Пцр набор для определения гепатита в

Полимеразная цепная реакция — это вид анализа крови, который позволяет безошибочно выявлять вирус гепатита В. Особенностью метода является то, что он способен показать ВГВ на ранних стадиях — уже через месяц после инфицирования, в то время как специфический антиген у больного обнаруживается только через 2 месяца. ПЦР может выявить не только обычный ДНК-вирус, но и мутантные штаммы, которые ни один другой анализ увидеть не позволяет.

При расшифровке ПЦР на гепатит В результаты сравниваются со стандартными значениями. На основе этого делаются выводы о наличии заболевания (положительный результат), концентрации вируса (активности) или отсутствии недуга (отрицательный результат). Обработка данных идет 2 недели.

Виды ПЦР на вирусный гепатит В

Существует 2 вида диагностики, которые назначают при гепатите В. Качественный ПЦР дает возможность с точностью в 100% сказать, есть ли ВГВ в крови или нет. Количественный ПЦР показывает активность вируса, то есть сколько ДНК фрагментов ВГВ содержится в 1 мл крови.

Качественный ПЦР и его трактовка

Проведение анализа крови на гепатит В методом ПЦР может выявить лишь наличие ДНК-фрагментов. Назначается в том случае, когда пациент подозревает о заражении ВГВ (HBV) или когда другие способы диагностики, например, серологические пробы не дают четкого ответа. Расшифровка результатов при проведении качественного анализа очень проста:

• отрицательный результат — вируса нет;
• положительный результат — вирус обнаружен.

Целью качественного ПЦР является подтверждение или опровержение наличия вируса гепатита В, а также проведение ранней диагностики. Если ВГВ выявлен в течение 1-2 недели после заражения, то лечение станет максимально эффективным. При активном развитии HBV в течение 2-х месяцев и выше, заболевание переходит в хроническую форму и полному излечению не подлежит.

В случае когда качественный ПЦР на гепатит показывает наличие вируса, следующим этапом становится проведение количественной диагностики.

Количественный ПЦР

Для назначение эффективного лечения или оценки результатов проводимой терапии просто знать, что у больного имеется ВГВ, недостаточно. Необходимо определить количественно значение ДНК вируса гепатита В в 1 мл крови, то есть вирусную нагрузку на организм. Этот вид ПЦР на гепатит В проводится в следующих случаях:

1. Перед назначением лечения.
2. Для оценки эффективности терапии.
3. Для определения развития устойчивости вируса к принимаемым препаратам.
4. Для определения стадии, на которой находится заболевание.

Единицей измерения вируса являются международные единицы (МЕ/мл) или количество копий ДНК/мл, то есть количество ДНК-фрагментов на 1 мл крови. Соотношение между двумя единицами зависит от выбранной тест системы и колеблется от 2 до 7 копий/мл в 1 МЕ/мл. Если система неизвестна, то для пересчета используется усредненное значение:

1 МЕ/мл = 5 копий/мл

Если сразу делается количественный анализ, то граничная норма для диагностирования заболевания составляет 75 МЕ/мл. При результате выше этого показателя, ставится диагноз ВГВ, ниже — ВГВ не выявлен.

Трактовка количественного ПЦР

При гепатите В нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки (виремии), копий/мл:

• < 10^3 — нагрузка очень низкая, вирус ведет себя неактивно;
• от 10^4 до 10^5 — нагрузка низкая, вирус обычно неактивен;
• 10^6 — нагрузка умеренная, вирус ведет себя активно;
• 10^7 — виремия большая, вирус высокоактивен.

Зная количественно, как ведет себя вирус в организме, можно определить форму заболевания (хроническая, острая или носительство), необходимость проведения дополнительных исследований, реакцию организма и вируса на лечение:

