Серологическая диагностика вирусных гепатитов маркеры
В диагностике гепатитов вирусного происхождения решающее значение имеют данные лабораторных исследований. Многие заболевания печени способны протекать без выраженных симптомов, да и добиться от больных честного анамнеза достаточно тяжело. Поэтому для того, чтобы дифференцировать их с другой патологией, необходимы объективные критерии. Маркеры позволяют не только подтвердить наличие инфекции, но судить о тяжести, что важно для выбора тактики лечения. Далее мы разберем эту тему подробней.
Диагностика вирусных гепатитов
Я часто сталкиваюсь с бессимптомным течением вирусных гепатитов, а ведь именно от своевременного выявления заболевания зависит успех лечения. Да, зачастую лабораторные тесты по итогу обходятся в значимую сумму, но, поверьте, это дешевле, чем попытка купирования осложнений на терминальных стадиях.
При обращении к врачу (после сбора жалоб, анамнеза) вас попросят пройти какие-то минимальные обследования (общий и биохимический анализы крови, мочи, кала + УЗИ органов брюшной полости). Обычно для экономии времени, которое может иметь клиническое значение, одновременно назначают определение маркеров на гепатит.
Для оценки хронических гепатитов мне в обязательном порядке необходимо знать этиологию (тип возбудителя) и активность патологического процесса. Выявленные маркеры также помогают установить фазу развития заболевания (репликация/интеграция), которая лежит в основе показаний для назначения препаратов с противовирусной активностью.
В традиционном понимании основные серологические тесты на гепатит проводятся такими методами:
- иммунная электронная микроскопия (ИЭМ) – обнаружение вирионов в фекалиях;
- иммуноферментный анализ (ИФА) – определение иммуноглобулинов (антитела, Ig) к вирусу;
- полимеразная цепная реакция (ПЦР) – выявление РНК или ДНК возбудителя (собственно генетический материал);
Клинический случай
В моей практике был такой клинический случай. Больной, 48 лет, обратился с жалобами на тяжесть в правом подреберье, быструю утомляемость и рвоту. Ухудшение нынешнего состояния связывает с инцидентом чрезмерного употреблением спиртных напитков на празднике.
При осмотре: сосудистые «звездочки» (телеангиоэктазии) в области живота, увеличение печени при пальпации. Лабораторно: повышение активности ферментов печени (АЛТ, АСТ, ЩФ). Был направлен на определение маркеров вирусных гепатитов, по результатам которых обнаружены РНК к HCV, IgM + IgG к HCV.
На основании всех данных был поставлен диагноз «Хронический вирусный гепатит С, стадия обострения». Назначены инфузии дезинтоксикационных растворов, после чего пациента выписали с улучшением. Рекомендован курс противовирусной терапии, от которой он отказался.
Маркеры энтеральных форм
Я хочу подчеркнуть, что определяемые маркеры действительно играют решающую роль в постановке диагноза, однако важна комплексная оценка данных. Поэтому следует быть максимально откровенным с врачом.
К группе энтеральных (то есть с фекально-оральным путем передачи) вирусных гепатитов относят типы А («Болезнь Боткина») и Е. Их достаточно тяжело пропустить, так как заболевание в типичном случае протекает остро, заканчиваясь выздоровлением. Более того, многие мои пациенты даже не знали, что болели ими (часто в детском возрасте), когда мы внезапно находим в крови антитела.
К гепатиту А
При инфицировании вирусом типа А я не во всех случаях настаиваю на скрупулезной лабораторной диагностике. И это вполне резонно, если учитывать особенности его течения. Маркеры гепатитов при этом последовательно появляются и исчезают, однако некоторые антитела сохраняются у переболевшего в течение многих лет (в том числе пожизненно).
К ним относят следующие показатели:
- anti-hav IgM;
- anti-hav IgG;
- анализ кала у детей (ИЭМ);
- РНК HAV;
Условно достаточная концентрация иммуноглобулинов, обеспечивающих защиту от заболевания, (после его случая или вакцинации) – 22-30 МЕ/л.
