Спектр к индивидуальным белкам вируса гепатита с
[07-010]
Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С
550 руб.
Определение в крови иммуноглобулинов IgG к белкам вируса гепатита С, которое используется для диагностики этого заболевания.
Синонимы русские
Антитела к белкам гепатита С;
Антитела к ВГС.
Синонимы английские
Antibodies to structural and non-structural proteins of HCV;
Antibodies to HCV.
Метод исследования
Иммуноферментный анализ (ИФА).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исключить из рациона жирную пищу в течение 24 часов до исследования;
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Гепатит С – вирусное заболевание печени, отличительной чертой которого является бессимптомное течение и высокая частота прогрессии в хронический гепатит, цирроз печени и гепатоцеллюлярную карциному. Основной путь передачи гепатита С – через кровь и ее компоненты. Группы риска по заражению ВГС:
- Медицинские работники;
- Люди, использующие инъекционные наркотики;
- Пациенты с ВИЧ;
- Люди, которым были сделаны татуировки с помощью нестерильных инструментов;
- Пациенты, получившие переливание крови или ее компонентов до 1992 г.;
- Пациенты, получившие трансфузию факторов свертывания крови до 1987 г.;
- Пациенты, получающие лечение гемодиализом в течение длительного времени;
- Дети, рождённые от матерей с ВГС.
Следует отметить, что по крайней мере в 20 % случаев источник заражения установить не удается. В России наблюдается рост заболеваемости гепатитом С: в период с 1999 по 2011 гг. заболеваемость хроническим ВГС выросла в 3 раза. Как правило, пациенты с ВГС не догадываются о своем заболевании.
Вирус гепатита С (ВГС) – РНК-вирус, принадлежащий семейству Flaviviridae. При транскрипции его генома образуется единый белок длиной около 3000 аминокислот, который затем разрезается с помощью пептидаз клетки-хозяина и вирусных пептидаз с образованием структурных и неструктурных белков:
- Структурные белки (коровый белок, Е1 и Е2, от англ. envelope glycoproteins – гликопротеины оболочки) необходимы для формирования вирусного капсида;
- Неструктурные белки (p7, NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B, от англ. non-structural – неструктурные) выполняют различные регуляторные функции.
В ответ на заражение вирусом гепатита С в организме человека начинают вырабатываться антитела – иммуноглобулины M и G, которые можно исследовать для диагностики гепатита. Следует отметить, что при гепатите С синтез иммуноглобулинов М может наблюдаться на разных стадиях заболевания, как при остром, так и при хроническом гепатите, и поэтому не имеет никакого диагностического значения. Это важное отличие диагностики гепатита С от гепатита В (выявление иммуноглобулинов М при гепатите В наблюдается только в острую стадию). Таким образом, все серологические тесты для диагностики гепатита С основаны на выявлении иммуноглобулинов G к белкам этого вируса.
Структурные и неструктурные белки иммуногенны в разной степени. Показано, что наиболее выраженными иммуногенными свойствами обладают следующие белки (в скобках указан процент пациентов с хроническим гепатитом С, у которых в крови обнаруживаются антитела к указанному белку):
- Коровый белок (97 %);
- NS4B (86 %);
- NS3 (68 %);
- NS5A (53 %).
Менее иммуногенны белки E2 (31 %), NS4A(28 %) и E1 (22 %). NS2 и NS5B имеют очень слабые иммуногенные свойства, и антитела к ним у пациентов с ВГС выявляются редко.
Антитела к ВПС могут быть определены в крови приблизительно через 8 недель после первичного заражения. Ложноотрицательные результаты могут наблюдаться у людей с иммунодефицитом (например, ВИЧ-инфицированных), почечной недостаточностью и эссенциальной смешанной криоглобулинемией. Ложноположительные результаты также встречаются.
Вирусы гепатита С неоднородны по генетическому составу. На этом основании выделяют 6 генотипов ВПГ, геномы которых различаются на 30-35 %, и множество подтипов, различающихся на 20-25 %. В восточной Европе и США чаще встречаются генотипы 1a и 1b, тогда как для других стран характерны другие генотипы (например, Египет – генотип 4, Южная Африка – генотип 5). Показано, что иммунный ответ пациентов, инфицированных разными генотипами ВГС, различается. Это особенно справедливо в отношении антител к белкам E1, E2, NS3, NS4A и NS5A.
