Собрать анализ на гепатит с

Гепатит С переходит из острой фазы в хроническую в 80% случаев. Репликация болезнетворных вирусов в функциональных клетках печени ведет к дисфункции органа. Это обусловлено тем, что паренхиматозная ткань заменяется соединительной. В результате анамнез больного дополняется кровотечениями в ЖКТ, интоксикацией организма, проблемами со свертываемостью крови. Поэтому чем раньше будут диагностированы патологические изменения, тем больше у пациента шансов на выздоровление. Анализ ПЦР на гепатит С считается наиболее точным методом исследования.

Этот диагностический метод разрешено проводить спустя несколько дней после заражения. Полимеразная цепная реакция позволяет достоверно определить генотип и концентрацию вируса в крови. Чтобы сделать анализ, у пациента берут биологический материал, в котором может присутствовать РНК возбудителя.

ПЦР на гепатит С осуществляют в три этапа:

Качественный анализ – с его помощью определяют генетический материал возбудителя.
Количественное исследование – таким образом выявляют вирусную нагрузку.
Генотипирование – на этой стадии врач узнает разновидность заболевания.

Методику разработали около 30 лет назад. Ее применяют для диагностики многих инфекционных заболеваний. ПЦР позволяет обнаружить уникальный генетический материал. Для этого используют праймеры. Так называют короткие нити РНК, которые присоединяют к началу гена.

Анализ ПЦР

В результате количество фрагментов болезнетворного вируса многократно увеличивается. Каждая фаза требует особого температурного режима и определенного промежутка времени. Молекула ДНК формируется в течение 3 минут. Амплификация включает в себя около 30 циклов. ПЦР делают в лаборатории посредством специального оборудования.

Показания к назначению

Сдача анализа ПЦР может быть обусловлена наличием клинических симптомов гепатита С. Процедура показана людям, которые:

контактировали с инфицированным человеком;
страдают от острых и хронических заболеваний печени;
проходят лечение от патологических изменений в паренхиматозной ткани;
входят в группу риска;
являются донорами крови и ее компонентов.

ПЦР осуществляют не только при гепатите С. Анализ используют в медицине, биологии, криминалистике. Определение специфических показателей – этап, необходимый для подбора лекарственной схемы.

Преимущества анализа

В схему диагностического обследования включают иммунофлуоресцентный анализ и ПЦР. С помощью первого можно определить концентрацию иммуноглобулинов. Эти вещества вырабатываются защитным механизмом после проникновения болезнетворных вирусов в организм. В отличие от ПЦР ИФА не обладает эффективностью во время инкубационного периода. С помощью полимеразной цепной реакции гепатит С можно выявить в первые 7 дней после инфицирования.

Данное клиническое исследование обладает следующими характеристиками:

Минимальная вероятность ложного результата.
Высокая эффективность.
Специфичность.
Чувствительность.
Универсальность.
Автоматизация процесса.
Безопасность.
Скорость получения показателей.

Единственным минусом ПЦР является ее техническая сложность. Это связано с тем, что врачу необходимо подобрать правильный состав нуклеотидов, в функциях которых синтез ДНК. Из-за повышенной чувствительности метода возможно получение ложноположительного или ложноотрицательного результатов.

Чтобы добиться точности значимых показателей, биологический материал тщательно очищают от медикаментозных препаратов и белковых соединений. Для подтверждения результата требуется сравнение ранее проверенных образцов. К факторам, провоцирующим ошибку, причисляют:

Нарушение техники забора анализа

Нарушение техники забора анализа.
Изменения в последовательности фрагментов РНК.
Совпадение синтезируемых нуклеотидов и генов болезнетворных вирусов.

Вероятность получения ложного результата при гепатите С присутствует из-за невозможности определения генетической основы заболевания. ПЦР-диагностика позволяет напрямую выявить возбудителя. С помощью амплификации ДНК происходит обнаружение болезнетворных микроорганизмов в продуктах питания, воде и почве.

Ограничения, касающиеся данного метода, не уменьшают его эффективности и популярности. Клиническое исследование проводят регулярно. Таким образом врач может оценить эффективность принятых лечебных мер. Необходимость в этом возникает из-за того, что вирус гепатита С способен мутировать. Отсутствие положительного эффекта означает адаптацию вируса к применяемым лекарственным средствам.