1. Хронический гепатит В диагностируется, если значение трансаминазы будет выше нормы, активность вируса — больше 4, а концентрация ДНК-копий в миллилитре крови составит 10^5 копий.
2. Носительство определяется по следующей картине, которую дают результаты — концентрация < 10^5 копий/мл, а уровень трансаминазы равен стандартному значению.
3. Резистентность (устойчивость) при HBV постоянно контролируется во время лечения. Анализы сдаются каждые 3 месяца. Если в один из моментов виремия при гепатите увеличится в 10 раз, то это означает, что ВГВ приспособился к используемым лекарственным препаратам — стал устойчивым.
4. Благоприятный ход лечения покажет снижение виремии на 85% через 3 дня после начала терапии.
5. Направление на биопсию печени больной получает лишь тогда, когда показатель АЛТ (аланинаминотрансферазы) превышает нормальное значение не более 2 раз за 6 месяцев, а расшифровка ПЦР на гепатит В показывает виремию > 10^5 копий/мл. Когда же при большой вирусной активности наблюдается повышение уровня АЛТ чаще 2-х раза за полгода, то сразу же назначается антивирусная терапия.

Чтобы узнать, как будет вести себя ДНК гепатит в плане хронизации, то есть перехода к хронической форме из острой, также используются результаты ПЦР-диагностики:

• ДНК ВГВ < 2 х 10^4 копий/мл означает, что острая стадия не перейдет в хроническую форму;
• ДНК ВГВ лежит в пределах от 2 х 10^4 до 2 х 10^6 копий/мл означает, что у каждого 4-ого больного ВГВ станет хроническим, то есть хронизация составляет 25-30%;
• ДНК ВГВ > 2 х 10^6 копий/мл означает, что приобретение хронической формы недуга неизбежно.

Подготовка к обследованию

Для определения наличия ВГВ методом ПЦР делается анализ крови из вены. Процедура всегда проводится строго натощак и лучше всего попасть в лабораторию утром, когда естественное время отдыха от пищи составит 8 часов. Чтобы результаты обследования получились верными, необходимо узнать заранее, как подготовиться к походу в клинику правильно. Дополнительные этапы таковы:

1. Отказ от жирной пищи, курения, спиртного и занятий спортом за 12 часов до процедуры.
2. Отдых в течение 20 минут непосредственно перед сдачей крови.
3. Перед началом процедуры необходимо предупредить медсестру о принимаемых медикаментах.

Внимание! Если диагностика проводится ребенку младше 5-ти лет, то за полчаса до процедуры его нужно поить кипяченой водой по 1 стакану через каждые 10 минут.

Подводя итоги

На сегодняшний день ПЦР-диагностика для выявления гепатита В является самым точным методом. Способ позволяет увидеть скрытые и мутировавшие формы заболевания, выявить недуг на первых неделях после инфицирования и, соответственно, провести эффективное лечение. В зависимости от ситуации проводится качественный или количественный ПЦР, которые направлены на выявление ВГВ и установлении его активности. Чтобы пройти обследование, нужно обратиться к вирусологу, инфекционисту или гепатологу.

NN п/п

Субъект Российской Федерации

Орган исполнительной власти субъекта Российской Федерации (главный распорядитель бюджетных средств)

Организация-получатель

Кол-во, определ.

Стоимость, руб.

1

Архангельская область

Министерство здравоохранения и социального развития Архангельской области

Государственное учреждение здравоохранения «Архангельский областной клинический центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями»

96

18 828,48

2

Белгородская область

Департамент здравоохранения и социальной защиты населения Белгородской области

Государственное учреждение здравоохранения Белгородский областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционным заболеваниям

96

18 828,48

3

Брянская область

Департамент здравоохранения Брянской области

Государственное учреждение здравоохранения Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями Брянской области

96

18 828,48

4

Воронежская область

Департамент здравоохранения Воронежской области

ГУЗ «Областная клиническая инфекционная больница»

96

18 828,48

5

г. Москва

Департамент здравоохранения города Москвы

ГУЗ «Инфекционная клиническая больница N 1»

96

18 828,48

6

Калининградская область

Министерство здравоохранения Калининградской области

Областное государственное учреждение здравоохранения Инфекционная больница Калининградской области

288

56 485,44

7

Калужская область

Министерство здравоохранения Калужской области

ГУЗ «Калужский областной центр по профилактике и борьбе со Спидом и инфекционными заболеваниями»

96

18 828,48

8

Кемеровская область

Департамент охраны здоровья населения Кемеровской области

ГУЗ «Кемеровский областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями»

96

18 828,48

9

Краснодарский край

Департамент здравоохранения Краснодарского края

Специализированная клиническая инфекционная больница Департамента здравоохранения Краснодарского края

