Пцр вирус гепатита с генотип 2

[09-010]
HCV, генотипирование (типы 1a, 1b, 2, 3a, 4), РНК [реал-тайм ПЦР]

1355 руб.

Молекулярно-генетическое исследование для определения генотипа вируса гепатита С.

Применяемый набор реагентов может быть использован для диагностики вируса гепатита С и наиболее распространенных на территории России генотипов HCV (1a, 1b, 2, 3a и 4) in vitro.

Синонимы русские

Вирус гепатита С (ВГС).

Синонимы английские

Hepatitis C Virus (HCV) Genotyping, HCV Subtype.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (ВГС) способен поражать клетки печени, а также некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты). В основном инфекция передается через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты), реже вероятно заражение половым путем.

Острый вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно и в большинстве случаев остается невыявленным. У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, которая увеличивает риск развития цирроза, печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы. За свое скрытое, но разрушительное действие инфекция получила неофициальное название «ласковый убийца».

ВГС обладает наибольшей вариабельностью среди всех возбудителей вирусных гепатитов и благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Геномы вируса значительно отличаются в разных странах мира и имеют различную чувствительность к препаратам интерферонов.

Существует 6 основных генотипов вируса гепатита С и около 500 субтипов. Наиболее распространен в мире генотип 1 (40-80 %). 1а тип часто выявляется в США, 1b характерен для Западной Европы и Южной Азии. Генотип 2 встречается с частотой 10-40 %. Генотип 3 распространен в Шотландии, Австралии, Индии и Пакистане. ВГС 4 типа характерен для Средней Азии и Северной Африки, генотип 5 – для Южной Африки, 6 – для некоторых стран Азии. В России преобладает генотип 1b, далее с убывающей частотой — 3, 1a, 2, в США – 1a/1b, 2b, и 3a.

Противовирусная терапия, направленная на подавление прогрессирования заболевания, в редких случаях может ускорить развитие осложнений со стороны печени. Это происходит при неправильной оценке клинических и лабораторных показателей. Генотипирование РНК вируса гепатита С позволяет спрогнозировать эффект от планируемой терапии.

Генотип 1 хуже поддается лечению, чем генотипы 2 и 3. Кроме того, биопсию печени важнее провести именно при генотипе 1. Повышенные дозы препаратов интерферона рекомендованы для пациентов с 1-м и 4-м генотипами. Курс терапии у таких пациентов должен быть продлен до 48 недель даже при отсутствии вируса в крови более 24 недель. В случае успешности лечения, которая подтверждается снижением вирусной нагрузки крови (

Генотипы 2 и 3 хорошо поддаются терапии в 80 % случаев, обычно это занимает 24 недели.

Лечение разрабатывается с учетом пола и возраста пациента, присутствующих у него симптомов, ранее проводимой терапии, структуры и функции печени, а также лабораторных показателей.

Для чего используется исследование?

Чтобы определить необходимость лечения и спрогнозировать течение заболевания.
Для планирования длительности противовирусной терапии и дозировки лекарств.
Для прогнозирования эффективности лечения.
Для принятия решения о биопсии печени.

Когда назначается исследование?

При обнаружении РНК вируса гепатита С и планировании противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Референсные значения: РНК HCV не обнаружена.

При обнаружении указывается генотип:

Результат	Значение
Генотипы 1а, 1b	Очень высокий риск хронизации инфекции и развития тяжелых осложнений. Необходимо лечение более высокими дозами интерферона в течение 48 недель.
Генотипы 2, 3a	В большинстве случаев в течение 24 недель достигается планируемый терапевтический эффект.
Генотип 4	Труднее поддается лечению, требует доз препаратов, отличных от применяемых при терапии с генотипами 2 или 3.

Что может влиять на результат?

Генотип вируса гепатита С иногда не выявляется при концентрации вируса в крови менее 1,25*10^3 МЕ/мл.

Важные замечания

Решение о длительности терапии, необходимой дозе препаратов и прекращении лечения может принять только лечащий врач на основании биохимических анализов функции печени, биопсии (при необходимости) и вирусной нагрузки.
Существует вероятность повторного заражения вирусным гепатитом С другого генотипа из-за отсутствия перекрестного иммунного ответа и стойкого иммунитета.