Подготовка к сдаче

Для того чтобы провести полимеразную цепную реакцию у больного, страдающего от гепатита С, берут венозную кровь. Обычно для изучения требуется две порции биологического материала. Посредством одной делается непосредственно ПЦР, а другую направляют на иммуноферментный анализ.

Кровь для анализа ПЦР берут из вены

Подготовка имеет большое значение. Пациент сдает кровь на ПЦР утром на голодный желудок. За несколько дней до процедуры придется отказаться от вредных продуктов питания, спиртных напитков, никотина и наркотиков. Больному следует избегать половых контактов, чрезмерной физической и эмоциональной нагрузки. Бассейн и спортзал оказываются под запретом. Подготавливаться придется в любом случае.

Существуют особые указания относительно медикаментозных препаратов. Это касается антибиотиков и антидепрессантов. Женщины, у которых начались менструации, должны отсрочить сдачу анализа на гепатит С. Кольпоскопия также является поводом для отказа от процедуры.

Перечисленные правила довольно просты. Благодаря им, можно добиться максимальной достоверности данного диагностического метода. Расшифровывать результаты должен специалист. Самостоятельно интерпретировать их у пациента вряд ли получится.

Процесс сдачи анализа

ПЦР-диагностику осуществляют следующим образом:

Кровь помещают в термостат

Сначала забирают биологический материал. Кровь помещают в простерилизованные приспособления. Необходимый объем не превышает 1-1,5 мл. Держать кровь и ее компоненты следует не дольше 24 часов. Температура хранения не должна превышать 4 градусов по Цельсию.
После начинают клиническое исследование. Подготовленную кровь помещают в термостат вместе с амплификационной смесью. Обычно требуется не более 25 мл специального состава. Амплификация проводится в автоматическом режиме на протяжении нескольких часов.
Параллельно делают контрольные анализы. Для этого используют биологические материалы, взятые у здорового человека. Это поможет избежать ложных результатов.
Расшифровка и регистрация показателей. Генетический материал обнаруживают с помощью бромистого этидия. Благодаря специфическому воздействию, фрагменты ДНК высвечиваются. Наличие (отсутствие) вируса выявляют ориентируясь на данные таблицы.

Расшифровка результатов

Определить значение полученных показателей может только инфекционист и гепатолог. Анализ ПЦР вводят диагностический комплекс вместе с биохимическим исследованием крови, УЗИ, ИФА и биопсией. Диагноз ставят на основании всех результатов. Порядок расшифровки анализов зависит от этапа диагностического обследования.

Ультразвуковая диагностика

На первой стадии ПЦР положительным результатом теста считается обнаружение фрагментов ДНК болезнетворного вируса. При проведении количественного анализа определяют уровень вирусной нагрузки. Она может быть низкой (менее 8*10^5 МЕ/мл), средней (от 8*10^5 МЕ/мл), высокой (больше 2,4*10^7 МЕ/мл). Нормой (отрицательным результатом) считается отсутствие специфических антител и частиц вирусной РНК. На этапе генотипирования об инфекционном заражении свидетельствует РНК определенного генотипа.

При получении положительного результата больному назначают эффективную терапевтическую схему. При этом обязательно учитывают информацию о наличии вируса в крови, степени его активности и генотипе. Цена процедуры зависит от методики тестирования, вида биологического материала. К общей стоимости могут быть добавлены затраты за забор крови или других жидкостей. Последнее обусловлено тем, что возбудителя часто обнаруживают в урине, каловых массах и сперме.

Источник

Собрать анализ на гепатит с

Гепатит С – заболевание, которое долгое время протекает без видимых признаков, а на поздней стадии приводит к тяжелым, нередко необратимым последствиям. Чтобы подтвердить или опровергнуть присутствие вируса в организме, назначают различные виды анализов – ПЦР, ИФА, а также иные исследования. Все их объединяет биологический материал – венозная кровь. Не существует строгих правил подготовки к анализу на гепатит С, но есть общие рекомендации, которых следует придерживаться, чтобы получить предельно достоверный результат.

Правила подготовки за 3-5 дней

К анализу на гепатит С готовятся поэтапно в течение нескольких суток. В этот промежуток желательно исключить факторы, которые могут повлиять на физиологическое состояние, а также биохимические, гормональные и гематологические показатели.

Питание

Сдача крови на гепатит С обычно проводится в период с 8 до 11 утра натощак. Время выбрано для того, чтобы между процедурой и последним приемом пищи прошло не меньше 8 и не больше 14 часов.

