Спектр анализ гепатит ns3 ns4 ns5

Антитела к NS и core гепатита С – специфические иммуноглобулины, которые вырабатываются к структурным и неструктурным белкам вируса. Антигены вируса и антитела к нему обнаруживаются в рамках серологического исследования, которое называется иммуноферментным анализом (ИФА). Его выполняют при подозрении на гепатит С, во время противовирусной терапии и после нее. Снижение уровня антител (anti-HCV) отдельных классов указывает на полное уничтожение возбудителя инфекции.

Структурные и неструктурные белки гепатовируса

HCV – вирус рода Hepacivirus из семейства Flaviviridae, провоцирующий инфекционное воспаление печени. Когда антиген (чужеродное вещество) проникает в организм, возникает иммунный ответ, который характеризуется выработкой антител. При заражении гепатитом С специфические иммуноглобулины синтезируются к разным частям вируса:

• Ядро – содержит структурный белок core. При инфицировании он встраивается в геном клеток печени. В результате они превращаются в фабрику по производству дочерних вирионов. В 1 зараженной клетке ежедневно синтезируется от 30 до 50 вирусов.
• Оболочка – нуклеотидные протеины типа Е1 и Е2. Участвуют во взаимодействии возбудителя с иммунными клетками крови. Они помогают вирусу гепатита С (ВГС) защищаться от Т-лимфоцитов, гранулоцитов, фагоцитов и других клеток, борющихся с антигенами.
• Фрагменты генома – неструктурные белки типа NS2, NS3, NS4, NS5. Выполняют регуляторные функции, участвуют в репликации, то есть образовании копий вируса.

Структурные и неструктурные белки ВГС – антигены, к которым иммунная система вырабатывает антитела. Поэтому анализ на anti-HCV назначается всем людям с подозрением на гепатит С.

В рамках иммуноферментного анализа определяют только три неструктурных белка – NS3, NS4 и NS5. В действительности их больше и каждый выполняет определенные функции. Одни участвуют в расщеплении ферментов и белков, а другие – в сборке скопированного генетического материала. Учеными обнаружено 11 неструктурных белков, но функции некоторых из них до сих пор неизвестны.

Как проводят анализ на антигены и антитела к вирусу гепатита

Анализ на антитела к ВГС (anti HCV) – молекулярно-биологическое исследование, направленное на выявление иммуноглобулинов к гепатиту С. В его основе лежит реакция антиген-антитело, при которой формируются устойчивые комплексы из белков возбудителя и плазмы крови.

Чтобы обнаружить anti-HCV, во время анализа используют специальные ферменты. Они выполняют функцию меток, позволяющих регистрировать соответствующие сигналы. Главное преимущество серологического анализа – высокая специфичность. Полученные результаты дают информацию о:

1. типе возбудителя;
2. стадии заболевания;
3. форме гепатита (острый или хронический).

Для анализа берут венозную кровь из локтевой вены. Подготовка к исследованию не занимает много времени. Пациентам рекомендуют выполнять процедуру натощак в утренние часы, не курить за полчаса до сдачи крови.

Для чего назначается анализ на anti-HCV:

• первичная диагностика HCV-инфекции;

• дифференциальная диагностика гепатитов;

• выявление ранее перенесенного заболевания.

В случае раннего заражения (период до 4 недель) возрастает риск ложноотрицательного результата анализа. Поэтому даже при отсутствии в крови иммуноглобулинов дополнительно выполняется ПЦР на гепатит С. Если РНК возбудителя обнаруживается, диагноз подтверждают.

Анализ на anti-HCV выполняется при:

1. обследовании лиц из группы риска (хирургов, прооперированных пациентов, реципиентов крови);
2. признаках инфекционного поражения печени;
3. повышенном содержании печеночных ферментов;
4. планировании беременности;
5. мониторинге эффективности антивирусной терапии.

Сразу после забора крови лаборант подписывает образец и отправляет его в лабораторию для анализа. На исследование уходит не более 2-3 рабочих дней.

