Пцр гепатит с через сколько его сдавать

Для постановки диагноза “хронический вирусный гепатит С (ХВГС)” требуется комплексное обследование человека, которое включает клинические, лабораторные и инструментальные исследования. Важным с точки зрения диагностики для постановки правильного диагноза является метод ПЦР – полимеразная цепная реакция.

Содержание
Что показывает этот анализ и зачем он нужен?
Три вида ПЦР анализов
Как сдавать анализ ПЦР на гепатит С?
Результат анализа ПЦР на гепатит С

Что показывает этот анализ и зачем он нужен?

Этим лабораторным методом обнаруживают РНК вируса гепатита С в крови человека. Вместе с иммуноферментным анализом (ИФА) на антитела к вирусу, ПЦР используют для постановки диагноза ХВГС и генотипа его возбудителя. Это исследование является одним из новейших методов лабораторной диагностики. Его достоверность при ХВГС превышает 97%, что считается очень хорошим показателем для исследований.

Существует три ПЦР анализа крови при ХВГС: качественный, количественный и генотипирование вируса. Первое исследование (качественный анализ) на вирус обнаруживает его в крови, поэтому используется только для постановки диагноза.

Второе (количественное) исследование определяет степень вирусной нагрузки на организм, поэтому применяется для контроля эффективности терапии.

Третий ПЦР (генотипирование) уточняет диагноз, устанавливая генотип вируса, что очень важно для назначения правильного противовирусного лечения.

Суть методики полимеразной цепной реакции заключается в использовании ферментов, которые многократно размножают генетический материал возбудителя в биоматериале. В процессе такой репликации пробирку с кровью несколько раз подогревают и охлаждают до температуры, необходимой для ускорения ферментативной реакции. В результате этих манипуляций количество вирусного генома многократно увеличивается, что позволяет его выявить даже при минимальном количестве.

ПЦР диагностика имеет много преимуществ перед другими лабораторными исследованиями:

высокая чувствительность – 97-98%;
гарантированная аналитическая специфичность (выявляет именно тот возбудитель, который требуется найти, а не его родственный штамм);
быстрота проведения (требуется не более 2 суток для получения заключения).

Три вида ПЦР анализов

Качественный ПЦР анализ назначается всем пациентам, у кого ИФА-анализом были выявлены антитела к вирусу ХВГС. После проведения качественного ПЦР может быть получено два варианта ответа: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено». Чтобы обнаружить в крови минимальное количество вируса, необходимы тест-системы с чувствительностью не менее 50 МЕ/мл. Если концентрация вируса в крови больного будет меньше, чем может определить диагностикум, то результат исследования может быть и ложноотрицательным. Чтобы избежать такой диагностической ошибки, лаборатории, осуществляющие ПЦР-диагностику, должны быть обеспечены высокочувствительными тест-системами. В лаборатории «Инвитро», к примеру, используются тесты с чувствительностью от 15 МЕ/мл. Информацию о чувствительности тестов работники лаборатории обязаны предоставлять пациентам и врачам по их первому требованию.

Количественный анализ ПЦР определяет степень виремии, то есть концентрацию возбудителя в крови, вирусную нагрузку. Результат этого исследования, в отличие от качественного ПЦР, выражается цифрами, например, 2×10*6 МЕ/мл, что означает 2 миллиона международных единиц в 1 мл крови. Часть лабораторий применяет другой показатель – число копий/мл. Эти два показателя легко конвертировать: 1 международная единица равна 4 копиям РНК. Таким образом, 2×10*6 МЕ/мл будет означать, что в крови больного обнаружено 8×10*6 копий вирусной РНК в 1 мл, т.е. 8 млн. копий в 1мл крови.

Генотипирование – это определение одного из шести генотипов вируса. От генотипа возбудителя зависит клиническая картина, скорость развития осложнений со стороны печени и прогноз для дальнейшей жизни пациента. Генотип вируса очень важен уже на стадии постановки диагноза, поскольку от его правильного определения зависит комбинация препаратов и длительность терапевтического курса, который будет назначен больному.