Если человек принимает пищу в этот промежуток, результаты исследования будут искажены:

продукты с содержанием сахаров вызывают колебание глюкозы;
жирная пища провоцирует изменение мутности проб крови, повышает холестерин, калий, щелочную фосфатазу и триацилглицериды;
томаты, бананы, орехи повышают показатели серотонина;
кофе и чай вызывают скачок кортизола, изменение показателей эритроцитов и лейкоцитов, глюкозы.

Если период голода продолжается более 14 часов, анализы дадут результат, который невозможно будет сопоставить со значением нормы.

За сутки до исследования нужно отказаться от жирной и чрезмерно сладкой пищи.

Питание должно соответствовать обычному режиму. Для ужина накануне сдачи подойдет нежирный творог, диетическое мясо птицы, каши на воде, яблоки, макароны из твердых сортов пшеницы, яйца, хлеб, нежирная рыба, суп на легком овощном бульоне.

Ограничения не касаются чистой питьевой воды. Ее можно употреблять в привычном режиме.

Ограничение физической активности

Накануне анализа крови на гепатит С рекомендуется отказаться от физических перегрузок (в том числе, от секса), поскольку это вызывает гормональные и биохимические перестройки в организме. Активные нагрузки влияют на следующие показатели:

ферменты (креатинфосфокиназа, альдолаза, аспартатаминотрансфераза, лактатдегидрогеназа);
гормоны (тестостерон, лютеинизирующий гормон, андростендион).

За сутки до исследования на гепатит желательно отказаться от посещения бассейна и тренажерного зала.

Алкоголь

За 3-5 дней до анализа надо исключить алкоголь. Он оказывает следующее влияние на показатели крови:

снижает концентрацию эритроцитов, гемоглобина, тромбоцитов;
повышает вязкость крови и скорость оседания эритроцитов;
угнетает функцию печени и поджелудочной железы, за счет чего уровень сахара в лабораторных показателях снижается;
повышает образование молочной и уксусной кислоты;
повышает содержание азотистых веществ из-за усиленного распада белка;
вызывает сгущение крови и повышает ее свертываемость;
понижает концентрацию антител, создает картину, которая соответствует вирусному гепатиту и прочим инфекциям, аллергии, злокачественным опухолям, может вызвать ложноположительный результат;
снижает выработку гормонов щитовидной железы (Т3 и Т4) и надпочечников (кортизол, альдостерон, андрогенный гормон ДЭА, норадреналин).

Медикаменты

Прием лекарств – самый надежный способ исказить результаты анализа на гепатит и прочих лабораторных показателей. Препараты оказывают физико-химическое и фармакологическое влияние.

Физико-химическое, или прямое, влияние выражается в том, что действующие вещества вмешиваются в сам ход анализа. Например, тетрациклин, хинидин и другие препараты обладают свойствами флюоресценции. Витамины А и В2 повышают оптическую плотность раствора и тем самым искажают показатели билирубина.

Биологическое, или опосредованное, влияние выражается в том, что лекарства связываются с белками, повышают или подавляют их синтез, оказывают побочное действие на разные органы и системы, вызывают токсический эффект при передозировке, а также накапливаются в тканях. Их прием накануне анализа может спровоцировать ложноположительные и ложноотрицательные результаты. Такой эффект заметен при приеме седативных, снотворных, психотропных и других препаратов.

Лаборатории рекомендуют перед анализом прекратить прием лекарств и выждать примерно 4-5 периодов полувыведения препарата. В среднем перерыв составляет около 3 суток. После анализа прием препаратов возобновляется.

Если лекарства жизненно необходимы и их нельзя отменить, предупредите лечащего врача, чтобы тот учел погрешности, вносимые препаратом.

Что еще может повлиять на точность анализа

Биохимические свойства крови изменяются под действием самых разных факторов:

Курение. Изменяет секрецию некоторых биологически активных веществ. Рекомендуется отказ минимум за 60 мин. до анализа.
Инструментальные обследования, например, ректальные, биопсия, МРТ, УЗИ, рентген и т.д. Нужен недельный перерыв между процедурой и анализом.
Тепловые процедуры. Требуется суточный перерыв перед сдачей крови на анализ на гепатит С и приемом бани или сауны.
Менструации у женщин. Вызывают колебания гормональных показателей.
Диета. Скудное питание провоцирует скачок билирубина. Рекомендуется есть в привычном режиме, но исключить жирную пищу.

