Полимеразная цепная реакция гепатит в
Полимеразная цепная реакция — это вид анализа крови, который позволяет безошибочно выявлять вирус гепатита В. Особенностью метода является то, что он способен показать ВГВ на ранних стадиях — уже через месяц после инфицирования, в то время как специфический антиген у больного обнаруживается только через 2 месяца. ПЦР может выявить не только обычный ДНК-вирус, но и мутантные штаммы, которые ни один другой анализ увидеть не позволяет.
При расшифровке ПЦР на гепатит В результаты сравниваются со стандартными значениями. На основе этого делаются выводы о наличии заболевания (положительный результат), концентрации вируса (активности) или отсутствии недуга (отрицательный результат). Обработка данных идет 2 недели.
Виды ПЦР на вирусный гепатит В
Существует 2 вида диагностики, которые назначают при гепатите В. Качественный ПЦР дает возможность с точностью в 100% сказать, есть ли ВГВ в крови или нет. Количественный ПЦР показывает активность вируса, то есть сколько ДНК фрагментов ВГВ содержится в 1 мл крови.
Качественный ПЦР и его трактовка
Проведение анализа крови на гепатит В методом ПЦР может выявить лишь наличие ДНК-фрагментов. Назначается в том случае, когда пациент подозревает о заражении ВГВ (HBV) или когда другие способы диагностики, например, серологические пробы не дают четкого ответа. Расшифровка результатов при проведении качественного анализа очень проста:
- отрицательный результат — вируса нет;
- положительный результат — вирус обнаружен.
Целью качественного ПЦР является подтверждение или опровержение наличия вируса гепатита В, а также проведение ранней диагностики. Если ВГВ выявлен в течение 1-2 недели после заражения, то лечение станет максимально эффективным. При активном развитии HBV в течение 2-х месяцев и выше, заболевание переходит в хроническую форму и полному излечению не подлежит.
В случае когда качественный ПЦР на гепатит показывает наличие вируса, следующим этапом становится проведение количественной диагностики.
Количественный ПЦР
Для назначение эффективного лечения или оценки результатов проводимой терапии просто знать, что у больного имеется ВГВ, недостаточно. Необходимо определить количественно значение ДНК вируса гепатита В в 1 мл крови, то есть вирусную нагрузку на организм. Этот вид ПЦР на гепатит В проводится в следующих случаях:
- Перед назначением лечения.
- Для оценки эффективности терапии.
- Для определения развития устойчивости вируса к принимаемым препаратам.
- Для определения стадии, на которой находится заболевание.
Единицей измерения вируса являются международные единицы (МЕ/мл) или количество копий ДНК/мл, то есть количество ДНК-фрагментов на 1 мл крови. Соотношение между двумя единицами зависит от выбранной тест системы и колеблется от 2 до 7 копий/мл в 1 МЕ/мл. Если система неизвестна, то для пересчета используется усредненное значение:
1 МЕ/мл = 5 копий/мл
Если сразу делается количественный анализ, то граничная норма для диагностирования заболевания составляет 75 МЕ/мл. При результате выше этого показателя, ставится диагноз ВГВ, ниже — ВГВ не выявлен.
Трактовка количественного ПЦР
При гепатите В нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки (виремии), копий/мл:
- < 10^3 — нагрузка очень низкая, вирус ведет себя неактивно;
- от 10^4 до 10^5 — нагрузка низкая, вирус обычно неактивен;
- 10^6 — нагрузка умеренная, вирус ведет себя активно;
- 10^7 — виремия большая, вирус высокоактивен.
Зная количественно, как ведет себя вирус в организме, можно определить форму заболевания (хроническая, острая или носительство), необходимость проведения дополнительных исследований, реакцию организма и вируса на лечение:
- Хронический гепатит В диагностируется, если значение трансаминазы будет выше нормы, активность вируса — больше 4, а концентрация ДНК-копий в миллилитре крови составит 10^5 копий.
- Носительство определяется по следующей картине, которую дают результаты — концентрация < 10^5 копий/мл, а уровень трансаминазы равен стандартному значению.
- Резистентность (устойчивость) при HBV постоянно контролируется во время лечения. Анализы сдаются каждые 3 месяца. Если в один из моментов виремия при гепатите увеличится в 10 раз, то это означает, что ВГВ приспособился к используемым лекарственным препаратам — стал устойчивым.
- Благоприятный ход лечения покажет снижение виремии на 85% через 3 дня после начала терапии.