Однако даже такое казалось бы «идеальное» лабораторное исследование имеет свои минусы:

в ходе исследования происходит репликация генетического материала всех возбудителей, даже неживых, что может исказить результат. Поэтому для осуществления контроля эффективности с помощью ПЦР повторный анализ проводят не ранее, чем через 2 месяца после предыдущего, чтобы погибшие вирусы успели «покинуть» организм больного;
часть вирусного генома, который определяют с помощью тест-систем, теоретически может присутствовать и в других вирусах или микроорганизмах, поэтому есть вероятность ложноположительного ответа;
вирусы быстро мутируют. Иногда скорость и степень мутирования вируса настолько высока, что тест-система перестает улавливать их геном. Как следствие, возможен ложноотрицательный результат.

Для нивелирования этих недостатков, производители лабораторных тест-систем для ПЦР диагностики постоянно проводят их испытания, в том числе на перекрестные реакции и на чувствительность к тому или иному генотипу вируса.

Как сдавать анализ ПЦР на гепатит С?

Чтобы заключение обследования методом ПЦР были достоверными, необходимо строго соблюдать правила подготовки к его проведению:

исследование проводится на голодный желудок (глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь из пищи, могут повлиять на скорость и качество ферментной реакции);
разрыв между последним приемом пищи и отбором крови для анализа должен составлять не менее 8 часов;
накануне исследования запрещено принимать алкоголь и употреблять жирную пищу, период выведения которых затяжной;
за сутки до похода в лабораторию следует избегать сильных физических и эмоциональных нагрузок;
до момента забора крови не рекомендуется курить.

Чтобы избежать появления ложных заключений, предполагаемому больному необходимо прийти в лабораторию немного раньше, чем будет проведен забор крови. Нужно 15-20 минут для того, чтобы человек отдышался, успокоился. Адреналин, присутствующий в крови после быстрой ходьбы, может повлиять на результат обследования.

Если направляемый на анализ пациент принимает какие-либо лекарственные препараты, об этом он должен уведомить врача. Вполне возможно, что от приема некоторых из них придется на некоторое время отказаться (если это возможно).

Результат анализа ПЦР на гепатит С

Расшифровкой результатов занимается врач-лаборант той лаборатории, которая проводила анализ. Расшифровка – это определение отклонения полученного результата от нормы. Норма показателей устанавливается непосредственно производителем тест-системы, которая используется лабораторией для диагностики. Поэтому не стоит удивляться, что в одних лабораториях вирусную нагрузку определяют в МЕ/мл, а в других – в копиях/мл.

Получив заключение, его нужно уметь правильно трактовать. Трактовкой результатов исследования должен заниматься лечащий врач больного гепатитом С. Только после объективного, инструментального и лабораторного обследования пациента, врач может получить достаточное количество данных для грамотной трактовки полученных результатов ПЦР.

Оценка качественного анализа, как правило, не вызывает затруднений, даже у пациентов. Результат там может быть только один: «обнаружен» или «не обнаружен». При этом второй из них является нормой.

Показатели количественного анализа трактовать сложнее. Он показывает степень вирусной нагрузки на пациента. Даже среди гепатологов нет единого мнения по поводу того, как трактовать обнаруженную виремию. Большинство врачей склоняются к тому, что высокой нужно считать нагрузку более 8×10*5 МЕ/мл. Очень высокой считается нагрузка более 1×10*7 МЕ/мл, а низкой – менее 4×10*5 МЕ/мл.

Степень вирусной нагрузки говорит о вирулентности (агрессивности) вируса: чем больше его количество в крови, тем быстрее могут развиваться осложнения со стороны печени. Высокая концентрация вируса в крови беременной женщины повышает вероятность его проникновения через гематоплацентарный барьер к плоду. Виремия также влияет на эффективность лечения: при низких цифрах результативность терапии выше, чем при высоких.

Для того, чтобы быть уверенным в достоверности проведенного анализа ПЦР на гепатит С, нужно отдавать предпочтение только тем лабораториям, которые хорошо себя зарекомендовали. Ценовая политика при этом не должна играть первостепенную роль.