Эмоциональное состояние оказывает непосредственное влияние на на показатели. При психологическом напряжении повышается уровень гормонов, альбумина, глюкозы, холестерина, фибриногена. Чтобы справиться с невольным волнением, стоит прийти в лабораторию за 10-20 минут до взятия проб и немного отдохнуть. Тогда влияние факторов стресса будет минимальным.

Особенности забора крови

Для анализа на гепатит С подходит только венозная кровь. Взятие материала из пальца не практикуется: если конечности холодные или отекшие либо в них нарушено кровообращение, результат будет недостоверным.

Лаборант проводит пункцию вены стерильной иглой в локтевом сгибе. Если это по каким-либо причинам невозможно, прокол делается в венах кистей рук или берется сосуд выше большого пальца руки. У детей забор может быть выполнен из яремной, лобной или височной вены. При наличии шрама или гематомы в точке забора выбирается другое место.

Анализ на гепатит может проходить как в лаборатории, так и дома. Чтобы сэкономить время или исключить фактор волнения, следует поинтересоваться, выполняет ли лаборатория выездные исследования, и по возможности сдать кровь дома.

Анализ крови на гепатит проводится натощак. Чистить зубы или воспользоваться жевательной резинкой лучше после диагностики, так как это провоцирует скачок сахара. Перед пункцией исключите резкие движения.

Перед непосредственной сдачей необходимо несколько минут посидеть, восстановить глубокое дыхание, успокоиться.

Повторный анализ на гепатит C следует сдать в тех же условиях, что и в предыдущий раз (та же лаборатория, аналогичное время, забор из той же вены). Если анализ сделан в разных лабораториях и с разной подготовкой, это не покажет результат в динамике.

Когда будут готовы результаты

На продолжительность исследования влияет не только методика, но и расположение лаборатории. Например, если образцы отправляются в соседний крупный город, где проводится исследование, то результат задержится. В среднем диагностика гепатита выполняется в следующие сроки:

определение билирубина, АСТ, АЛТ, ГГТ – 1 день;
ПЦР количественный и генотипирование – 1 день;
антитела IgM к белкам вируса гепатита С – 2 дня;
ПЦР в качественном формате, ультрачувствительный тест – 4 дня;
иммуноблот рекомбинантный, антитела к вирусу гепатита С, IgG – 5 дней;
ПЦР с количественным выявлением РНК вируса в режиме реального времени – 5 дней;
выявление РНК гепатита С в плазме крови у пациентов с хронической инфекцией – 10 дней.

Если лаборатория находится не в клинике, где берется анализ, то результат исследования приходит с задержкой.

Источник

Словом «гепатит» называют целый ряд воспалительных заболеваний печени. Далеко не всегда это заболевание вызывается вирусами, хотя вирусный гепатит — один из самых распространенных. Привести к развитию заболевания могут и другие причины. Как проявляется болезнь, какие меры нужны для точной диагностики гепатита и насколько современные диагностические методы точны?

Особенности диагностики гепатита

Чем бы ни был вызван гепатит, разрушения, произведенные им, практически всегда одинаковы — клетки печени перестают выполнять свои функции и гибнут.

•

Вирусные гепатиты

Самая распространенная группа гепатитов. Разрушения в клетках печени происходят из-за проникновения в организм специфических вирусов. Различают несколько форм вирусного гепатита — A, B, C, D, E и G.

А, В, D и Е проявляются относительно одинаково — диарея, тошнота и рвота, нарастающая слабость, боль в области желудка и правого подреберья, пожелтение кожных покровов и белков глаз, увеличение печени в размерах. Гепатиты С и G более коварны и нередко долгие годы единственным симптомом является непреходящая усталость.

Лабораторные методы диагностики являются основными при выявлении заболевания. Обязателен ПЦР-анализ на выявление фрагментов РНК вируса и иммунологическое исследование, определяющее наличие антител к вирусу. Также необходимо сделать биохимический анализ крови, определить уровень билирубина и ферментов (например, АлТ, АсТ).

•

Токсические гепатиты

Не только вирусы, но и токсины растительного и искусственного происхождения могут вызвать гепатит. Различные отравляющие вещества, яды, которые содержатся в растениях и грибах, способствуют гибели клеток печени. Диагностика гепатита этого типа проводится путем выявления уровня билирубина, альбумина и протромбина, а также ферментов.

Кстати

Печень — самый крупный и многофункциональный внутренний орган. Он выполняет около 500 функций, среди которых — очистка организма от токсинов, обработка питательных веществ, производство белков и многое другое.

