Референтные значения в результатах анализов на гепатит с
«Выявление генов вируса гепатита С (HVC) в крови пациента является вторым этапом лабораторной диагностики этой инфекционной патологии. Чтобы обнаружить возбудителя, который не имеет клеточной мембраны и, соответственно, поверхностных антигенов, используют метод полимеразной цепной реакции. С помощью этого метода определяют непосредственно молекулу, в которой закодирована вся его генетическая информация — РНК.
Содержание
Что это значит?
Анализ на РНК вируса гепатита С
РНК вируса гепатита С: метод ПЦР
РНК гепатита С: качественный анализ
РНК гепатита С: количественный анализ
Гепатит С: анализы и расшифровка
РНК — Рибонуклеиновая кислота, наряду с ДНК входит в состав клеток всех живых организмов. Вирус гепатита С содержит молекулу РНК и имеет способность к ее мутациям.
Исследование на наличие генома HVC назначают обычно после того, как проводят общий, биохимический анализ крови и получают положительный ответ на антитела (anti-HVC).
Что это значит?
Исследование на антитела к HVC является скрининговым, то есть с его помощью можно обследовать большие контингенты населения (медиков, беременных, пациентов стационаров, доноров, инъекционных наркоманов, ВИЧ-инфицированных). Отрицательный результат лабораторного анализа anti-HVC говорит о том, что в крови обследуемого не обнаружено иммунной реакции на вирус. Отрицательный результат может быть получен в таких случаях:
Если человек никогда не заражался гепатитом С.
Если чувствительность лабораторной тест-системы оказалась ниже, чем концентрация anti-HVC.
Если инфицирование произошло менее 2 месяцев назад и anti-HVC в крови еще недостаточно для определения. При ложноотрицательном ответе по причине человеческого фактора.
Если же получен результат, что антитела к HVC у больного обнаружены, это значит, что вирус гепатита С находился в организме обследуемого на момент проведения исследования или был в крови некоторое время назад. При положительном результате на anti-HVC возникает необходимость проведения дополнительных лабораторных исследований, которые обнаружат генетический материал самого возбудителя, определят концентрацию его генов (вирусную нагрузку, виремию) и установят генотип.
Анализ на РНК вируса гепатита С
Геном HVC в лабораторных условиях можно обнаружить с помощью нескольких исследований:
- разветвленной ДНК (р-ДНК);
- транскрипционной амплификации (ТМА);
- полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Метод р-ДНК — недорогой и простой способ обнаружения вирусного генома у большого количества обследуемых людей. Его главным недостатком является низкая чувствительность: выявляет HVC только при его концентрации свыше 500 МЕ/мл.
Метод транскрипционной амплификации обнаруживает в сыворотке крови нуклеиновые кислоты вируса. Анализ имеет высокую чувствительность (5-10 МЕ/мл), но он еще недостаточно внедрен в повсеместную лабораторную практику.
Метод ПЦР в России является самым распространенным и доступным лабораторным обследованием с высокой чувствительностью (от 50-60 МЕ/мл).
Исследование ПЦР выполняется в любой клинической лаборатории, имеющей соответствующую аккредитацию. Очень важным нюансом этого метода диагностики, который влияет на результат анализа, является чувствительность используемой в лаборатории тест-системы. Например, чувствительность диагностикума 60 МЕ/мл, как в лабораториях «Инвитро», позволяет обнаруживать вирусную РНК спустя 3 месяца после заражения. При низкой чувствительности тест-системы гены возбудителя могут не обнаруживаться даже спустя 4 месяца после инфицирования.
РНК вируса гепатита С: метод ПЦР
Метод ПЦР имеет множество преимуществ перед другими лабораторными исследованиями для обнаружения генов HVC:
- высокая чувствительность. Метод позволяет определять генетический материал возбудителя даже при его минимальной концентрации в образце;
- большая специфичность. Выявляет гены вируса определенного генотипа среди множества ДНК и РНК других возбудителей, что позволяет проводить генотипирование возбудителя;
- быстрота проведения. Отсутствие длительного процесса культивирования возбудителя сокращает время получения результата до нескольких часов; универсальность анализа.