Источник

Диагноз гепатита С ставится на основе данных лабораторных исследований крови. От того, какие анализы на гепатит С сдаются, зависит, будет ли вовремя выявлено заболевание и назначено лечение. Эффективность лечебных мероприятий тоже оценивают по результатам анализов.

О гепатите С

Болезнь вызывает вирус гепатита С (HCV, hepatitis C virus). Этот РНК-содержащий вирус проникает в организм человека через кровь. Возможно инфицирование через вагинальную слизь, сперму, микротравмы слизистых оболочек.

Попадая в организм одним из этих путей, вирус поражает печень. Все вирусы являются внутриклеточными паразитами. И HCV – не исключение. Он размножается внутри печеночных клеток, гепатоцитов, из которых состоит печеночная ткань, паренхима.

После проникновения вируса в гепатоцит начинается многократное копирование с исходной материнской вирусной РНК новых дочерних РНК. Данный процесс называют репликацией. Затем вокруг образовавшихся РНК формируется капсула (капсид) и другие структурные элементы вирусной частицы (вириона).

Для репликации РНК и достройки вирионов требуются органические вещества. Вирус берет их у клетки. В конечном итоге гепатоцит не выдерживает такой нагрузки и погибает. Вышедшие из него вирусы проникают в новые гепатоциты.

Иммунная система, конечно, борется с HCV. И если у пациента крепкий иммунитет, вирус может быть уничтожен. Но это происходит редко. У большинства, несмотря на иммунное противоборство, вирусная активность сохраняется. Устойчивость вируса в немалой степени обусловлена его генетической изменчивостью. От набора генов, генотипа, закодированного в РНК вируса, в немалой степени зависит, как будет протекать болезнь, и насколько результативным будет лечение.

На фоне воспалительного процесса в паренхиме возрастает количество жировой ткани (стеатогепатоз). По мере гибели гепатоцитов паренхима замещается фиброзной тканью, и функции печени нарушаются. Крайняя степень фиброза, цирроз, сопровождается печеночной недостаточностью, вторичными изменениями других органов, расстройствами кровообращения и обмена веществ.

Поначалу незаметные для пациента, патологические изменения в печени формируются в течение долгих лет. Все это время вирус продолжает циркулировать в крови. Благодаря этому есть возможность сдать анализ на гепатит С.

Какие анализы нужно сдать на гепатит С

Показания к лабораторной диагностике – пищеварительные расстройства, тяжесть в правом подреберье, общая слабость, и другие признаки гепатита С. Тревогу должен вызвать тот факт, если этим симптомам предшествовали косметические и медицинские манипуляции. Болезнь не передается бытовым путем. Но если был интимный незащищенный контакт с инфицированным, анализ крови на гепатит С необходим. Лабораторная диагностика включает в себя несколько видов анализов:

Общий анализ крови

Он самый простой и наименее информативный. Неспецифические отклонения в общем анализе лишь косвенно свидетельствуют в пользу гепатита, и могут быть при других заболеваниях. Высокий уровень лейкоцитов (лейкоцитоз) вместе с ускоренным оседанием эритроцитов (СОЭ) – признак активного воспалительного процесса в печени. Повышение удельного веса лимфоцитов отмечается при вирусных инфекциях. А снижение уровня эритроцитов и гемоглобина возможно при угнетении кроветворной функции печени.

Биохимический анализ (биохимия)

Здесь важны два показателя – билирубин и трансаминазы. Билирубин – продукт естественного распада гемоглобина. В норме он обезвреживается печенью, и в составе желчи удаляется через кишечник. При поражении печени уровень билирубина повышается главным образом за счет свободной, не связанной с глукуроновой кислотой, фракции (непрямой билирубин). Хотя при хроническом течении гепатита С билирубин лишь слегка повышен или даже остается в пределах нормы.