- Направление на биопсию печени больной получает лишь тогда, когда показатель АЛТ (аланинаминотрансферазы) превышает нормальное значение не более 2 раз за 6 месяцев, а расшифровка ПЦР на гепатит В показывает виремию > 10^5 копий/мл. Когда же при большой вирусной активности наблюдается повышение уровня АЛТ чаще 2-х раза за полгода, то сразу же назначается антивирусная терапия.
Чтобы узнать, как будет вести себя ДНК гепатит в плане хронизации, то есть перехода к хронической форме из острой, также используются результаты ПЦР-диагностики:
- ДНК ВГВ < 2 х 10^4 копий/мл означает, что острая стадия не перейдет в хроническую форму;
- ДНК ВГВ лежит в пределах от 2 х 10^4 до 2 х 10^6 копий/мл означает, что у каждого 4-ого больного ВГВ станет хроническим, то есть хронизация составляет 25-30%;
- ДНК ВГВ > 2 х 10^6 копий/мл означает, что приобретение хронической формы недуга неизбежно.
Подготовка к обследованию
Для определения наличия ВГВ методом ПЦР делается анализ крови из вены. Процедура всегда проводится строго натощак и лучше всего попасть в лабораторию утром, когда естественное время отдыха от пищи составит 8 часов. Чтобы результаты обследования получились верными, необходимо узнать заранее, как подготовиться к походу в клинику правильно. Дополнительные этапы таковы:
- Отказ от жирной пищи, курения, спиртного и занятий спортом за 12 часов до процедуры.
- Отдых в течение 20 минут непосредственно перед сдачей крови.
- Перед началом процедуры необходимо предупредить медсестру о принимаемых медикаментах.
Внимание! Если диагностика проводится ребенку младше 5-ти лет, то за полчаса до процедуры его нужно поить кипяченой водой по 1 стакану через каждые 10 минут.
Подводя итоги
На сегодняшний день ПЦР-диагностика для выявления гепатита В является самым точным методом. Способ позволяет увидеть скрытые и мутировавшие формы заболевания, выявить недуг на первых неделях после инфицирования и, соответственно, провести эффективное лечение. В зависимости от ситуации проводится качественный или количественный ПЦР, которые направлены на выявление ВГВ и установлении его активности. Чтобы пройти обследование, нужно обратиться к вирусологу, инфекционисту или гепатологу.
Источник
Вирусный гепатит В является серьезным и опасным заболеванием. Опасность этой болезни заключается в осложнениях, которые следуют за ее основными проявлениями. Поэтому очень важно не запустить болезнь, и своевременная диагностика поможет этого добиться.
Так как гепатит В в основном передается через зараженную кровь, основным методом диагностики этого заболевания является анализ этой биологической жидкости. В частности, это полимеразная цепная реакция (ПЦР). Но как применяется метод ПЦР при гепатите В? Что собой представляет этот анализ? Как правильно подготовиться к ПЦР-анализу на гепатит? Ответы вы найдете в статье.
Что это за анализ?
Полимеразная цепная реакция — это анализ крови, благодаря которому можно определить количество и концентрацию ДНК и РНК возбудителя. ПЦР позволяет своевременно диагностировать заболевание, нивелируя риск проявления серьезных последствий недуга. Для диагностики вирусного гепатита В берется небольшой образец венозной крови пациента.
Основными задачами ПЦР на гепатит В являются:
- Диагностика вирусного поражения печени на самом раннем этапе ее развития;
- Уточнение диагноза при спорных результатах других анализов;
- Выявление вирусоносительтва;
- Определение генотипа и квазитипа патогена.
Преимуществами данного вида диагностики являются высокий уровень достоверности и быстрое получение результатов. Различают количественный и качественный анализы ПЦР. Рассмотрим каждый из них подробнее.
Количественный ПЦР при гепатите В
Количественный ПЦР при гепатите С проводится для определения количества патогенного ДНК в плазме крови пациента. Определяемым фрагментом в данном случае становится уникальная ДНК-последовательность структурного вирусного белка.
Количественный ПЦР применяется не только для постановки диагноза. При лечении гепатита В при помощи данного анализа можно установить действенность терапии по вирусной нагрузке. Если она снижается, лечение можно считать успешным.
Расшифровка качественной полимеразной цепной реакции проводится в лабораторных условиях профильными медработниками. Ключевые показатели анализа представлены ниже:
- От 75 МЕ/мл до 108 МЕ/мл — положительный результат;
- Менее 75 МЕ/мл — отрицательный результат, возбудитель вирусного поражения печени не обнаружен.