Также рекомендуется

Anti-HCV, антитела, ИФА
Аnti-HCV, антитела
Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С
HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]
HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]
Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)
Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
Фосфатаза щелочная общая
Альбумин в сыворотке
Билирубин общий
Холестерол общий
Тромбиновое время
Фибриноген
Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
Лейкоцитарная формула
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

Кто назначает исследование?

Инфекционист, гепатолог.

Литература

Возианова Ж. И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. — К.: Здоровье, 2000 – Т.1.: 600-690.
Кишкун А. А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. — М.:ООО МИА, 2006 – 471-476 с.
Germer J., Mandrekar J., and others. Hepatitis C Virus Genotypes in Clinical Specimens Tested at a National Reference Testing Laboratory in the United States. J Clin Microbiol. 2011 August; 49(8): 3040–3043. PMCID: PMC3147781.
Kuzin S., Samokhvalov E., Zabotina E, and others. Hepatitis virus genotype structure in patients with chronic hepatitis C. Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol. 2011 May-Jun;(3):33-8. PMID:21809642.
Mahaney K, Tedeschi V, Maertens G, et al, “Genotypic Analysis of Hepatitis C Virus in American Patients,”Hepatology, 1994, 20(6):1405-11. PubMed 7982639.
Paintsil E, Verevochkin SV, and others Hepatitis C virus infection among drug injectors in St Petersburg, Russia: social and molecular epidemiology of an endemic infection.Addiction. 2009 Nov;104(11):1881-90. Epub 2009 Aug 27. PMID:19712125.

Источник

Вирус гепатита С, HCV ПЦР real-time генотипирование (типы 1а, 1b, 2, 3, 4) — определение вируса гепатита С в сыворотке крови и определение генотипов ВГС 1а, 1b, 2, 3, 4 методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Метод ПЦР — позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий, специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.

Вирус гепатита С
Исследование позволяет выявить присутствие РНК вируса гепатита С (субтипы 1a, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3) и идентифицировать генотипы 1a, 1b, 2, 3 (субтипы a/b).

Вирус гепатита С (ВГС) поражает клетки печени, а также некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты).

Вирус гепатита С подразделяют на 6 генотипов, каждый из которых, в свою очередь подразделяется на субтипы. Генотипы 1, 2 и 3 являются самыми распространенными в мире. В Российской Федерации чаще распространен генотип 1b, чем 1a, далее с убывающей частотой — 3, 1a, 2.

Генотипирование вируса гепатита С
Генотип вируса гепатита С является наиболее важным фактором, от которого зависит эффективность и тактика противовирусного лечения хронического гепатита С. Знание генотипа вируса используется для планирования продолжительности курса лечения, что особенно важно, учитывая широкий спектр побочных действий применяемых препаратов интерферона и плохую переносимость терапии многими пациентами. Генотипирование вируса гепатита C должно выполняться всем пациентам до начала противовирусной терапии, в целях планирования ее продолжительности, прогнозирования эффективности, в отдельных случаях — для расчета дозы противовирусных препаратов.

Основной путь передачи вируса гепатита С — кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты), реже — заражение половым путём.

Острый вирусный гепатит
Острый вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно и в большинстве случаев остаётся невыявленным. У 60–85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, которая увеличивает риск развития цирроза, печёночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Лечение при различных генотипах вируса гепатита С
Генотип 1 хуже поддаётся лечению, чем генотипы 2 и 3. Кроме того, биопсию печени важнее провести именно при генотипе 1. Повышенные дозы препаратов интерферона рекомендованы для пациентов с 1-м и 4-м генотипами. Курс терапии у таких пациентов должен быть продлён до 48 недель даже при отсутствии вируса в крови более 24 недель. В случае успешности лечения, которая подтверждается снижением вирусной нагрузки крови (< 50 МЕ/мл за 4 недели), вероятен более короткий срок терапии. Если количество вирусных копий не снизилось на 2 порядка за 12 недель, значит, лечение неэффективно и его необходимо пересмотреть.

Генотипы 2 и 3 хорошо поддаются терапии в 80% случаев.

Показания

При обнаружении РНК вируса гепатита С и планировании противовирусной терапии.

Подготовка
Кровь необходимо сдавать утром с 08.00–12.00, спустя 2–4 часа после последнего приёма пищи. Накануне сдачи исследования нужно исключить физические и психоэмоциональные нагрузки.