Универсальная процедура проведения исследования позволяет одновременно использовать один образец крови человека для обнаружения генетического материала разных возбудителей. Эти преимущества позволяют считать ПЦР «золотым стандартом» лабораторной диагностики вирусного гепатита С вместе с иммуноферментным анализом на anti-HVC.
ПЦР — это исследование, используемое для определения генов HVC в крови обследуемого человека. Исследование состоит из нескольких этапов:
- Отбора образца биоматериала.
- Многократного увеличения концентрации копий РНК в отобранном образце.
- Обнаружения генетического материала с помощью специальных тест-систем.
После забора венозной крови у пациента проводят искусственное инициирование процесса множественного реплицирования (амплификации, копирования) генов HVC.
Для этого определенным способом несколько раз изменяют температуру внутри пробирки с биоматериалом. Когда количество копий РНК в пробирке достигает необходимого значения, проводят обнаружение возбудителя с помощью специальных тест-диагностикумов.
ПЦР-диагностика бывает
- качественной (обнаруживает присутствие вируса),
- количественной (определяет концентрацию вирусных генов в единице объема)
- генотипической (устанавливает генотип возбудителя).
РНК гепатита С: качественный анализ
Задача качественного ПЦР — определение наличия HVC в представленном биоматериале. Это исследование проводится обычно для скрининговой диагностики заболевания или выявления носительства. Назначают его после того, как выявят anti-HVC методом ИФА.
Чтобы поставить диагноз гепатита С, достаточно обнаружить генетический материал HCV качественно, то есть без подсчета его концентрации в объеме крови. Результатом качественного ПЦР может быть: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено».
syringe needle with droplet of blood in front of a finger and on blue bacjground
Точность метода соответствует 95%. При этом точность самих тест-диагностикумов достигает 100%, а 5% — это человеческий фактор, который всегда присутствует в лабораторных исследованиях. Чтобы избежать ложноотрицательного анализа, особенно у людей с низкой виремией, необходима высокая чувствительность применяемой в исследовании диагностической системы. Чувствительность тест-системы должна быть не меньшей, чем 60 МЕ/мл.
РНК гепатита С: количественный анализ
Количественный анализ назначают тогда, когда нужно знать уровень виремии в организме человека. Показаниями для проведения этого исследования являются:
- положительный результат качественного ПЦР при условии обнаружения антител к вирусу;
- установление стадии патологии;
- определение вирусной нагрузки при гепатитах;
- выбор комбинации противовирусных препаратов;
- мониторинг вирулогического ответа на проводимую противовирусную терапию;
- оценка вероятности перехода острого гепатита С в хронический.
Результат анализа выражается в МЕ/мл (международных единицах в 1 мл сыворотки) или в копиях/мл (количестве копий генов вируса в 1 мл сыворотки). Количественный ПЦР не имеет нормы: в норме ген HVC в крови человека обнаруживаться не должен. Полученные результаты обследования сравнивают с референсными значениями, установленными для той или иной степени вирусной нагрузки.
Так, показатели (в МЕ/мл):
- ниже 4×10*5 считаются низкой виремией;
- от 4×10*5 до 8×10*5 — средней;
- свыше 8×10*5 — высокой.
Чем больше копий вирусной РНК в крови, тем агрессивнее протекает заболевание и больше риск передачи вируса окружающим. Но уровень вирусной нагрузки — не единственный показатель, влияющий на тяжесть течения патологии и дальнейший прогноз для пациента: важен также генотип возбудителя.
Установление генотипа необходимо для назначения правильной схемы лечения. От него также зависит прогноз для здоровья и жизни пациента. Например, вирус 3 генотипа чаще приводит к фиброзу или циррозу печени, в сравнении с пациентами носителями 1 генотипа.
Гепатит С: анализы и расшифровка
РНК Диагноз гепатита С невозможно поставить только по результатам только качественного и/или количественного анализа ПЦР: определения HVC и уровня вирусной нагрузки недостаточно для назначения адекватной противовирусной терапии. Потенциального больного нужно обследовать комплексно (клинически, лабораторно, инструментально), чтобы иметь объективную картину патологии. Правильно назначить комплекс обследований для установления диагноза гепатита С, а затем грамотно расшифровать полученные результаты может только врач.
Источник: Sofosbuvir-Daclatasvir.ru
Читайте также
Вид:
Источник
Автор Владимир Черкесов На чтение 10 мин.