Если результат анализа положительный, можно говорить об обнаружении патогена в организме носителя, а также о сопутствующей вирусной нагрузке. В этом случае пациенту может быть назначено определенное лечение. Наиболее эффективной является терапия с применением инновационных противовирусных средств. Однако в настоящее время ВГВ признан излечимым только частично.
Отрицательный ПЦР свидетельствует об отсутствии заражения возбудителем вируса гепатита В. Однако это не означает, что человек полностью здоров. Рекомендуется сдать анализы также и на другие типы гепатита. Особенно коварен гепатовирус типа С, который чаще всего провоцирует хроническую форму болезни без выраженной симптоматики. Поэтому заболевание важно своевременно диагностировать.
Качественный анализ ПЦР
Качественный анализ ПЦР при гепатите В нацелен на обнаружение патогена. Это — один из наиболее точных методов диагностики гепатовируса. Полимеразная цепная реакция на основе образцов венозной крови пациента проводится в режиме реального времени.
Показатель свыше 75,0 МЕ на мл свидетельствует о наличии возбудителя заболевания в организме больного. Это может быть как вирусоносительтво, так и активная фаза опасного заболевания.
В каких случаях показан ПЦР?
Метод ПЦР при гепатите В — наиболее рекомендуемый гепатологами способ проверить наличие вируса в крови. Пройти анализ на полимеразную цепную реакцию рекомендуется в следующих случаях:
- При наличии явных симптомов гепатита — тошноты, рвоты, желтушности склер и кожи, болей в области печени, обесцвечивания кала и потемнения мочи;
- При внутривенной (инъекционной) наркомании;
- При высоких показаниях АлТ и АсТ в результатах биохимического анализа крови;
- При холестазе (застое в желчевыводящих путях);
- Беременность или хирургическое вмешательство, предварительная подготовка к родам или операции;
- При регулярных процедурах диализа или переливания крови;
- Если состоялся половой акт с потенциально зараженным партнером.
Количественный или качественный анализ ПЦР также может назначаться лицам, которые в прошлом уже переболели одной из форм гепатита. Таким образом мониторится состояние пациента, так как возможен рецидив.
Как подготовиться?
Любая диагностика вирусного заболевания требует подготовки, в противном случае результаты будут неточными. Перед сдачей крови на ПЦР количественный при гепатите В, пациенту следует:
- Отказаться от тяжелой и насыщенной жирами пищи за сутки до явки на сдачу образца крови;
- Не есть в течение последних 8 часов перед сдачей анализа;
- Отказаться от употребления алкоголя и табачной продукции не менее чем за 1 сутки;
- Избегать стресса и физической перегрузки, хорошо выспаться.
Сбор образцов биологической жидкости для исследования проводится в утренние часы. Чаще всего анализ ПЦР на гепатит В сдается в 8 утра.
Оцените статью:
| Всего голосов: 0 Средняя оценка: 0
Источник
Гепатит В – инфекционное заболевание печени, протекающее по аутоиммунному механизму. Вирус, попадая в кровь, размножается в гепатоцитах, вызывает их гибель. В затяжной хронической форме гепатит В вызывает рак и цирроз. По симптоматике заболевание схоже с простудой, выявить его на ранней стадии сложно. После контакта с больным или посещении стран с высокой заболеваемостью, угрозе потенциального заражения проводятся исследования крови. Анализ ПЦР на гепатит B с высокой точностью определяет присутствие вируса, степень активности возбудителя.
Качественная оценка выявляет возбудителя, количественная помогает установить степень вирусной нагрузки. Повторное исследование помогает увидеть клиническую картину течения заболевания в динамике.
Вы знаете как расшифровывается ПЦР?
ДаНет
Что такое ПЦР на гепатит В?
Метод полимеразной реакции (ПЦР) разработан лауреатом нобелевской премии Мюллисом. Он основан на принципе копирования структуры возбудителя. Определяет в крови ДНК вирус HBV и его концентрацию. В период заболеваемости в сыворотке присутствует белковый антиген – часть оболочки возбудителя. Именно его распознает и атакует иммунная система организма.
По концентрации антигенов и антител в сыворотке крови можно судить о степени активности возбудителя.
ПЦР дает оценку HBV на момент взятия проб. В процессе молекулярного исследования сначала расщепляется цепочка ДНК, для этого в амплификаторе сначала повышается температура, затем резко снижается. Маркеры в нужной последовательности присоединяются к ДНК – создаются копии исследуемого материала, по ним определяют концентрацию возбудителя в расчете на 1 мл.
