Постановка ифа при гепатите а

Гепатит А коварен тем, что заразившийся представляет угрозу для окружающих последние пять дней инкубационного периода, когда заболевание протекает в скрытой форме. Люди с хорошим иммунитетом переносят болезнь Боткина легко, без желтушности, при этом так же активно высевают вирус, по нескольку миллиардов в сутки, для заражения хватит 100 особей.

По симптомам заболевания печени схожи с проявлениями ОРВИ, поэтому присутствие в крови патогена заподозрить всё-таки можно, особенно если был контакт с выявленным больным, или человек находился в зоне возможного поражения. Вирус гепатита А живуч, длительное время живет на поверхностях, к которым прикасался больной, в воде он спокойно существует до 10 месяцев.

Показатели крови меняются, если печень поражена. Выявить присутствие патогена помогает анализ на гепатит А. По результатам несложно установить факт заражения. Специальные маркеры определяют в крови вирусы гепатита А, антигены к заболеванию, их концентрацию. Исследования проводятся в диагностических и профилактических целях, в первую очередь обследуют людей группы риска.

Какие анализы крови сдаются на гепатит А?

На нарушения работы печени указывают отклонения некоторых показателей от нормы общего анализа крови, когда кровь берут из пальца. При воспалительном процессе любой этиологии изменяется скорость осаждения эритроцитов.

Развернутую картину состояния здоровья позволяют получить биохимические исследования проб, взятых из вены. Например, билирубин: по его концентрации судят о присутствии патологических изменений в паренхиме. На заболевание указывают сразу несколько показателей. Но установить факт заражения по биохимическому анализу нельзя.

Вирус гепатита А выявляется по ферментам, которые организм начинает выделять, когда патоген попадает в гепатоциты. С большой точностью определяют гепатит А анализы:

Anti-HAV-IgG на наличие анител класса IgG, они появляются в крови когда организм начинает противостоять вирусу гепатита А и после прививок, когда вырабатывается иммунитет;
Anti-HAV-IgM выявляет антитела класса IgM, их количество возрастает в период заболевания, резко снижается при выздоровлении;
тест на РНК-вирус, этот генетический анализ проводится методом ПЦР (полимеразная цепная реакция), исследуется сыворотка крови.

Кому необходимо сдавать анализы?

Существует утвержденный Минздравом список лиц, которые регулярно проходят обследования, это:

сотрудники медицинских учреждений;
кадровый состав и учащиеся образовательных учреждений (детских садов, школ, специализированных учебных заведений);
специалисты, контактирующие с неорганизованными детьми в группах их дневного пребывания;
работники интернатов;
люди, занятые в сфере торговли, общепита, переработки продуктов питания;
военнослужащие и гражданские лица, служащие в исправительных учреждениях.

Кровь на гепатит А сдают:

беженцы;
лица, находящиеся в очаге возможного заражения (когда выявляются случаи заболевания, обследуют родственников заразившегося, соседей, коллег по работе или учебе);
люди, устраивающиеся на работу в детские учреждения, школы, другие предприятия, где требуется санитарная книжка;
сотрудники, выезжающие в командировки в страны с высоким уровнем заболеваемости гепатитом;
туристы, посещающие страны Ближнего востока, Африки;
люди, проживающие в районах, где канализационные стоки попали в питьевой водоем, вышла из строя система хозпитьевого водоснабжения.

В группе риска находятся и другие категории граждан, которым рекомендуется анализ крови на гепатит:

люди, пренебрегающие правилами личной гигиены;
любители орального секса, гомосексуалисты;
асоциальные элементы, проживающие в антисанитарных условиях;
жильцы общежитий, сотрудники учреждений, контактирующие с большим числом посетителей.

ИФА на гепатит А

От болезни Боткина нет лекарственных средств, больному снимают интоксикацию, поддерживают защитные функции организма. Иммунитет самостоятельно вырабатывает антитела или они вводятся в процессе вакцинации. Они бывают двух типов, сначала появляются антивирусы IgM, затем IgG. Определяются они иммуноферментным анализом Anti-HAV.