Качественный и количественный состав антител к ВГС у пациента остается достаточно постоянным в течение заболевания, в том числе и после проведенного лечения.
Антитела к гепатиту С – чувствительный, но недостаточно специфичный метод диагностики этого заболевания. Поэтому серологические тесты – это скрининговые тесты диагностики гепатита. При получении положительного результата исследования антител на гепатит С обязательно проводят подтверждающее исследование – анализ на РНК вируса с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР). Кроме того, при подтверждении диагноза «гепатит С» может понадобиться генотипирование ВГС и гистологическое исследование печени или неинвазивные методы определения состояния печени (такие как ФиброМакс).
Для чего используется исследование?
- Для диагностики гепатита С.
Когда назначается исследование?
- При профилактическом обследовании, особенно если пациент принадлежит к группе риска по гепатиту С;
- в некоторых случаях при устройстве на работу.
Что означают результаты?
Референсные значения
Выдается по компонентам:
IgG к антигену core
IgG к антигену NS3
IgG к антигену NS4
IgG к антигену NS5
Результат: орицательный.
Положительный результат:
- гепатит С;
- ложноположительный результат (чаще у пациентов, не относящихся к группам риска, например доноров крови).
Отрицательный результат:
- норма;
- ложноотрицательный результат (сопутствующая ВИЧ-инфекция, почечная недостаточность, эссенциальная смешанная криоглобулинемия).
Что может влиять на результат?
- Время, прошедшее с момента заражения;
- Состояние иммунной системы;
- Сопутствующие заболевания почек;
- Генотип вируса гепатита С.
Важные замечания
- Это скрининговый тест. При получении положительного результата необходим дополнительный, подтверждающий тест (определение РНК вируса с помощью ПЦР);
- результаты анализа следует интерпретировать с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.
Также рекомендуется
[09-012] HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]
[09-011] HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]
[09-010] HCV, генотипирование (типы 1a, 1b, 2, 3a, 4), РНК [реал-тайм ПЦР]
[12-016] Гистологическое исследование гепатобиоптата (биоптата печени) с использованием стандартных методик
Кто назначает исследование?
Инфекционист, терапевт, врач общей практики.
Литература
- Kamili S, Drobeniuc J, Araujo AC, Hayden TM. Laboratory diagnostics for hepatitis C virus infection. Clin Infect Dis. 2012 Jul;55 Suppl 1:S43-8.
- Virol J. 2009 Jun 23;6:84. doi: 10.1186/1743-422X-6-84. Sillanpää M, Melén K, Porkka P, Fagerlund R, Nevalainen K, Lappalainen M, Julkunen. Hepatitis C virus core, NS3, NS4B and NS5A are the major immunogenic proteins in humoral immunity in chronic HCV infection.Virol J. 2009 Jun 23;6:84.
- Стела Бивол, Аня Саранг. Гепатит С в России: эпидемия бездействия. Фонд содействия защите здоровья и социальной справедливости им. Андрея Рылькова, 2013.
Источник
| № по каталогу | Наименование и краткое описание | Количество определений |
|---|---|---|
D-0760 | РекомбиБест анти-ВГС-IgM № ФСР 2007/00610 Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса М к вирусу гепатита С. | 12×8 |
D-0770 | Бест анти-ВГС-авто (комплект 1) | 24×8 |
D-0749 | Бест анти-ВГС-авто (комплект 2/Чароит) № РЗН 2015/2674 Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов классов G и M к вирусу гепатита С для автоматических ИФА-анализаторов. | 12х8 |
D-0771 | Бест анти-ВГС (комплект 1) | 2×96 |
D-0772 | Бест анти-ВГС (комплект 2) | 12×8 |
D-0773 | Бест анти-ВГС (комплект 3) | 24×8 |
D-0775 | Бест анти-ВГС (комплект 4) № РЗН 2015/2352 Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов классов G и M к вирусу гепатита С. | 60×8 |
D-0774 | Бест анти-ВГС-спектр № ФСР 2012/13933 Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов классов G и M к индивидуальным белкам вируса гепатита С (core, NS3, NS4, NS5). | 6×4 |
D-0776 | Бест анти-ВГС-подтверждающий тест № РЗН 2015/2895 Набор реагентов для иммуноферментного подтверждения наличия иммуноглобулинов классов G и M к вирусу гепатита С. | 12×4 |