К гепатиту Е
Подтверждение гепатита Е чаще основано на данных анамнеза и исключении маркеров других типов вируса.
Однако для расследования вспышек заболевания или уточнения особенностей могут потребоваться следующие показатели:
- anti-hev IgM;
- общие иммуноглобулины IgM + IgG;
- РНК HEV;
В педиатрической практике все еще используют ИЭМ для нахождения вирусных единиц в кале, но тест не особо информативен.
Маркеры парентеральных форм
Более серьезную угрозу представляют вирусы типа В, С и D, передающиеся через биологические жидкости (кровь, сперма, влагалищные выделения + отдельно стоит рассматривать инфицирование от матери ребенка в родах). Подробные серологические тесты в этом случае крайне важны.
К гепатиту В и D
Наиболее важным маркером инфекции считаются антигены вируса (Ag), коих, кстати говоря, несколько видов. Их можно обнаружить со 2(5) недели от момента заражения. Но при остром течении возможно их временное отсутствие («окна»). Тогда главным показателем становятся антитела (Ig).
Почему же в этот раздел я включила и вирусный гепатит D? Все предельно просто – он определяется только у людей, инфицированных типом В.
Таким образом, важны следующие маркеры вирусных гепатитов:
- Для типа В:
- антигены – HBsAg, HBeAg, HBcAg:
- антитела – IgM к HBcAg, IgG к HBeAg, IgG к HBsAg (анти-HBe, анти-HBc);
- ДНК – DNA HBV;
- Для типа D:
- IgM к HDV;
- IgG к HDV;
- РНК HDV;
Нельзя исключать «скрытое» течение ВГВ-инфекции. В этом случае следует искать ДНК методом ПЦР в гепатоцитах (после биопсии).
К гепатиту С
Рутинным маркером инфицированности типом С я считаю антитела к вирусу (анти-ВГС). Но часто они не выявляются, поэтому мы рекомендуем пользоваться услугами лабораторий с новейшими тест-системами («SMARTube», 4-го поколения с C-, NS3-, NS4-, NS5-белки).
Определяют следующие показатели:
- IgM + IgG к HCV;
- IgM + IgG к HCV, РНК HCV, раздельное определение антител к белкам;
Не забывайте, что вирус типа С крайне опасен переходом воспаления в цирроз/рак. Иногда нужно дополнительно искать мутации в его геноме методом ПЦП с использованием особыми реагентами – RFLP, SSCP, LiPA.
Таблица с расшифровкой результатов
Чтобы вам было легче запомнить, я оформила расшифровку маркеров в виде следующей таблицы:
Тип вируса | Вид маркера | Расшифровка |
А | anti-hav IgM | показатель острой фазы воспаления, нарастает с первых дней, циркулируя в крови до 5-6 месяцев |
anti-hav IgG; | так называемые «анамнестические» антитела, указывающее на выздоровление или перенесенное заболевание, создают пожизненный иммунитет | |
анализ кала у детей (ИЭМ) | для оценки заразности | |
РНК HAV | важен для определения генотипа возбудителя (эпидрасследование вспышек, нетипичное течение, выявление источника инфекции) | |
anti-hev IgM | тут и в дальнейшем – острофазовый показатель, свидетельствует о начале заболевания в активной форме | |
общие иммуноглобулины IgM + IgG | выявление больных в период выздоровления | |
РНК HEV | в этом случае более информативно исследование не крови, а возможного источника инфицирования, например, сточных вод. Часты случаи, когда этот маркер попросту не определяется у anti-hev IgM-положительных пациентов | |
В | HBsAg, HBeAg, HBcAg | HBsAg – базовый маркер иинфицированности, который можно определить еще в инкубационном периоде и до 5-6 месяцев; HBeAg – отражает фазу вирусемии (циркуляция возбудителей в крови) и репликацию (активное размножение); HBcAg (сердцевинный антиген, «cor») – выявляется только в клетках печени после гистологи биоптатов; |
анти-HBe | отражает замедление репликации вируса, но косвенно говорит о хронизации процесса | |
анти-HBs | находят в случае выведения инфекционного агента из организма (полное выздоровление) и/или после введения вакцины | |
анти-HBc (суммарные) | помогают найти «скрытую» и/или перенесенную инфекцию | |
анти-HBc IgM | маркер обострения | |
D (только при условии коинфекции с гепатитом В) | IgM к HDV и РНК HDV | выявляют в желтушный период |
IgG к HDV | нарастают спустя 1-2 месяца с появления желтухи, но постепенно полностью исчезает | |
С | IgM + IgG к HCV | для постановки диагноза |
IgM + IgG к HCV, РНК HCV, раздельное определение антител к белкам | в острой фазе воспаления, мониторинг и прогнозирование | |
IgM + IgG к HCV | скрининг беременных, доноров крови и людей с повышенным риском |
Если вы заметили, что результаты анализов показали одновременное присутствие таких пар — HBsAg + Ig G к HBsAg, HBeAg + Ig G к HBeAg, — исследование было проведено неправильно. Они не могут сосуществовать вместе.