Интерпретация результатов
Форма представления результата:

обнаружена РНК вируса гепатита С, с указанием субтипа — выдаётся в случае обнаружения у пациента присутствия РНК ВГС и возможности её типирования;
обнаружена РНК вируса гепатита С — выдается в случае обнаружения у пациента присутствия РНК ВГС, которую нельзя отнести к генотипам 1, 2, 3 или 4;
не обнаружено — РНК вируса гепатита С не выявлена или концентрация возбудителя ниже предела чувствительности метода.

Источник

Информация об исследовании

Вирусный гепатит С – антропонозное инфекционное заболевание, вызываемое РНК-содержащим вирусом и имеющее преимущественно хроническое течение. Возбудитель обладает выраженной гепатотропностью.

Вирус гепатита С (HCV) имеет шесть основных генотипов (подвидов): 1a, 1b, 2a, 2b, 3, 4, 5 и 6. На территории РФ преобладающим генотипом является 1b, далее с убывающей частотой — 3a, 1a, 2a.

Достоверным прогностическим фактором развития инфекции ВГС и ответа на противовирусную терапию является генотип вируса гепатита С. Генотипом вируса также определяется продолжительность курса лечения, что весьма актуально, учитывая широкий спектр побочных действий интерферона и низкую переносимость этого препарата больными.

У пациентов с субтипом 1b хронизация HCV-инфекции происходит в 90% случаев, в то время как с генотипами 2a и За в 33-50%. Инфицирование генотипом 1 b сопровождается более тяжелым течением заболевания, развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. Пациенты с субтипом За имеют более выраженный стеатоз и поражения желчевыводящих путей, а также более высокий уровень АлАТ, чем пациенты с HCV генотипа 1 b, при этом уровень фиброза более выражен у пациентов с вирусом субтипа 1 b. При монотерапии интерфероном устойчивый ответ наблюдается у 18% пациентов, инфицированных HCV субтипа 1b, и у 55%- инфицированных другими генотипами, при комбинированной схеме лечения интерферон+рибаверин стойкий ответ наблюдается у 28% пациентов, инфицированных HCV субтипа 1b и у 66% пациентов, инфицированных другими генотипами.

Подготовка к исследованию

Специальной подготовки к исследованию не требуется. Необходимо следовать общим требованиям подготовки к исследованиям.

ОБЩИЕ ПРАВИЛА:

1. Для большинства исследований кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов, натощак (между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8-ми часов, воду можно пить в обычном режиме), накануне исследования легкий ужин с ограничением приема жирной пищи. Для тестов на инфекции и экстренных исследований допустимо сдавать кровь через 4-6 часов после последнего приема пищи.

2. ВНИМАНИЕ! Специальные правила подготовки для ряда тестов: строго натощак, после 12-14 часового голодания, следует сдавать кровь на гастрин-17, липидный профиль (холестерин общий, холестерин-ЛПВП, холестерин-ЛПНП, холестерин-ЛПОНП, триглицериды, липопротеин (а), аполипо-протен А1, аполипопротеин В); глюкозотолерантный тест выполняется утром натощак после 12-16 часов голодания.

3. Накануне исследования (в течение 24 часов) исключить алкоголь, интенсивные физические нагрузки, прием лекарственных препаратов (по согласованию с врачом).

4. За 1-2 часа до сдачи крови воздержаться от курения, не употреблять сок, чай, кофе, можно пить негазированную воду. Исключить физическое напряжение (бег, быстрый подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. За 15 минут до сдачи крови рекомендуется отдохнуть, успокоиться.

5. Не следует сдавать кровь для лабораторного исследования сразу после физиотерапевтических процедур, инструментального обследования, рентгенологического и ультразвукового исследований, массажа и других медицинских процедур.

Источник

Гепатит С – это опасное вирусное заболевание, которым болеют пациенты разного возраста, пола и национальности. Болезнь протекает с преимущественным поражением печени, где возбудитель накапливается и размножается. Всего существует 6 основных разновидностей гепатита С, которые носят название генотипов. Такое распределение зависит от типа вируса, его морфологических особенностей и распространенности в мире. Генотип 2 гепатита С – это одна из его разновидностей, которые регистрируются в постсоветских странах.

В чем отличие генотипа 2 от других разновидностей гепатита?