Как оцениваются результаты исследований:

при отсутствии возбудителя в крови не обнаруживаются АНТИ-HAV IgM, АНТИ-HAV IgG;
когда вырабатывается иммунитет, у человека отрицательный результат теста АНТИ-HAV IgM, положительный на присутствие IgG-антител;
если в крови одновременно есть антигены IgM и IgG, организм заражен вирусом гепатита А.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Качественную и количественную оценку вируса гепатита А позволяет получить анализ методом ПЦР. Ген в специальной питательной среде с содержанием особых ферментов заставляют искусственно размножаться, чтобы затем определить генотип вируса: 1а, 1b или 1с. Существует два типа анализа ПЦР:

качественный определяет наличие штамма в крови, положительный ПЦР говорит о заболевании,
отрицательный ПЦР у здоровых людей;
количественный анализ позволяет определить концентрацию вируса, этот показатель характеризует степень опасности инфицированного для окружающих.

Метод ПЦР выявляет заболевание на ранних стадия, когда нет внешних проявлений желтухи. Когда гепатит А протекает в латентной форме, вовремя выявить вирус гепатита А очень важно, распространение болезни происходит молниеносно, особенно в контактных группах. Изолировав больного, можно предотвратить эпидемию.

Общий (клинический) анализ крови

Результаты помогают в постановке предварительного анализа, у больного снижается уровень гемоглобина, меняется показатель свертываемости – уровень тромбоцитов падает, количество эритроцитов увеличивается, лейкоциты, наоборот, быстро разрушаются.

Каких-то характерных изменений при гепатите А в анализе не выявляется. Можно судить только об интоксикации, ухудшении состояния здоровья зараженного. Такая клиническая картина характерна для многих заболеваний.

Отклонения от норм являются поводом проводить дальнейшие исследования. Какие показатели общего анализа крови при гепатите А считаются нормальными, указано в таблице.

Результаты ОАК при гепатите А

Показатель (концентрация стандартная, указанная в бланках)	Возрастная группа: дети до 3 лет	Возрастная группа: дети от 3 до 12 лет	Возрастная группа: лица, старше 12 лет
уровень лейкоцитов	6–17	5–11	4–9,5
количество лимфоцитов	2–9,5	2–9,5	1–5
концентрация эритроцитов	1–12	1–12	1–15
уровень тромбоцитов	100–450	100–450	180–400
СОЭ (скорость осаждения эритроцитов)	4–8	4–12	2–20

Биохимический анализ крови

Венозная кровь исследуется после проведения общего анализа крови или одновременно с ним. При попадании вируса меняется белковый состав крови, концентрация микроэлементов. По биохимии можно судить о патологических процессах в печени, есть показатели, отклонение от нормы которых характерны только для пораженной паренхимы.

На что обращают внимание в анализе на гепатит А (расшифровка показателей):

Концентрация билирубина (нормой считается 20,5 мкмоль/л), он утилизируется здоровыми клетками печени. Если орган работает не в полной мере, вещество накапливается в крови, в результате у человека желтеют склеры, глазные яблоки, кожа.
Показатель АЛТ, (у здорового человека он в пределах 500 МЕ/л), при заболевании печени концентрация достигает 3000 МЕ/л, чем больше степень поражения паренхимы, тем выше концентрация белка АЛТ или АЛаТ.
Уровень АСТ (норма 34-41 МЕ/л), когда этот белок хуже выводится из организма, концентрация его в крови возрастает. Одной из причин плохой утилизации является инфекционное поражение печени.
Общий белок (у взрослых людей его должно быть не меньше 65 г/л, не больше 84 г/л), отклонение от нормы в любую сторону говорят о патологии, при воспалительных процессах в организме, в том числе и в печени, норма общего белка превышена.
Альбумин (нормой считается концентрация в диапазоне 35–50 г/л), он ферментируется печенью, если паренхима поражена, уровень альбумина падает. Этот показатель очень характерен для гепатита А, так как вирус гепатита А заселяется в гепатоциты, уничтожает их. Некротические клетки в дальнейшем вызывают воспаление. По снижению альбумина можно заподозрить заболевание на ранних стадиях и при латентной форме течения.