Совет специалиста
Учитывая все возрастающую распространенность хронических форм вирусных гепатитов, не отказывайтесь, пожалуйста, от назначения этих тестов. В первую очередь это поможет вам своевременно начать терапию. При возникновении любых вопросов касательно анализов, обращайтесь к врачу, так как лабораторные диагносты НЕ имеют права на трактовку результатов или постановку диагноза.
Источник
Вирусный гепатит – тяжелая патология печени, которая приводит к различным осложнениям – фиброз, жировая инфильтрация, циррозное поражение. Лечебный эффект напрямую обусловлен своевременностью терапии, поэтому важно как можно раньше диагностировать опасное заболевание.
Маркеры гепатитов – одно из исследований, которое позволяет диагностировать недуг на ранней стадии развития. Оно базируется на выявлении специфических антигенов и антител, которые находятся в сыворотке крови.
Маркеры и их назначение
Особенность вирусных гепатитов в том, что на фоне раннего развития они не проявляются негативной симптоматикой. Когда проявляются симптомы, с которыми пациент идет к доктору, в большинстве случаев уже имеются функциональные нарушения печени.
Маркеры вирусного гепатита B и C – это специфические антигены и антитела в крови. Их определение в сыворотке крови подтверждает наличие патологии. Их можно обнаружить на фоне раннего развития болезни.
Чтобы выявить специфические и серологические маркеры к вирусным гепатитам, в медицинской практике используют разные исследования:
- Иммунохимическая реакция крови посредством ИФА.
- Реакция иммунной системы на вирусные инфекции.
- Специализированное скрининговое исследование.
- Иммунологические методики.
В зависимости от целей диагностики врачи назначают два вида исследований – специфический и неспецифический.
Специфическое исследование
Анализ на маркеры гепатита B и C позволяет выявить вид вирусной инфекции, который стал причиной заболевания. Специфическими маркерами выступают антигены гепатитов. Под антигенами понимают отдельные части вируса.
Когда они попадают в благоприятную среду – человеческий организм, то активно участвуют в формировании новых вирусных клеток, что приводит к быстрому прогрессированию патологии.
Неспецифическое исследование
К этому типу маркеров вирусных гепатитов относят антитела к имеющимся антигенам в крови больного. Такой вариант диагностики базируется на возможности организма продуцировать антитела – клетки иммунной системы, которые ориентированы на борьбу с патогенным возбудителем.
Если было выявлено наличие антител к антигенам, то это значит, что имеются патологические процессы в печени.
Маркеры разных видов гепатита
На фоне лабораторной диагностики вирусных гепатитов определение маркеров – один из достоверных способов, позволяющих на ранней стадии выявить болезнь.
Гепатит B
Тяжелое заболевание. На ранней стадии отсутствуют негативные симптомы, морфологические признаки на УЗИ; основной путь передачи инфекции – парентеральный. Однако с помощью маркеров на ранней стадии можно диагностировать заболевание.