Не менее важный показатель – трансаминазы (АСТ, АЛТ), внутриклеточные ферменты. При разрушении гепатоцитов они в большом количестве обнаруживаются в крови. Также в рамках биохимического анализа исследуют уровень и соотношение фракций белков, жиров (триглицеридов). В сравнении с общим анализом биохимия более информативна. Но по изменениям биохимических показателей нельзя судить, что у пациента именно гепатит С.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

А вот это уже специфический анализ крови на гепатит С. В рамках этого анализа обнаруживают антитела к вирусу. А если есть антитела, значит, есть и HCV. Антитела – это белки-иммуноглобулины, которые выделяются в ответ на антигены вируса гепатита С. Взаимодействие антигенов и антител приводит к образованию иммунных комплексов.

Чтобы реакция антиген-антитело была заметной для диагностики, используют антитела, меченные ферментами. Отсюда и название анализа. Практический интерес представляют иммуноглобулины класса М и G (IgM и IgG). В острой стадии гепатита С выделяются IgM. У большинства пациентов болезнь спустя несколько месяцев переходит в хроническую форму.

При этом IgM исчезают, и обнаруживаются IgG. Таким образом, ИФА позволяет не только диагностировать гепатит С., но и определить стадию заболевания. Но на основе ИФА нельзя судить о тяжести гепатита. Нельзя определить и генотип вируса. Ведь сам вирус не обнаруживается, а лишь антитела к нему.

ПЦР (полимеразная цепная реакция)

Анализ ПЦР на гепатит С – самый сложный, но самый достоверный. Суть его заключается в обнаружении РНК вируса в сыворотке крови пациента. Принцип ПЦР заключается в многократном воспроизведении или амплификации участков РНК вируса. Это напоминает естественную репликацию, но только в искусственных условиях с применением дорогостоящего оборудования.

В зависимости от целей проведения разработаны три разновидности анализа.

1. Классическая ПЦР. Качественный анализ на гепатит С. Здесь определяется сам факт наличия вируса. Обнаружена РНК HCV – человек болен, не обнаружена – здоров.

2. Количественная ПЦР. Здесь измеряют вирусную нагрузку – концентрацию вирусных частиц в объеме крови. Для этого проводят ПЦР в реальном времени, и определяют количество образовавшихся РНК копий. Вирусную нагрузку определяет в МЕ (международных единицах) в 1 мл сыворотки крови:

Низкая: менее 3 х 104 МЕ/мл
Средняя: 3 х 104-8 х 105 МЕ/мл
Высокая: более 8 х 105 МЕ/мл.

Нормы количественных показателей ПЦР зависят от используемого оборудования, и могут различаться в разных лабораториях. Но в любом случае, чем выше уровень вирусной нагрузки, тем тяжелее протекает заболевание, и тем больше риск фатальных осложнений.

3. Генотипирование. В данном исследовании с помощью ПЦР определяется генотип и подтип или квазитип HCV. В зависимости от этого назначается схема лечения. Анализ на генотип гепатита С проводится методом секвенирования, когда определяют последовательность нуклеотидов в цепи вирусной РНК.

Где сдать анализы на гепатит С?

Общий анализ, биохимию, и ИФА делают в любом лечебном учреждении. ПЦР возможна только в крупных лечебно-диагностических центрах, где есть соответствующее оборудование. С результатами диагностики можно ознакомиться спустя 3-5 дней.

Что делать, если анализ положительный

Если выявил анализ крови гепатит С, возможно два варианта. Первый вариант – обследуемое лицо действительно инфицировано вирусом. Второй вариант – ложноположительный результат связан с диагностическими ошибками. В большей степени это характерно для ИФА. В ходе выполнения этого анализа иногда развиваются перекрестные иммунные реакции, когда иммуноглобулины реагируют на другие антигены, сходные с антигенами HCV. Среди конкретных причин:

аутоиммунные заболевания
опухолевые процессы
туберкулез
недавняя вакцинация
простудные заболевания
глистные инвазии
беременность.