Как сдавать анализы на гепатиты?

Точность исследований напрямую зависит от подготовки пациента к взятию проб. Речь идет не только сдаче анализа на голодный желудок. За сутки до забора крови людям с подозрениями на гепатит А не рекомендуется:

употреблять жирную пищу;
есть консервации и салаты с большим содержанием уксуса;
исключить специи, особенно с желчегонными свойствами;
отказаться от употребления спитросодержащих напитков любой крепости;
снизить по минимума прием медикаментов, исключить БАДы, витаминные комплексы, на лекарства от диабета, гипертонии, сердечных заболеваний запрет не распространяется.

За 8 часов до анализов необходимо полностью отказаться от еды. При выполнении этих правил пациентом результаты исследований будут отражать реальную картину состояния его здоровья.

Сколько делается анализ на гепатит А?

Существуют специальные правила забора крови, ее транспортировки в лабораторию, в них же указывается, сколько времени делают анализ на гепатит А. Для проведения общего анализа крови требуется до 2 рабочих дня, превышение этого срока считается нарушением. Обычно результаты готовы уже к вечеру. Для проведения биохимического анализа отводится неделя.

Методы, требующие предварительной подготовки биологических жидкостей, оттягивают процесс получения результатов, сроки их получения могут затягиваться 10 дней.

Существуют методы экспресс-тестирования, когда забор крови производится для определения одного из показателей.

Источник

Для диагностики вирусного гепатита в рамках медицинского протокола используется несколько лабораторных и инструментальных методик. Одной из самых достоверных является иммуноферментный анализ (ИФА). Метод помогает определить наличие антигена к тому или иному виду вируса. Для этого выполняется стандартная процедура забора крови из вены пациента. Результаты становятся известны уже через неделю после взятия анализа.

Постановка ифа при гепатите а

Что такое ИФА?

Термин расшифровывается как «иммуноферментный анализ». Он подразумевает определение в крови комплексов антиген-антитело для уточнения этиологии возбудителя. Если это вирус, определяются его виды и подвиды. Антигены — это частички на поверхности клеток возбудителей, связывающиеся с определенными участками антител. Последние являются иммунными молекулами, вырабатываемыми организмом для собственной защиты. Антигены и антитела неповторимы, поэтому определение их структуры с помощью иммуноферментного анализа свидетельствует о наличии конкретной патологии в организме больного. В качестве меток используются ферменты, которые и дали название методике.

Вернуться к оглавлению

Плюсы исследования

ИФА — это высокоточная методика, ее чувствительность достигает 90%. Она помогает проводить скрининг парентеральных гепатитов. Эти заболевания передаются путем инъекции, или через переливание крови. ИФА помогает выявить пациентов, у которых отсутствуют симптомы. Таковыми является большинство хронических больных. Они имеют риск развития цирроза. Его обнаружение на поздних стадиях — это плохой прогноз. Поэтому иммуноферментная методика позволяет своевременно определить заболевание и сэкономить деньги на лечение. ИФА верифицирует этиологию возбудителя и определяет прогноз недуга. Диагностические наборы для нее стоят недорого и длительно хранятся. За быстроту, удобство и точность данных ИФА называют экспресс-методом.

Вернуться к оглавлению

Когда нужен анализ?

Постановка ифа при гепатите а Для определения вида вируса необходимо сдать ИФА.

ИФА необходим, когда требуется уточнить этиологию вирусного возбудителя для определения схемы лечения. У пациента идентифицируют наличие хронического гепатита B и C, или перенесенного заболевания вирусом подтипа A. Методику нужно применять у членов семьи больного, которые могут заразиться. В инфекционном стационаре анализ выполняется всем пациентам, у которых присутствуют такие симптомы:

Желтуха. Желтушность кожных покровов не сопровождается болями в правом подреберье и изменением цвета стула и мочи.
Повышение температуры тела. Она вырастает до субфебрильных цифр, иногда наступает лихорадка.
Диспепсия. Присутствуют тошнота и рвота, которая не приносит облегчение.
Немотивированная слабость.
Мелкоточечные высыпания на теле. Это мелкие кровоизлияния вследствие печеночной недостаточности.
Тяжесть в правом подреберье. Симптом возникает вследствие растяжения увеличенной печенью собственной капсулы, содержащей множество нервных окончаний.