В таблице представлены маркеры, которые присутствуют в крови больного на фоне заражения гепатитом B:
Антитела вирусной болезни | HBeAg и HBsAg |
Антитела к антигенам | анти-HBs, анти-HBe, анти-HBc |
С помощью алгоритма иммуноферментного исследования не только подтверждают отсутствие/наличие заболевания, но и выявляют стадию патологического процесса. Благодаря этому можно составить более точный прогноз, назначить результативную терапию.
Гепатит C
Среди всех гепатитов считается наиболее опасным. Согласно статистике, в мире более 150 млн людей, имеющих патологию в анамнезе.
Каждый год умирает свыше 350 тыс. человек.
Плохая статистика обусловлена периодом инкубации недуга – отсутствием симптоматики либо их незначительным проявлением.
Выявить гепатит в организме можно посредством таких маркеров:
- HCV-RNA. Присутствует наличие в крови и печеночных тканях, когда патология находится в острой стадии. Определяется даже сразу после заражения.
- Anti-HCV total (совокупные антитела). В крови можно диагностировать через 6 недель после инфицирования. При положительном результате говорят о вирусном агенте в организме. Обнаруживаются даже после полного излечения.
- Anti-HCV core IgG. В крови больного определяются только спустя 11 недель после инфицирования. Наличие IgG свидетельствует о хронической форме патологии.
- Anti-NS3. Всегда выявляются в крови на фоне острого течения патологического процесса.
Маркеры anti-NS4 и anti-NS5 выявляются только в запущенных случаях, когда наблюдаются функциональные поражения печени. После терапевтического курса их количество уменьшается – это говорит об эффективности проводимой терапии.
Болезнь Боткина и гепатит E
Болезнь Боткина – патология, характеризующаяся острым течением.
Распространенная причина инфицирования – несоблюдение элементарных правил гигиены.
К характерной симптоматике относят:
- Пожелтение кожного покрова (не всегда, но в большинстве картин).
- Нарушение работы железы.
- Увеличение температуры тела.
- Боль в правом боку.
Какой-либо особенной подготовки к исследованию не проводится, желательно сдавать кровь натощак. Болезнь отличается быстрым течением, отсутствием тяжелых осложнений, простотой терапии.
При исследовании на болезнь Боткина определяют такие маркеры:
- РНК вирусного возбудителя. Признак того, что вирус стремительно размножается.
- Свидетельствует о самом факте вирусного заражения.
- Анти-ВГА IgG. Или патология в анамнезе, либо наличие иммунитета к болезни Боткина.
- Анти-ВГА IgM – острый вирусный процесс.
Гепатит E получил широкое распространение в странах с жарким климатом. Причина – антисанитарные условия проживания людей. Приводит к нарушению функциональности тракта пищеварения, боли в области правого ребра. Расшифровывать маркеры гепатита E должен врач.
В таблице представлены основы расшифровки:
Маркер | Описание |
РНК | Положительный результат – следствие активного распространения возбудителя |
Ag | Подтверждение гепатита E |
Анти-ВГЕ IgM | Острый патологический процесс |
Анти-ВГЕ IgG | Перенесенное заболевание, наличие иммунитета |
Гепатиты D и G
Под разновидностью D понимают антропонозную инфекцию, диагностируют только совместно с гепатитом типа B.
Симптоматика этих видов похожа, однако когда присоединяется форма D, возрастают риски скопления свободной жидкости в брюшной полости, выраженной отечности.
Маркеры гепатита с расшифровкой анализа:
- РНК – активное распространение инфекционного процесса.
- Анти-ВГД IgM – будет означать острое течение.
- HDAg – наличие заболевания, если результат отрицательный – вируса нет.
- Анти-ВГД IgG – пациент ранее болел, есть иммунитет.
Разновидность G возникает только совместно с другими гепатитами в анамнезе человека – при формах B, C, D. Так как симптоматика проявляется только в исключительных случаях, чаще всего протекает в хронической форме.
ИФА позволяет выявить наличие вируса, а ПЦР показывает количественные характеристики. Для диагностики недуга используется несколько методов в совокупности. Прогноз благоприятный при своевременном обнаружении, усугубляется, если присутствует алкогольное/аутоиммунное поражение печени, ВИЧ-инфекция, СПИД и др. тяжелые заболевания.