Показания к исследованию
Качественный анализ ПЦР выявляет возбудителя. По результатам судят о стадии гепатита.
Исследования проходят:
- реципиенты донорской крови;
- больные с почечной недостаточностью, находящиеся на гемодиализе;
- инфицированные ВИЧ;
- беременные женщины;
- медицинские работники инфекционных отделений;
- лаборанты, исследующие кровь;
- больные с печеночными патологиями;
- все потенциально зараженные;
- люди, побывавшие в странах с высоким уровнем заболеваемости.
Количественный ПЦР проводится:
- если ранее был выявлен возбудитель HBV, проводится лечение;
- после положительных проб ИФА (иммуноферментного анализа);
- при печеночных заболеваниях, причиной которых бывает вирус гепатита В.
Для исследования берется венозная кровь, делается это на голодный желудок. Точность оценки зависит от правильности подготовки пациента перед исследованиями.
Виды ПЦР
Количественный и качественный методы диагностики гепатита В по сути не различаются. Они основаны на свойствах ДНК-вируса, его способности синтезировать особые белки, которых нет в организме человека. Метод полимеразной реакции с высокой долей вероятности выявляет возбудитель, имеющий сложную структуру.
В зависимости от концентрации HBsAg, HBeAg судят о стадии развития заболевания, правильности лечения. При остром гепатите они присутствуют в крови одновременно, при наличии HBeAg больной является вирусоносителем, способен заражать других. Методику ПЦР определяет врач на основании анамнеза пациента.
Количественный ПЦР на гепатит В
Показатель ПЦР количественный при гепатите B характеризует:
- интенсивность деления вируса в клетках печени;
- способность организма противостоять инфекции;
- правильность выбора противовирусных средств.
В ходе болезни неоднократно проводится анализ полимеразной цепной реакции, количество вирусов в крови постоянно меняется. После инкубационного периода возрастает уровень HBsAg. Затем появляется HBeAg – антиген, находящийся в ядре возбудителя. Когда этот антиген исчезает, вместо него появляются антитела. Это говорит о борьбе организма с возбудителем. Метод определяет вирусную нагрузку на иммунную систему.
По количественному показателю ПЦР выявляется опасность хронической формы заболевания. Установлена норма трансаминазы, при которой вирус неактивен для окружающих. Больным, состоящим на учете, исследования проводятся каждые три месяца. По вирусной нагрузке определяют степень тяжести болезни. Если она превышает допустимую в два раза, больному назначают дополнительное обследование, меняют тактику лечения.
Качественный ПЦР
Метод полимеразной реакции самый надежный для выявления возбудителя. Качественный ПЦР анализ на гепатит В с высокой точностью устанавливает факт заражения вирусом HBV. Он подтверждает или опровергает предварительный диагноз.
В 50% ДНК вирус выявляется на стадии, пока организмом не вырабатываются антитела. Иммунная система не сразу распознает чужеродные белки, они выявляются, когда размножившийся вирус покидает гепатоциты.
Уничтожая HBsAg и HBeAg, организм попутно разрушает гепатоциты. Это приводит к серьезным осложнениям. Когда HBV присутствует в крови более двух месяцев, гепатит В переходит в хроническую форму. В течение первых двух недель с вирусом бороться легче.
Расшифровка результатов ПЦР на гепатит В
Человек здоров, если возбудитель не присутствует в крови, или концентрация HBsAg ничтожна, а HBеAg отсутствует полностью. Результат в этом случае отрицательный. Только в единичных случаях при отрицательном результате выявляется заболевание, это говорит о быстром течении болезни или злокачественным ее характере. Антитела, вырабатываемые иммунной системой, нейтрализуют ДНК-вирус. Но в этом случае возможно обширное поражение печени.
Если результат HBsAg выше нормативных показателей и есть HBеAg, то дополнительно проводится количественный анализ на гепатит В, чтобы узнать, насколько активизировался возбудитель.
Что делать если при ПЦР подтвердили гепатит В?
Важно обезопасить близких:
- отдельно держать предметы личной гигиены, способные повреждать кожу и слизистые (зубную щетку, бритву, маникюрные принадлежности);
- пользоваться индивидуальным полотенцем;
- изолировать раны.
Полезно придерживаться диеты, отказаться от вредных привычек. При соблюдении всех назначений врача от вируса избавляются навсегда.
( 1 оценка, среднее 5 из 5 )
Источник