Основным показанием к выполнению анализа является наличие определенных анамнестических данных. Если пациент ранее страдал инъекционной наркоманией, ему переливали кровь или пересаживали органы — это повод выполнить ИФА.

Вернуться к оглавлению

Подготовка к проведению

Чтобы результаты ИФА были достоверными, требуется предварительно подготовиться. За день до сдачи крови пациенту рекомендуется перестать употреблять жирную и жареную пищу, продукты с высокой концентрацией красителей, стабилизаторов, консервантов, усилителей вкуса и аромата. Нежелательно непосредственно перед выполнением метода заниматься тяжелым физическим трудом и спортивными упражнениями. В день сдачи крови необходимо воздержаться от завтрака. Забор материала натощак позволит получить точный результат. Необходимо исключить из употребления некоторые лекарственные средства. Но самостоятельно это делать не рекомендуется, поскольку есть вероятность вреда для здоровья. Нужна предварительная консультация лечащего доктора.

Вернуться к оглавлению

Методология проведения

Постановка ифа при гепатите а Метод ИФА.

Метод ИФА состоит из двух этапов. На первом выполняется забор материала, на втором последний исследуется в лаборатории. Начальный этап проходит стандартно. Ему предшествует подготовка пациента к сдаче крови. В стерильном помещении проводится забор биоматериала, отправляемый в герметических контейнерах на лабораторное исследование. Дальнейшее определение комплексов антиген-антитело происходит с помощью ферментов и тест-систем на специализированном оборудовании. Результат становится известен в течение недели и отправляется пациенту на электронную почту.

Вернуться к оглавлению

Расшифровка показателей

Интерпретация данных подразделяется на качественную и количественную. При качественном определении результаты анализа считаются позитивными, если обнаружены суммарные антитела к определенному подтипу вируса. Выявление anti-НАV IgМ свидетельствует про острый, а anti-НАV IgG — хронический гепатит А. Позитивный маркер НВsAg — признак инфицирования вирусом подтипа В. Он наблюдается в острой и хронической фазах заболевания. Если же выявлен HBCAg, у человека присутствует хронический гепатит С. А anti-НDV сигнализирует про инфицирование подвидом D. Пациенты, у которых определен положительный маркер к вирусу, нуждаются в дальнейшем обследовании для более точной верификации диагноза.

Источник

ИФА в диагностике вирусных гепатитов. Возможности иммуноферментного анализа

Специфическая лабораторная диагностика вирусных гепатитов основывается на применении иммунохимических и молекулярно-биологических методов исследований. Основными иммунохимическими методами являются радиоизотопный или радиоиммунный (РИА) и иммуноферментный (ИФА). В основе иммунохимических методов диагностики лежит специфическое взаимодействие антиген — антитело с последующим выявлением комплекса при помощи специальных меток. Наиболее распространенным является иммуноферментный анализ.

Первые сообщения о применении иммуноферментного анализа, как метода для определения каких-либо веществ были опубликованы в 1971 году одновременно двумя исследовательскими группами — В. Van Weemen, A. Schuurs и Е. Engvall, P. Perlmann. В основе иммуноферментного анализа лежит следующий принцип: на твердой фазе, в качестве которой используется, главным образом, поверхность лунок полистиролового планшета, фиксируется антиген возбудителя инфекции или антитела (часто смесь антител) к антигенам, которые необходимо обнаружить. Этот антиген или антитела, которые зафиксированы на твердой фазе, называются иммуносорбентом.