Стоимость анализов
При подозрении на гепатит пациент получает рекомендации от доктора по поводу диагностики; анализы можно сделать в частных лабораториях, например, Инвитро, Гемотест и др.
Примерная цена исследований:
- Анализ на определение болезни – выявление anti-HAV IgG – качественное исследование – 600 рублей, срочно 1000 рублей. При качественном анализе результат отрицательный или положительный.
- Количественное исследование на гепатит B путем определения anti-HBs 800 рублей (в результате будет конкретная цифра).
- Диагностика гепатита C обойдется в 1500 рублей (два исследования).
- Качественное ПЦР исследование гепатита B стоит около 1000 рублей, а количественное 4000 рублей. Ультрачувствительный качественный анализ – 3000 рублей, а количественный 3800 рублей.
- Исследование на предмет устойчивости возбудителя к средствам противовирусного свойства – 12 000 рублей.
При выявлении заболевания дополнительно назначаются другие исследования, чтобы оценить состояние печени. Принцип лечения подразумевает комбинированную схему, в которую входят гепатопротекторы (средства улучшают работу печени), ферменты, противовирусные препараты, антибиотики (если выявлен инфекционный процесс) и др. лекарства.
Источник
Если нет достаточных клинических и эпидемиологических данных для предварительного предположения этиологии гепатита, на первом этапе исследуются следующие серологические маркеры:
- HAVAb, IgM (острая форма гепатита А)
- HEVAb, IgM (острая форма гепатита Е)
- HBsAg, HBcAb (гепатит В)
- HCVAb (гепатит С)
При положительной реакции на HВsAg и (или) суммарные НВсorAb необходима дальнейшая уточняющая диагностика стадии инфекционного процесса, тестирование:
- HBcAb, IgM
- HBsAb
- HВeAg
- HBeAb
- HBV, DNA
Длительная персистенция НВсorAb, при отрицательных тестах HВsAg и НВsAb может являться единственным маркером хронической инфекции мутантным штаммом вируса гепатита В.
Диагностика ко-инфекции или суперинфекции вирусом гепатита Дельта:
- HDVAg
- HDVAb
- HDVAb, IgM.
При положительной реакции на HCVAb, необходимо дополнительное исследование:
- HCVAb, IgM
- HCVAb белковый спектр в ИФА или иммуноблоте
- HCV, RNA
Для оценки прогноза развития гепатита С и ответа на интерферонотерапию рекомендуем проводить типирование HCV.
Диагностические маркеры вирусных гепатитов и клиническая интерпретация полученных результатов
Маркер | Определение | Клиническая интерпретация |
Маркеры гепатита А | ||
HAV, RNA | RNA вируса гепатита А | Обнаруживаются в кале в первые дни после заражения. |
HAVAb, IgG/IgM | Суммарные антитела против белков вируса гепатита А | Свидетельствуют об острой инфекции или перенесенном гепатите А |
HAVAb, IgM | Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита А | Свидетельствуют об острой инфекции вирусом гепатита А |
Маркеры гепатита E | ||
HЕVAb, IgG/IgM | Суммарные антитела против белков вируса гепатита Е | Свидетельствуют об острой инфекции или перенесенном гепатите Е |
HEVAb, IgM | Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита Е | Свидетельствуют об острой инфекции вирусом гепатита Е |
Маркеры гепатита В | ||
HBsAg | Поверхностный протеин вируса гепатита В | Ранний маркер острого гепатита В (появляется через 3-5 недель после заражения), присутствует при хронической, в т.ч. бессимптомной инфекции |
НВsAb | Антитела против HBsAg | Перенесенный гепатит В, наличие защитного иммунитета, появляются также после вакцинации |
HBcAb | Суммарные антитела (IgM и IgG) против ядерного cor-белка вируса гепатита В (HВcAg в сыворотке практически не выявляется) | Маркер контакта с вирусом и острая, хроническая или перенесенная инфекция. Важен в диагностике НВs – негативного гепатита. Антитела к НBc не являются защитными |