Основные источники заражения
Основной источник заражения гепатитом С – больной человек. Иногда тот, кто является носителем вируса, не проявляет клинические симптомы гепатита ц. Путь заражения гепатовирусом – через кровь. Это может произойти при любом контакте крови зараженного человека с кровью здорового человека. Чаще всего заражаются следующим образом:
- дети от матери при родах;
- медицинские работники во время проведения манипуляций;
- у взрослых чаще всего гепатит проникает в кровь из-за посещения маникюрных салонов, салонов татуажа и пирсинга, где могут работать с инструментами без должной дезинфекции;
- заболевание часто обнаруживается у наркоманов, вводящих себе в вену наркотические препараты;
- половой путь хотя и редко, но тоже может спровоцировать заражение гепатовирусом.
Более подробно об основном источнике инфицирования Гепатитом Ц читайте тут.
Что делать, если обнаружили гепатит Ц?
Куда обратиться, чтобы сдать анализы?
Поскольку заболевание является наиболее распространенной разновидностью, а также от него нет вакцины, то оно признано одним из наиболее приоритетных в диагностике. Именно поэтому во всех государственных клиниках анализ крови на гепатит С бесплатный. При себе достаточно иметь лишь направление от лечащего врача на сдачу анализа.
В поисках, где сдать анализ на гепатит, пациенты часто пользуются услугами частных клиник и лабораторий. Не стоит не доверять частным лабораториям, поскольку зачастую именно такие диагностические центры имеют более мощное оборудование, нежели государственные учреждения. Поэтому результаты современных лабораторий могут не просто не отличаться, а даже быть более точными, нежели результаты в государственных лабораториях. Некоторые категории пациентов специально сдают кровь на гепатит несколько раз в различных центрах, чтобы сравнить результаты анализа крови на гепатит и избежать ложного диагноза.
Сразу вас успокоим, гепатит С излечим. На сегодняшний день, в мире уже появились препараты от гепатита С с эффективностью приближенной к 100% Современная фарм промышленность создала лекарства, которые практически не имеют побочных эффектов. Многие пациенты получают первые результаты в виде облегчения симптомов и снижения вирусной нагрузки уже через неделю приёма. Подробнее о индийских дженериках от гепатита с читайте в нашей отдельной статье.
На рынке компаний по перевозке индийского лекарства от гепатита С «GalaxyRus (Galaxy Super Speciality)» отлично зарекомендовала себя. Данная компания успешно помогает людям излечиться от недуга больше 2-х лет. Отзывы и видео довольных пациентов вы можете посмотреть здесь. На их счету более 4000 людей, которые выздоровели благодаря купленным препаратам. Не откладывайте свое здоровье в долгий ящик, перейдите на сайт www.galaxyrus.com или позвоните по номеру 8-800-3500-695 , + 7 (495) 369 00 95.
Подготовка к сдаче анализов
На результаты анализов могут повлиять следующие факторы: прием лекарственных средств, прием пищи, перегрузки организма, как моральные, так и физические, употребление алкоголя, табакокурение, физиотерапевтические процедуры, время забора крови. Все выше перечисленные показатели могут сделать так, что норма уже не будет соблюдаться и появятся отклонения, которые по сути таковыми не являются. Поэтому перед обследованием пациента врач расскажет, какие анализы надо сдать и как к ним подготовиться. Можно привести для примера общие правила подготовки к анализу на гепатит С:
- нужно сдать кровь утром, с 8 до 11 часов;
- в день забора крови не курить и не нервничать;
- за восемь часов – не пить, за четырнадцать часов – не есть;
- сказать врачу о приеме каких-либо лекарственных средства и при необходимости прекратить их прием на время;
- исключить алкоголь любой крепости за пару дней до того, как сдают кровь.
Алгоритм и порядок сдачи анализов
Для того, чтобы определить наличие заболевания, необходимо сделать ряд диагностических процедур:
- общий анализ крови при гепатите С;
- биохимический анализ крови при гепатите на активность трансаминаз;
- полимеразно-цепную реакцию на наличие рнк вируса гепатита С;
- при обнаружении возбудителя делается анализ на генотип гепатита;
- ультразвуковое исследование печени может дополнительно подтвердить наличие поражений паренхимы.