96

18 828,48

10

Красноярский край

Министерство здравоохранения Красноярского края

Краевое государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Красноярский краевой Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями»

96

18 828,48

11

Курская область

Комитет здравоохранения Курской области

ГУЗ «Областная клиническая инфекционная больница им. Семашко»

96

18 828,48

12

Ленинградская область

Комитет по здравоохранению Ленинградской области

ГУЗ Ленинградской области Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями Комитета здравоохранения Ленинградской области

96

18 828,48

13

Нижегородская область

Министерство здравоохранения Нижегородской области

ГУЗ «Нижегородский областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями»

96

18 828,48

14

Новгородская область

Комитет по охране здоровья населения Новгородской области

ГУЗ Новгородский центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями Хелпер

96

18 828,48

15

Новосибирская область

Департамент здравоохранения Новосибирской области

Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Новосибирской области Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями

96

18 828,48

16

Пермский край

Министерство здравоохранения Пермского края

Государственное учреждение здравоохранения Пермский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями

96

18 828,48

17

Псковская область

Государственный комитет Псковской области по здравоохранению и фармации

Государственное учреждение здравоохранения Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями Псковской области

96

18 828,48

18

Республика Алтай

Министерство здравоохранения Республики Алтай

Государственное учреждение здравоохранения Горно-Алтайский «Республиканский Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями»

96

18 828,48

19

Республика Дагестан

Министерство здравоохранения Республики Дагестан

ГУ «Республиканский центр инфекционных болезней им. С.М. Магомедова»

96

18 828,48

20

Республика Северная Осетия — Алания

Министерство здравоохранения Республики Северная Осетия — Алания

ГУЗ «Центр по профилактике и борьбе со СПИД Министерства здравоохранения Республика Северная Осетия — Алания»

192

37 656,96

21

Республика Хакасия

Министерство здравоохранения Республики Хакасия

Государственное учреждение здравоохранения Республики Хакасия «Центр антиСПИД»

96

18 828,48

22

Ростовская область

Министерство здравоохранения Ростовской области

ГУЗ «Центр по профилактике и борьбы со СПИДом и инфекционными заболеваниями Министерства здравоохранения Ростовской области»

96

18 828,48

23

Рязанская область

Министерство здравоохранения Рязанской области

Государственное учреждение здравоохранения Рязанская клиническая больница им. Семашко

96

18 828,48

24

Самарская область

Министерство здравоохранения и социального развития Самарской области

Государственное учреждение здравоохранения Самарской области центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями

192

37 656,96

25

Свердловская область

Министерство здравоохранения Свердловской области

Государственное учреждение здравоохранения Свердловская областная станция переливания крови

96

18 828,48

26

Ставропольский край

Министерство здравоохранения Ставропольского края

Государственное учреждение здравоохранения «Ставропольский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями»

96

18 828,48

27

Тульская область

Департамент здравоохранения Тульской области

ГУЗ Тульской области «Тульская областная клиническая больница»

96

18 828,48

28

Тюменская область

Департамент здравоохранения Тюменской области

Государственное лечебно-профилактическое учреждение Тюменской области Консультативно-диагностический центр

96

18 828,48

29

Ульяновская область

Министерство здравоохранения Ульяновской области

ГУЗ «Областной центр по профилактике со СПИД и инфекционными заболеваниями» Министерства здравоохранения Ульяновской области

96

18 828,48

30

Хабаровский край

Министерство здравоохранения Хабаровского края

Государственное учреждение здравоохранения Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями Министерства здравоохранения Хабаровского края

96

18 828,48

31

Ханты-Мансийский автономный округ — Югра

Департамент здравоохранения Ханты-Мансийского автономного округа — Югры

Бюджетное учреждение Ханты-Мансийского автономного округа — Югры Ханты-Мансийский центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями

96

18 828,48

32

Челябинская область

Министерство здравоохранения Челябинской области

Государственное учреждение здравоохранения Областной кожно-венерологический диспансер N 3

192

37 656,96

33

Ярославская область

Департамент здравоохранения и фармации Ярославской области

Муниципальное учреждение здравоохранения инфекционная клиническая больница N 1

96

18 828,48

Итого

3648

715 482,24