Генотипирование вируса – это важный этап диагностики, который позволит спрогнозировать течение болезни и прогноз, а также назначить лечение. Этот термин обозначает исследование сыворотки крови методом ПЦР, во время которой можно обнаружить участки РНК вируса и определить его разновидность. Генотип 2 встречается реже, чем генотипы 1 и 3, но чаще, чем остальные виды.

О 2 генотипе гепатита С можно утверждать следующие факты:

это одна из наиболее безопасных форм течения болезни, хронизация инфекции происходит у 30–50% больных, остальные успешно выздоравливают;
данная разновидность легко поддается медикаментозной терапии;
при гепатите с генотипом 2 фиброз и цирроз печени развиваются редко, как и другие осложнения;
рецидивы возникают в очень редких случаях;
развитие болезни медленное;
гепатит может протекать в активной и латентной формах.

Второй генотип относится к безопасным формам вирусного гепатита, но его лечение также может быть длительным и затруднительным. Особенностью этой разновидности является то, что у некоторых пациентов она протекает в скрытой форме. Таким образом, больной обращается за медицинской помощью уже тогда, когда его печень значительно поражена вирусом. Как правило, при помощи специфических препаратов от инфекции удается избавиться полностью.

Генотипы гепатита С
Генотип 2 вирусного гепатита С распространен повсеместно

Причины и пути передачи заболевания

Основная причина любого генотипа гепатита С – это вирус, который содержит РНК. Он циркулирует в крови как на стадии активного проявления клинической картины болезни, так и во время инкубационного периода. Источником инфекции является вирусоноситель, то есть человек, в крови которого присутствует возбудитель гепатита. Его распространение может осуществляться несколькими основными способами:

с кровью (во время гемотрансфузии, гемодиализа, при использовании нестерильного оборудования, шприцов, а также при посещении маникюрных и тату-салонов);
во время полового акта от инфицированного партнера здоровому;
во время родов от матери к новорожденному.

В зоне риска находятся неблагополучные слои населения. Основная часть зараженных гепатитом С употребляли наркотические вещества внутривенно без соблюдения правил асептики и антисептики. Поскольку болезнь имеет медленное хроническое течение, долгое время пациент может не подозревать о ней. Таким образом, заразиться можно и при половых контактах, не зная о заболевании партнера. Во время беременности все женщины должны проходить обязательные проверки на гепатит С, поскольку инфекция передается ребенку и составляет опасность для его жизни и здоровья. При переливании крови возможность заразиться минимальна, поскольку все доноры также проходят обязательные обследования. Оборудование для маникюра и нанесения татуировок также должно стерилизоваться либо быть одноразовым.

Симптомы

Генотип 2 гепатита С может длительное время протекать без проявления каких-либо симптомов. Иммунная система пациента справляется с возбудителем, не позволяя ему размножаться и вызывать серьезное поражение печени. Если человек ведет здоровый образ жизни, то инкубационный период может составлять до 20–30 лет. Первые клинические признаки начинают проявляться, когда иммунитет ослабевает вследствие других заболеваний, неправильного образа жизни и других факторов.

На первичном осмотре пациенты обычно жалуются на следующие симптомы гепатита С:

боль в правом подреберье, в области проекции печени;
синдром хронической усталости, снижение работоспособности, концентрации внимания;
желтушность кожи и видимых слизистых оболочек;
тошнота и рвота;
может появляться сыпь на коже, которая представляет собой аллергическую реакцию на токсины и продукты жизнедеятельности вирусов.

Клиническая картина может отличаться в зависимости от стадии повреждения печени. Желтуха проявляется только в запущенных случаях, когда воспаленные ткани сдавливают желчные протоки и нарушают отток желчи. У некоторых пациентов боль в печени проявляется периодически, она неинтенсивная, поэтому они не обращаются за медицинской консультацией.

Генотипы гепатита С
По сравнению с другими разновидностями, генотип 2 встречается редко

Методы диагностики болезни

Только по симптомам поставить окончательный диагноз невозможно. Гепатит бывает разного происхождения как вирусного, так и неинфекционного. В ходе диагностики печень исследуют на УЗИ, чтобы оценить степень ее повреждения. Этот метод также позволяет отличить воспаление печени от других ее заболеваний, которые протекают со схожей симптоматикой.