Анти-HCV анализ, ИФА
Анти-HCV – это анализ на наличие иммуноглобулинов к вирусным белкам. Если анализ на антитела показывает положительный результат, то это свидетельствует о заражении человека гепатовирусом или ранее перенесенном заболевании. Специфические иммуноглобулины начинают появляться как реакция организма на белок ядра гепатовируса и фрагменты его генома. Первые антитела в большинстве случаев появляются в первые три-шесть месяцев заражения вирусом, но в редких случаях они не попадают в кровь более года.
Иммуноферментный анализ длительное время был и остается одним из основных диагностических способов определения возбудителя в организме человека. Анализ достаточно высокочувствителен и дает возможность в 95 процентах случаев обнаружить хроническую форму течения заболевания. Выполняется несколько дней. Но, тем не менее, несмотря на высокую информативность анализа, существует риск получить ложный результат – как положительный, так и отрицательный. Например, пациенты, у которых заболевание находится в острой стадии, получают правильный ответ лишь в среднем в 60 процентах случаев. Это происходит из-за того, что антитела в среднем появляются в течение четырех-пяти месяцев от заражения, поэтому до этого времени ИФА будет показывать отрицательный результат. Ложноотрицательные реакции будут наблюдаться у тех пациентов, которые лечатся от сифилиса, онкологического заболевания или страдают аутоиммунными патологиями. В этом случае чувствительность колеблется в диапазоне 50-95 процентов. В восьми процентах ИФА у ВИЧ инфицированных также получается ложноположительный результат. Поэтому можно утверждать, что погрешности ИФА не позволяют точно поставить диагноз гепатит.
Показатель | Значение |
IgM+, core IgG+, (NS и IgG)-, RNA (=РНК) HCV+ | Острая форма заболевания |
IgM+, core IgG+, (NS и IgG)+, RNA (=РНК) HCV+ | Хроническая форма |
IgM-, core IgG+, (NS и IgG)+, RNA (=РНК) HCV- | Латентная фаза |
IgM-, core IgG+, (NS и IgG)+/-, RNA (=РНК) HCV- | Выздоровление пациента после недуга |
Пцр анализ крови на выявление РНК вируса
Этот анализ позволяет непосредственно увидеть присутствие генетического материала вируса в крови. Анализ основывается на оценке качественных и количественных показателей и выполняется до семи дней. Качественный тест показывает лишь наличие вируса в крови, поэтому результат может быть либо однозначно положительный, либо однозначно отрицательный. Норма для здорового человека, когда в выписке стоит пометка «не обнаружено», т.е. тест отрицательный. Количественный тест позволяет определить концентрацию вируса гепатита С в крови, так называемую вирусную нагрузку. Обычно такой тест делают через три месяца, если предыдущий тест показал наличие гепатовируса в организме.
Расшифровка анализа
Показатель | Значение |
200 копий/мл = 400 МЕ/мл | Вирус не обнаруживается либо его количество настолько мало, что не дает возможности его диагностировать |
<1.5*10^3 МЕ/мл | Возбудитель обнаружен, но его концентрация в крови слишком мала |
< 4*10^6 МЕ/мл | Вирус обнаружен, но прогноз течения недуга благоприятный |
>4*10^6 МЕ/мл | Высокая концентрация вируса |
>2*10^8 МЕ/мл | Концентрация является наивысшей из определяемой |
Биохимический анализ(АЛТ, билирубин)
Биохимия крови – важная часть общего исследования. По наличию разнообразных микроэлементов в человеческой крови, уже через несколько дней анализ позволяет определить состояние здоровья. Для оценки гепатита С важно получить данные по содержанию аланинаминотрансферазы, астаспартатаминовой трансферазы, билирубина, гамма-глутамилтранспептидазы, глюкозы, ферритина, альбумина, общего белка и белковых фракций, креатинина.