В результате инкубации иммуносорбента и испытуемой сыворотки при наличии определяемого агента происходит их связывание в комплекс антиген — антитело. После процедуры промывки, в ходе которой удаляются несвязанные антигены и антитела, проводится инкубация с конъюгатом. В качестве конъюгата при детекции HBsAg используют анти-HBs, при детекции антител к вирусу гепатита С —антитела к иммуноглобулинам человека (антивидовой конъюгат), меченные пероксидазой хрена. В итоге этой инкубации происходит присоединение к уже имеющимся комплексам антиген — антитело дополнительно внесенного конъюгата. После удаления несвязавшегося конъюгата (отмывки) в лунки вносится субстрат. При использовании пероксидазного конъюгата в качестве субстрата используют перекись водорода в сочетании с индикатором, в качестве которого наиболее часто применяют ортофенилендиамин (ОФД) или тетраметилбензидин (ТМБ). Результат оценивается фотометрически.

Качество и надежность аналитических возможностей иммуноферментного метода характеризуются рядом критериев, к числу которых относятся чувствительность, специфичность, правильность и воспроизводимость.

ифа в диагностика гепатита

Чувствительность — то минимальное количество вещества, которое может быть обнаружено при помощи иммуноферментного анализа. При этом нижним пределом чувствительности данного метода является концентрация исследуемого вещества в образце, которая соответствует наименьшему положительному результату определения, статистически достоверно отличающемуся от показателей заведомо отрицательных образцов. Чувствительность ИФТС зависит от ряда обстоятельств, связанных как с конструкцией тест-системы (аффинность иммуносорбента, качества экстракционных и буферных систем), так и разрешающей способностью и точностью метода регистрации.

Специфичность — способность выявлять именно те компоненты, для определения которых предназначена данная иммуноферментная тест-система. Специфичность ИФА определяется во многом перекрестной реакцией антител или антигенов (то есть композиции, используемой в качестве иммуносорбента), с близкородственными соединениями, а также составом инкубационной среды (матрикс-эффект).

Правильность — соответствие среднего значения результатов повторных определений одного и того же контрольного образца с истинной величиной измеряемого параметра. Правильность определения в ИФА зависит от качества самой тест-системы и контрольного образца. Для хороших иммуноферментных тест-систем показатели правильности лежат в пределах 90-110 %. Особенностью медико-биологических исследований в ИФА является невозможность установления точной величины, и поэтому за истинную величину принимается средняя от нескольких экспертных лабораторий. Статистическим критерием правильности служит средняя арифметическая и степень ее отклонения от истинного значения, выраженная в процентах.

Воспроизводимость — способность тест-системы показывать одни и те же значения при повторных исследованиях одного и того же образца. Воспроизводимость зависит как от случайных погрешностей (ошибок) при проведении процедуры постановки реакции, так и от качества тест-систем и точности метода регистрации результатов. Считается, что воспроизводимость одних и тех же контрольных образцов одной фирмы в разных лабораториях не должна превышать величину коэффициента вариации в 15%.

Существует несколько специфических схем ИФА для определения маркеров вирусных гепатитов: а) прямой иммуноферментный анализ; б) непрямой иммуноферментный анализ; в) конкурентное ингибирование; в) «ловушеч-ный», или «capture» метод.

Из молекулярно-биологических методов диагностики вирусных гепатитов чаще используются полимеразная цепная реакция и гибридизация. Эти методы, особенно ПЦР, позволяют выявлять очень малые количества специфической вирусной ДНК или РНК и, таким образом, судить о репликации, а в ряде случаев и об активности репликации.

Видео лабораторная диагностика вирусных гепатитов

Посетите раздел других видео уроков по эпидемиологии.

— Также рекомендуем «Вирус гепатита В и его антигены»

Оглавление темы «Диагностика вирусных гепатитов»:

Подтверждение или исключение гепатита D и гепатита С у детей
ИФА в диагностике вирусных гепатитов. Возможности иммуноферментного анализа
Вирус гепатита В и его антигены
Мутации вируса гепатита В. Генетическая изменчивость ВГВ
Заражение гепатитом В после прививки. Иммунитет к вирусу гепатита В
Варианты HBsAg гепатита В и их распространение
Современная диагностика гепатита В. Выявление HBsAg
Вирус гепатита С и его геном
Белки и антигены вируса гепатита С. Диагностика ВГС
Современная диагностика вирусного гепатита А. Антигены HAV

Источник