При клиническом и биохимическом анализах крови можно обнаружить лейкоцитоз (повышение числа лейкоцитов – признак воспаления), а также возрастание активности печеночных ферментов (АЛТ, АСТ). На застой желчи укажет повышение уровня билирубина.

Наиболее информативный метод диагностики гепатита С – это серологические реакции, для которых потребуется сыворотка крови больного. Существует две разновидности таких реакций:

основанные на комплексе антиген-антитело;
определение РНК вируса в крови.

К первой разновидности относят ИФА – иммуноферментный анализ. Этот метод основан на тех реакциях, которые протекают в организме при попадании вируса. У возбудителя есть белки, которые иммунная система распознает как чужеродные. В ответ на них начинают вырабатываться антитела (иммуноглобулины) – специфические белки организма человека, которые уничтожают инфекцию.

Второй способ – это полимеразная цепная реакция (ПЦР). В ходе исследования в сыворотке крови больного обнаруживают участки РНК, по которым с точностью можно идентифицировать вирус и определить его концентрацию. Именно эта реакция используется для генотипирования гепатита С. Для нее нужна венозная кровь, которую сдают утром на голодный желудок. Исследования проводят в лаборатории на специальном оборудовании, для работы с которым нужна определенная квалификация. Результаты направляют пациенту, в бланке будет указан тип вируса, а если реакция была количественной – то и его концентрация в крови.

Лечение и профилактика

Лечение генотипа 2 гепатита С – это длительный процесс, который чаще всего занимает от 12 до 24 месяцев. В основе терапии лежат препараты, которые являются аналогами клеток иммунной системы человека либо стимулируют иммунитет. Эффективность борьбы с вирусом зависит от его генотипа и концентрации, а также от степени повреждения печеночной ткани и сопутствующих заболеваний.

Софосбувир — это эффективный, но дорогостоящий препарат, который включают практически во все схемы терапии гепатита С

В схеме лечения используются следующие лекарственные препараты:

интерфероны – аналоги белков иммунной системы человека, которые уничтожают инфекцию;
Рибавирин – препарат с прямым противовирусным действием;
пегинтерфероны (пелигированные интерфероны) – это интерфероны пролонгированного действия, в химическую структуру которых добавлена молекула полиетиленгликоля;
Софосбувир и его аналоги.

Софосбувир – это эффективное средство, которые присутствует практически в любой схеме противовирусной терапии. Оно дорогостоящее, и не все пациенты имеют возможность приобрести его в нужном количестве. Многие производители предлагают аналоги этого лекарства (дженерики). Они выпускаются в Индии и Египте, стоят намного дешевле оригинального медикамента и показывают неплохие результаты в лечении гепатита С.

Существует 3 основных схемы лечения этого заболевания:

Софосбувир с Рибавирином на 3 месяца (при циррозе – до 5 месяцев);
Софосбувир с Рибавирином и пелигированным интерфероном-альфа – такая комбинация показана при тяжелых повреждениях печени, циррозе или при обострении;
Софосбувир с Даклатасвиром на 3 месяца – при серьезных сопутствующих патологиях печени.

Эти схемы направлены только на избавление от возбудителя гепатита. Параллельно необходимо принимать препараты для укрепления и восстановления печени – гепатопротекторы. Также больному назначается специальная щадящая диета, которая исключает любые нагрузки на печень. В этот период противопоказаны все жирные, жареные, соленые продукты и сладости. Также следует исключить соусы, копчености, выпечку, газированные напитки и алкоголь. Основа рациона — это пища с высоким содержанием белка, а именно нежирные сорта мяса и рыбы. Кроме того, необходимо употреблять свежие фрукты и овощи в больших количествах, поскольку они являются основным источником витаминов. Поливитаминные комплексы можно также приобрести в виде добавок.

Генотип 2 гепатита С успешно лечится. Если больной принимает противовирусные препараты, ведет здоровый образ жизни и правильно питается, болезнь отступает без последствий. Однако при некоторых условиях бороться с гепатитом может быть затруднительно. Заболевание тяжело протекает у лиц с сахарным диабетом, патологиями сердечно-сосудистой системы, лишним весом или с запущенной стадией гепатита. В остальных случаях при условии своевременного начала лечения от вируса гепатита можно избавиться без последствий.

Источник