Ошибочный результат анализа на гепатит С может быть связан с неправильной подготовкой. Кровь для исследования сдается утром натощак. Последний прием пищи допускается не позднее, чем за 12 ч. до исследования. В течение последних нескольких дней следует воздержаться от приема алкоголя, переедания с употреблением жирной, жареной пищи с острыми приправами, пряностями.

Если результат анализа на гепатит С позитивный, необходима ПЦР. Если РНК вируса при ПЦР не обнаруживается, а ИФА показывает наличие антител, то, скорее всего, ответ ИФА ложноположительный.

Исключение составляют излечившиеся от гепатита С. У них нет вируса, следовательно, ПЦР не обнаружит РНК. Но выделившиеся во время болезни JgG могут еще долго циркулировать в крови. Достоверность ПЦР максимальна, 98-99%. Но не абсолютна – в 1-2% случаев возможны ошибки. Поэтому при подозрении на ложный ответ спустя 3-4 мес. нужно повторить ИФА и ПЦР.

Что делать, если результат отрицательный

Здесь тоже возможны варианты. Первый – обследуемый всегда был здоров. Второй – у пациента был гепатит С, но он полностью излечился, снова здоров, и в лечении не нуждается. Третий – имеется ложноотрицательный результат. В данном случае ложный анализ тоже может быть обусловлен сопутствующими заболеваниями, неправильной подготовкой и техникой проведения. Но есть еще причины, связанные со сроком сдачи крови.

Для ИФА характерно т.н. диагностическое окно, когда вирус уже присутствует в организме, но антитела выработаны в малом количестве, и пока не обнаруживаются. Для ИФА продолжительность диагностического окна составляет 3-4 нед. Но в некоторых случаях этот период может длиться до 6 мес.

При подозрении на ложноотрицательный анализ нужно переходить к ПЦР. Здесь РНК выявляют спустя 10-14 дней, а в некоторых случаях через 3-4 дня после заражения. Поэтому если ИФА не показывает наличие антител, а РНК вируса при ПЦР обнаруживаются, значит, пациент инфицирован. Следует заметить, что в самом начале гепатита возможно проведение только качественной ПЦР. Количественная ПЦР и генотипирование будут информативными лишь спустя 4-6 нед. после заражения.

Какие анализы нужно сдавать во время лечения

По общему и биохимическому анализу крови можно судить о динамике воспалительного процесса, и о том, как восстанавливается печень и ее функции. Но ведущая роль принадлежит ПЦР. Количественную ПЦР проводят на 1, 2, 3, и 4 нед. лечения. По изменению вирусной нагрузки судят об эффективности лекарств и о вероятном исходе заболевания. Если вирусная нагрузка быстро снижается, это благоприятный признак, свидетельствующий о скором выздоровлении.

Какие анализы сдавать после лечения

Курс лечения гепатита С в зависимости от тяжести и вирусного генотипа длится 12 или 24 нед. После этого нужна ПЦР. Если качественный анализ ПЦР не показывает наличие РНК HCV в крови, пациент считается вылечившимся. Специфическое лечение не требуется. Нужны неспецифические мероприятия, направленные на восстановление печени.

Чем лечить?

Для того чтобы выздороветь, нужно полностью уничтожить вирус. И тогда результаты анализа ПЦР станут отрицательными. Сделать это можно только с помощью противовирусных средств последнего поколения. SoviHep D, Velakast, Ledifos – эти и другие препараты производят индийские компании по американским лицензиям. Они содержат Софосбувир с Даклатасвиром, Велпатасвиром или Ледипасвиром. Все эти препараты подавляют фазы размножения HCV внутри гепатоцитов.

Всего лишь одна таблетка в день в течение 12 или 24 нед., и выздоровление наступает в 95-99% случаев при любом генотипе вируса и форме заболевания. Стоят индийские лекарства недорого. Купить препараты может любой пациент со средним достатком.

Но аптеки не продают их. У нас вы можете приобрести индийский Софосбувир. МедФарма работает на правах официального представителя компаний из Индии. Мы поможем выбрать нужное лекарство, и доставим его по вашему адресу в течение 3-5 дней.

Did you find apk for android? You can find new Free Android Games and apps.

Источник