Расшифровка результатов

Если в крови обнаруживают иммуноглобулины к ВГС, это еще не свидетельствует о заражении. По статистике, до 30% пациентов излечиваются самостоятельно. Все они даже не догадываются, что переболели опасным заболеванием, исходом которого нередко становится фиброз, цирроз и гепатоцеллюлярная карцинома.

Виды антител, которые выявляются при иммуноферментном анализе:

• Anti-HCV core IgM – иммуноглобулины, которые синтезируются к ядру возбудителя. Они начинают циркулировать в крови раньше других антител. При хронической форме гепатита их концентрация сильно уменьшается.
• Anti-HCV NS – антитела, синтезированные к неструктурным белкам ВГС. Если при анализе выявляются anti-NS3, это свидетельствует об острой форме гепатита. Белковые комплексы anti-NS4 и anti-NS5 обнаруживаются преимущественно при переходе гепатита в вялотекущую форму.
• Anti-HCV total – суммарные антитела, которые возникают к возбудителю. Если они выявляются во время анализа, это значит, что человек либо заражен гепатитом, либо перенес инфекцию.

Во время диагностики вирусной болезни учитываются результаты качественной ПЦР. При выявлении HCV RNA, то есть РНК возбудителя, диагноз подтверждается.

Пример иммуноферментного анализа с расшифровкой данных

Во время иммуноферментного анализа обязательно определяют позитивность пробы на структурный белок ВГС – КП (core-Ag). Коэффициент позитивности применяется для оценки уровня иммуноглобулинов в крови. В мировой практике он измеряется в МЕ/мл. Результаты анализа считаются положительными, если этот коэффициент превышает 1. Иными словами, чем выше КП, тем больше содержание иммуноглобулинов в образце.

Если данные иммуноферментного анализа указывают на инфицирование, выполняют ПЦ.

После подтверждения диагноза проводят дополнительные инструментально-лабораторные исследования, посредством которых определяются:

1. структурные изменения – фиброз, цирроз печени, печеночно-клеточный рак;
2. вирусная нагрузка – концентрация РНК возбудителя в 1 мл крови;
3. активность воспаления – стадия гепатита С;
4. генотип ВГС – тип и подтип возбудителя.

С учетом результатов анализов составляют схему противовирусной терапии. При курсовом приеме ингибиторов неструктурных белков ВГС – Софосбувира, Нарлапревира, Ледипасвира Омбитасвира, Даклатасвира – выздоровления достигают 96-100% пациентов. Поэтому если вы подозреваете гепатит, запишитесь на прием к врачу.

В ответ на попадание в организм человека инородных частиц, таких, как вирусы,  иммунная система вырабатывает иммуноглобулины  —  защитные антитела. Эти антитела выявляют специальным анализом методом ИФА, скрининговым исследованием, используемым для установления факта инфицирования человека вирусом гепатита С. Для гепатита С все антитела содержат аббревиатуру anti-HCV,  что означает  «против вируса гепатита С».

Антитела гепатита С бывают двух классов — G и M, что в анализах пишется, как  IgG и IgM (Ig – immunoglobulin (иммуноглобулин) — это латинское название антител).   Anti-HCV total  (anti-НСV, анти-hcv) — суммарные антитела  (классов IgG и IgM) к антигенам вируса гепатита C. Тест на определение этих маркеров проводится всем пациентам, когда хотят проверить, есть ли у них гепатит С. Anti-HCV присутствуют как  при остром (они могут обнаруживаться уже с 4 — 6 недели после инфицирования), так и при хроническом гепатите. Anti-HCV total  также встречаются у тех, кто переболел гепатитом С и выздоровел самостоятельно. У таких людей данный маркер может обнаруживаться в течение 4 — 8 и более лет после выздоровления. Поэтому положительный анализ на anti-HCV не является достаточным для того, чтобы установить диагноз. На фоне хронической инфекции суммарные антитела выявляются постоянно, а после успешного лечения сохраняются длительное время (прежде всего за счет anti-HCV core IgG, о них написано ниже), при этом их титры постепенно снижаются.«

Важно знать, что антитела к гепатиту С не защищают от развития HCV-инфекции и не обеспечивают надежного иммунитета против повторного инфицирования.