HBcAb, IgM | Ранние антитела класса IgM против HBcAg | Маркер острой инфекции и продолжающейся репликации вируса |
HBeAg | Внутренний протеин вируса, кодируется общим с cor-белком геном вируса, но в отличии от HBcAg, HBeAg хорошо растворим и выявляется в сыворотке с момента репликации | Маркер репликации вируса, концентрация HBeAg в сыворотке прямо коррелирует с уровнем вирусемии. Один из важных показателей для назначения терапии препаратами интерферона |
HBeAb | Антитела против HBeAg | Маркер закончившейся активной репликации вируса. Антитела к HBeAg не являются защитными |
HBV, DNA | DNA вируса, прямое определение в ПЦР или реакции молекулярной гибридизации | Свидетельствует об активном размножении вируса, и высокой инфекционности. Важен для диагностики мутантных форм гепатита В. Один из основных показателей для назначения терапии препаратами интерферона, маркер эффективности терапии |
Маркеры гепатита D (дельта) | ||
HDV, RNA | RNA вируса гепатита Дельта | Наличие HDV RNA свидетельствует об активности процесса и коррелирует с максимумом воспалительно-некротических изменений в печени и экспрессией HDV RNA в тканях органа. Тест полезен при проведении противовирусной терапии |
HDVAg | Антиген (специфический белок) вируса Дельта | Маркер репликации и острой инфекции вирусом Дельта |
HDVAb, IgG/IgM | Суммарные антитела против белков вируса гепатита Дельта | Маркер контакта с вирусом Дельта (острая или хроническая коинфекция) |
HDVAb, IgM | Ранние антитела класса М против белков вируса гепатита Дельта | Маркер острой инфекции вирусом Дельта |
Маркеры гепатита С | ||
HСVAb, IgG/IgM | Суммарные антитела против белков вируса гепатита C | Маркер контакта с вирусом C (острая, хроническая или перенесенная инфекция) |
HCVAb, IgM | Ранние антитела класса М против белков (core или NS 4) вируса гепатита C | Маркер острой инфекции вирусом гепатита С. Показатель для назначения терапии препаратами интерферона |
HCV Western blot подтверждающий | Суммарные антитела к отдельным поверхностным и внутренним белкам вируса гепатита С: core, E1, E2, NS3, NS4, NS5 | Подтверждающий тест. Дифференциальная диагностика стадий инфекции вирусом гепатита С и определение целесообразности терапии препаратами интерферона |
HСV, RNA, + типирование РНК вируса | РНК вируса, прямое определение методом ПЦР или реакции молекулярной гибридизации | Свидетельствует об активной репликации вируса и высокой вирулентности. Важен для диагностики мутантных форм гепатита С. Один из основных показателей для назначения терапии препаратами интерферона, маркер эффективности терапии. |
Маркеры гепатита G | ||
HGVAb, IgG | Антитела класса против белков вируса гепатита G | Острая инфекция или перенесенный гепатит G |
HGVAb, IgM | Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита G | Острая инфекция вирусом гепатита G |
Рекомендуемый объем предвакцинального обследования:
Перед проведением вакцинации к вирусу гепатиту В необходимо провести исследование:
- HВsAg
- HВsAb
- НВсAb
Выявление высокого титра защитных антител: HВsAb свидетельствуют об уже перенесенной инфекции, наличии устойчивого иммунитета и об отсутствии необходимости в вакцинации. Положительные реакции на HВsAg, и НВсAb свидетельствующие о наличии инфекции требуют индивидуального решения о целесообразности введения вакцины.
Источник: USAID, Ministerul Sanatatii al Republicii Moldova. Diagnosticul de laborator al Hepatitelor virale B, C si D. Instructiuni metodice, 2007
В случае отрицательных реакций при выявлении маркеров вирусных гепатитов А, В, С и D следует исключить гепатиты, вызванные вирусами Эпштейна-Барр и цитомегалии:
- CMV, IgG
- CMV, IgM
- EBV Early Antigen, IgG
- EBV Nuclear Antigen, IgG
- EBV VCA (капсидный антиген), IgG
- Epstein Barr Virus VCA (капсидный антиген), IgM
Источник