•

Лучевой гепатит

Одним из проявлений лучевой болезни, которая возникает из-за радиационного воздействия, является лучевой гепатит. В клинической практике данное заболевание встречается редко. Чтобы возник риск развития этой болезни, человек должен достаточно долго (в течение 3-4 месяцев) получать дозы радиации, превышающие 400 рад. Главный лабораторный метод диагностики лучевого гепатита — биохимический анализ крови и анализ на билирубин.

•

Аутоиммунный гепатит

Это редкая форма гепатита, и наука до сих пор не может объяснить, почему такое заболевание возникает. При аутоиммунном гепатите защитная система дает сбой и начинает атаковать клетки печени так, словно это чужеродные организмы. Данная форма гепатита часто сопровождает другие аутоиммунные заболевания, но может развиваться и самостоятельно. Для лабораторной диагностики аутоиммунного гепатита исследуется уровень гамма-глобулинов и IgG (болезнь можно заподозрить, если их показатели выше нормальных вдвое и больше), АсТ, АлТ.

Методы лабораторной диагностики вирусных гепатитов

Поскольку вирусные гепатиты распространены шире всего, остановимся на лабораторных методах их диагностики подробнее. Следует сказать, что именно анализ крови может дать больше всего информации об этом заболевании. Инструментальные методы (КТ, МРТ, УЗИ) для диагностики гепатита малоэффективны, они могут дать информацию о состоянии и структуре печени, но не о том, какой именно вирус поразил организм и как давно это произошло.

Гепатит А

Общий и биохимический анализ крови

. Для этого типа гепатита характерны низкий уровень лейкоцитов и высокая скорость оседания эритроцитов (СОЭ), пониженный альбумин и билирубин.
Выявление антител к вирусу

. Антитела к вирусу гепатита А Анти-НАV IgM можно обнаружить в самом начале заболевания, при появлении первых симптомов, сразу после окончания инкубационного периода. Самый надежный метод диагностики — ПЦР-анализ, позволяющий побнаружить в сыворотке крови антитела даже тогда, когда их концентрация ничтожно мала. Более того, метод ПЦР дает информацию о том, когда именно произошло заражение.
Анализ на определение РНК вируса

. ПЦР-анализ дает возможность обнаружить и фрагменты РНК вируса гепатита А.

Важно

Лабораторные исследования при вирусном гепатите следует проводить дважды, чтобы исключить возможность ложноотрицательного или ложноположительного результата.

Гепатит В

Общий и биохимический анализ крови

. Как и при гепатите А, этот анализ позволяет оценить изменения в работе и состоянии печени.
Анализ на антигены.

HBsAg — самый ранний маркер этого вируса, его можно обнаружить уже в инкубационном периоде. Количественное определение этого антигена используют не только для подтверждения диагноза, но и для определения стадии — острой или хронической.
Анализ на антитела к антигенам вирус

а. Наличие антител к HB-core Ag может говорить о том, что человек когда-то переболел гепатитом В, поскольку эти антитела сохраняются в крови еще очень долго после выздоровления, иногда — всю жизнь.

Гепатит С

Общий и биохимический анализ крови.
Анализ на антитела

. При проведении выявляется наличие антител IgM.
Анализ на определение РНК вируса

. Проводится методом ПЦР, позволяет выявить болезнь на ранней стадии и избежать ее перехода в хроническую форму.
Определение интерлейкина 28 бета

. Анализ, проводится методом ПЦР, позволяет спрогнозировать возможную эффективность лечения.

Гепатиты D и G

Общий и биохимический анализ крови.
Определение антител к антигенам.

В момент, когда заболевание находится в острой стадии, анализ показывает высокое содержание антител IgM. После этого в течение какого-то времени могут быть обнаружены другие антитела — IgG.
Определение РНК вируса.

При помощи ПЦР-метода РНК вируса можно обнаружить даже при его малой концентрации. Анализ дает информацию не только о типе вируса, но и о стадии болезни.

Гепатит E

Общий и биохимический анализ крови.
Анализ на определение антител.

Это основной лабораторный метод диагностики гепатита Е. Он показывает наличие антител IgM и IgG.

Лабораторные исследования — крайне важная часть диагностики гепатита, и если у вас есть подозрение на это заболевание, необходимо срочно сдать анализы. От их результатов зависит схема и эффективность лечения гепатита.

Источник