  Спектр anti-НСV (core, NS3, NS4, NS5) — это специфические антитела к отдельным структурным и неструктурным белкам вируса гепатита  С.  Их определяют для суждения о вирусной нагрузке, активности инфекции, риске хронизации, разграничении острого и хронического гепатита, степени поражения печени. Обнаружение антител к каждому из антигенов имеет самостоятельное диагностическое значение. Anti-HCV состоят их структурных (core) и неструктурных (NS3, NS4, NS5) белков (протеинов).

  Anti-HCV core IgG —антитела класса G к ядерным (core) белкам HCV. Anti-HCV IgG появляются с 11-12 недели после инфицирования, поэтому для диагностики возможных «свежих» случаев инфицирования используют Anti-HCV total, которые появляются раньше. Anti-HCV IgG достигают пика концентрации к 5 — 6 месяцу с момента инфицирования и при хроническом течении болезни выявляются в крови пожизненно. При перенесенном гепатите С титр антител класса IgG постепенно снижается и может достигнуть  неопределяемых величин через несколько лет после выздоровления.

  Anti-HCV IgM —антитела  класса IgM к антигенам вируса гепатита C.  Anti-HCV IgM могут определяться в крови уже через 4-6 недель после инфицирования, их концентрация быстро достигает максимума. После завершения острого процесса уровень IgM падает и может повышается вновь во время реактивации инфекции, поэтому  принято считать, что эти антитела являются признаком острой инфекции или хронической с признаками реактивации. При остром гепатите С длительное обнаружение антител класса М, является фактором, прогнозирующим переход заболевания в хроническую форму. Считается, что обнаружение anti-HCV IgM может отражать уровень виремии и активность гепатита С, однако не всегда при реактивации ХВГС  anti-HCV IgM выявляются. Также есть случаи, когда  при хроническом гепатите С в отсутствии реактивации обнаруживаются anti-HCV IgM.

В большинстве случаев, наличие anti-HCV IgM указывает на текущую инфекцию. При хроническом гепатите С антитела класса М могут свидетельствовать об обострении процесса. При проведении терапии интерфероном наблюдение за anti-HCV IgM в динамике позволяет оценивать эффективность лечения.

 Неструктурные (NS3, NS4, NS5) белки.  

   NS3, NS4, NS5 относятся к неструктурным  (NS — nonstructural) белкам. На самом деле, этих белков больше —   NS2, NS3, NS4a, NS4b, NS5a, NS5b, однако в большинстве клинико-диагностических лабораторий определяют антитела к белкам NS3, NS4 и NS5.

   Anti-NS3 выявляются на самых ранних этапах сероконверсии. Высокие титры anti-NS3  характерны при остром гепатите  С и могут являться самостоятельным диагностическим маркером острого процесса. При остром процессе  высокая концентрация anti-NS3  обычно  свидетельствует о значительной вирусной нагрузке, а длительное сохранение их в острой фазе связано с высоким риском хронизации инфекционного процесса.

  Anti -NS4 и anti-NS5, как правило, появляются в более поздние сроки. При ХВГС определение anti-NS4 в высоких титрах может  свидетельствовать о длительности инфекционного процесса и, по некоторым данным,  имеет связь со степенью поражения печени. Выявление anti-NS5  в высоких титрах часто свидетельствует о присутствии вирусной РНК, а в острой стадии является предиктором хронизации инфекционного процесса. Снижение титров  NS4 и NS5 в динамике может являться благоприятным признаком, указывающим на формирование клинико-биохимической ремиссии. Титры anti-NS5 могут отражать эффективность ПВТ, причем их повышенные значения характерны для лиц, не отвечающих на терапию. После выздоровления титры anti-NS4  и anti-NS5  снижаются с течением времени. Результаты одного из исследований показали, что почти у половины пациентов через 10 лет после успешного лечения интерферонами, anti-NS4  и anti-NS5 не определялись. В следующей таблице приведены наиболее вероятные варианты трактовки сочетания маркеров гепатита С.

Однако, для постановки диагноза, не всегда достаточно иметь результаты серологических исследований. Необходимо наличие эпидемиологических данных, сведений о времени и обстоятельствах возможного заражения, наличие клинико-лабораторных признаков заболевания.