохраняется в крови 3-6 недель. Указывает на активное размножение и высокий риск передачи вируса при половом контакте, а также перинатально. Инфекционность HBeAg-положительной сыворотки в 3-5 раз выше, чем HBsAg-положительной. Выявление HBeAg в крови более 8-10 недель свидетельствует о переходе заболевания в хроническую форму. При отсутствии репликативной активности вируса во время хронической инфекции HBeAg не выявляется. Его появление же свидетельствует о реактивации вируса, что чаще происходит на фоне иммуносупрессии.

При лечении вирусного гепатита В исчезновение HBeAg и появление антител к HBe-антигену свидетельствует об эффективности терапии.

anti-HBc (Ig M) – специфические антитела класса IgМ к ядерному ‘core‘ антигену вируса

Начинают вырабатываться еще до клинических проявлений, указывают на активную репликацию вируса.

Появляются в крови через 3-5 недель, сохраняются в течение 2-5 месяцев и исчезают в период выздоровления.

anti-HBc – суммарные антитела (IgM+IgG) к ядерному ‘core’ антигену вируса гепатита В

Важный диагностический маркер, особенно при отрицательном значении HBsAg. Антитела класса IgM вырабатываются через 3-5 недель. Антитела класса IgG начинают вырабатываться с 4-6-го месяца и могут сохраняться пожизненно. Подтверждают контакт организма с вирусом.

anti-HBs – суммарные антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В

Появляются медленно, достигая максимума через 6-12 месяцев. Указывают на перенесенную инфекцию или наличие поствакцинальных антител. Выявление этих антител свидетельствует о выздоровлении и развитии иммунитета. Обнаружение антител в высоком титре в первые недели заболевания может быть связано с развитием гипериммунного варианта фульминантного гепатита В.

anti-HBe – антитела к ‘е’-антигену вируса гепатита В

Появляются на 8-16-й неделе после инфицирования у 90 % больных. Свидетельствуют о завершении острого периода болезни и начале периода реконвалесценции. Могут сохраняться до 5 лет после перенесенного заболевания.

HBV (ДНК) – ДНК вируса гепатита В

Маркер наличия и репликации вируса. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Это особенно важно в сложных диагностических случаях. При инфицировании мутантными штаммами вируса результаты теста на специфические антигены HBsAg и HBeAg могут быть отрицательными, но при этом риск распространения вируса и развития заболевания у зараженного человека сохраняется.

Качественное определение ДНК вируса играет важную роль в раннем выявлении гепатита В у людей с высоким риском инфицирования. Генетический материал вируса обнаруживается в крови на несколько недель раньше, чем HBsAg. Положительный результат ПЦР за период более 6 месяцев указывает на хроническую инфекцию. Определение вирусной нагрузки (количество ДНК вируса в крови) позволяет оценить вероятность перехода заболевания в хроническую форму.

Повышенные уровни печеночных трансаминаз при положительном результате ПЦР являются показателями необходимости проведения терапии. Во время лечения вирусного гепатита В исчезновение ДНК вируса свидетельствует об эффективности лечения.

Для чего используется исследование?

• Для оценки серологического профиля;
• для выяснения стадии заболевания и степени контагиозности;
• для подтверждения заболевания и уточнения его формы (острая, хроническая, носительство);
• для наблюдения за течением хронического гепатита В;
• для оценки эффективности противовирусной терапии.

Когда назначается исследование?

• При выявлении у пациента поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg);
• при подозрении на инфицирование вирусом гепатита В и сомнительных результатах серологических тестов;
• при микст-гепатитах (сочетанные вирусные гепатиты В и С);
• при динамическом наблюдении за больным гепатитом В (определение стадии процесса при совместном исследовании на другие специфические маркеры инфекции).

Что означают результаты?

Референсные значения

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

• [07-004] anti-HBc, IgM
• [07-005] anti-HBc, антитела
• [07-007] anti-HBs, антитела
• [07-024] HBeAg
• [07-025] HBsAg
• [07-111] anti-HBe, антитела
• [09-008] HBV, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Острый гепатит В. Выделяют «дикий» штамм (естественный) и «мутантный» штамм (вид) вируса. Определение штамма вируса имеет определенное значение при выборе противовирусного лечения. Мутантные штаммы вируса несколько хуже поддаются лечению в сравнении с «диким».

Хронический гепатит В (ХВГВ). Выделяют три серологических варианта:

1. ХВГВ с минимальной активностью (ранее использовали термин «носительство HBsAg»);
2. НВе-негативный ХВГВ;
3. НВе-позитивный ХВГВ.

Интерпретация сочетаний серологических маркеров гепатита В



Кто назначает исследование?

Инфекционист, гастроэнтеролог, гепатолог, эпидемиолог.

[09-009] HBV, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

[06-003] Аланинаминотрансфераза (АЛТ)

[06-010] Аспартатаминотрансфераза (АСТ)

[06-013] Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)

[40-120] Билирубин и его фракции (общий, прямой и непрямой)

[06-045] Фосфатаза щелочная общая

[06-004] Альбумин в сыворотке

[03-011] Фибриноген

[40-483] Лабораторное обследование функции печени

Литература

• А. М. Сокурова, ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет» Минздрава России, Специфическая лабораторная диагностика вирусных гепатитов, УДК: 616.36-002:578.891.
• Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.