Расшифровку этих основных маркеров представляет следующая таблица
Показатель | Норма | Характеристика |
АЛТ | 0,1-0,68 мкмоль/л | Показатели повышены при гепатите в острой стадии и при разрушении печени, а снижение показателей указывает на развитие цирроза |
АСТ | 0,1-0,45 мкмоль/л | |
Билирубин | До 20 мкмоль/л | Повышение билирубина указывает на желтуху – основной признак гепатита С в хронической стадии |
ГГТ | У женщин – 6-42 Ед/л, У мужчин – 10-71 Ед/л | Показатель повышается при развитии цирроза печени |
При острой форме
При острой форме заболевания, когда вирус гепатита только попал в организм человека, и проходит период инкубации, симптоматика не проявляется не только со стороны здоровья пациента, но не видно изменений и в картине лабораторных исследований. Это связано с тем, что вирус достаточно долго появляется в крови. Например, в среднем можно обнаружить генотип вируса только лишь через несколько месяцев. Показатели крови – маркеры гепатита, которые указывают на вирус.
При хронической форме
Хроническая форма течения заболевания характерна тем, что в ней появляются признаки наличия возбудителя и если сдавать анализ на вирус, то это подтверждается и результатами анализа. Например, повышение аминотрансферазы будет вызвано гибелью гепатоцитов, а уровень ГГТ будет существенно выше при циррозе. Зная это, врачи делают несколько анализов и при подозрении на возможное заражение анализы на гепатит С повторяют через несколько месяцев.
Дополнительные тесты, которые может назначить врач
Обычно врач может назначить ультразвуковое исследование. Узи помогает выявить увеличение размеров печени и места, пораженные вирусом. Но наиболее точные результаты даст единственный анализ – он называется биопсия. Это забор специальной иглой образцов гепатоцитов. Пациентов пугает это исследование, и они хотят знать сколько делается биопсия, больно ли проводится процедура. Биопсия проводится довольно быстро, под спинальной анестезией, ее результаты укажут на изменения в самой печени, что подтвердит или опровергнет подозрения.
Ошибка в диагностике и что такое «ложноположительный» результат анализа?
Ложноположительный анализ появляется даже у здорового человека. Что это значит? Это означает, что у человека определяется в крови присутствие антител к гепатиту С. При этом такой анализ чаще всего получается методом ИФА – наиболее распространенным методов, но и наиболее «грешным». Ложноположительный анализ можно получить в следующих случаях:
- при аутоиммунных заболеваниях:
- при опухолях;
- при заражении другими тяжелыми инфекциями;
- если есть беременность.
Ложноположительный анализ может возникнуть и в результате человеческого фактора, профессиональной недобросовестности, нарушении техники проведения анализа. В данном случае приходится переделывать анализ.
К сожалению, выпуск препарата о котором говорится в видео в России так и не начат. но уже сейчас его можно заказать из Индии, подробнее читайте об этом в нашей статье «Дженерики от гепатита с»
Как убедиться в достоверности исследования?
Для того, чтобы точно узнать, качественная ли диагностика гепатита С, можно поступить двумя способами:
- сдать анализы в нескольких лабораториях и сравнить результаты анализов крови при гепатит С с расшифровкой. Наиболее информативным будет сравнение государственной лаборатории и частной. Если результаты не внушают доверия, можно провести еще несколько анализов в разных клиниках. Всегда нужно помнить о человеческом факторе, а в случае, если получен положительный анализ на гепатит С, лучше перестраховаться. Также стоит принять во внимание, что лабораторная диагностика гепатита С может быть не точной, если есть беременность;
- если пациент доверяет клинике полностью, он может сделать анализ повторно позже. Как правило, это назначают и врачи, если результаты анализа на гепатит С положительны. Если они отрицательны через три месяца, также можно подозревать человеческий фактор или другие патологии, благодаря которым сдвинулась норма показателей. После этого нужно сделать анализ крови еще раз.
Определение генотипа вируса
Определение генотипа вируса чрезвычайно важно для пациента. Анализ проводится на основе взятой венозной крови методом полимеразно-цепной реакции. От того, какой вирус обнаружен, зависит план лечения заболевания. Известно, что генотип 1б в девяноста процентах случаев приведет к развитию хронической формы заболевания, а вот генотип 2а и генотип 3a – лишь в половине случаев. Также стоит отметить, что генотип 1b протекает наиболее тяжело – после такого поражения высок риск развития карциномы. Поэтому определение генотипа необходимо для дальнейшей терапии и прогноза заболевания.
Чтобы диагностировать заболевание, необходимо сдать анализы крови на гепатит С с расшифровкой, после чего врач сравнит полученные показатели с референсными значениями.
Источник