D-0777 | ВГС АГ/АТ-ИФА-БЕСТ (комплект 1) | 12×8 |
D-0778 | ВГС АГ/АТ-ИФА-БЕСТ (комплект 2) № ФСР 2010/09023 Набор реагентов для иммуноферментного выявления антител к вирусу гепатита С и core антигена ВГС. | 24×8 |
D-0779 | ВГС core-антиген-ИФА-БЕСТ № РЗН 2013/1181 Набор реагентов для иммуноферментного выявления core-антигена вируса гепатита С. | 12×8 |
D-0712 | ВГС-блот-Бест № ФСР 2007/01257 Набор реагентов для подтверждения наличия антител к вирусу гепатита С методом иммунного блоттинга. | 20 |
D-0738 | ВЛК анти-ВГС № ФСР 2010/08718 Набор для внутрилабораторного контроля качества ИФА «Сыворотка, содержащая антитела к вирусу гепатита С». | 24 флакона по 0,5 мл |
D-0740 | Анти-ВГС контрольная панель сывороток № РЗН 2013/585 Набор образцов сывороток крови, содержащих и не содержащих антитела к вирусу гепатита С. Для внутрилабораторного контроля качества (оценки правильности) исследований на анти-ВГС. | 6 образцов по 0,4 мл |
D-0741 | Анти-ВГС стандартная панель сывороток № РЗН 2013/587 Набор образцов сывороток крови, содержащих и не содержащих антитела к вирусу гепатита С. | 24 образца по 0,5 мл |
Источник
Белки и антигены вируса гепатита С. Диагностика ВГССегодня известно минимум 10 структурных и неструктурных белков, кодируемых геномом HCV. К структурным белкам относят core, envelop 1 и envelop 2. Белок core является белком нуклеокапсида, тогда как envelop 1 и envelop 2 — гликопротеины внешней оболочки вируса. В структурной зоне кодируется также белок р7, функция которого не ясна, однако аналогия с другими представителями семейства Flaviviridae позволяет предположить, что его функция связана с высвобождением вириона из инфицированной клетки. Неструктурная область генома HCV кодирует 6 белков — NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B. Белок NS2 является вирусной металлозависимой протеиназой. Белок NS4A действует как эффектор или кофактор для NSЗ-протеолитической активности в NS4A/NS4B, NS4B/NS5A, NS5A/NS5B сайтах нарезания полипротеина вируса. В настоящее время фрагменты структурных и неструктурных белков, полученных генноинженерным путем (рекомбинантные белки) или с помощью химического синтеза, используют в качестве антигенов при конструировании иммуноферментных тест-систем. Первое поколение иммуноферментных тест-систем появилось на рынке в 1989 году и было основано на прямом ИФА. В качестве иммуносорбента были использованы фрагменты двух белков, NS3 и NS4, обозначаемых как 5-1-1 и С100-3. Одновременно были разработаны и подтверждающие тесты на основе иммуноблота с рекомбинантными белками (RIBA). Чувствительность этих тест-систем первого поколения составляла только 64% для ИФА и 55% для иммуноблота. Тест-системы второго поколения появились на рынке в 1991 году. В качестве антигенов, сорбированных на твердой фазе, в этих тест-системах использовали капсидные белки (фрагмент с22-3) и антигены неструктурных регионов NS3 (фрагменты с200 и сЗЗс) и NS4, что позволило повысить чувствительность и специфичность исследований. Поскольку гуморальный иммунный ответ на капсидные антигены (структурные белки) нагинается быстрее, гем на неструктурные белки, период от инфицирования до выявляемой сероконверсии удалось уменьшить до двух месяцев.
Подтверждающие тест-системы на основе иммуноблота позволяли идентифицировать участвующие в реакции антигены. Результаты, полученные при помощи этих тест-систем, интерпретировали как положительные лишь при реакции антител, находящихся в исследуемом субстрате, по крайней мере, с двумя антигенами, тогда как при наличии реакции лишь с одним из антигенов результат считали неопределенным. Было установлено, что специфичность второго поколения тест-систем зависела от источника антигенов. В 1993 году на рынке появилось третье поколение тест-систем. В дополнение к вышеупомянутым антигенам в этих тест-системах используются также антигены, аминокислотная последовательность которых соответствует иммунодоминантным участкам NS5 белков. В тест-системах первого, второго и третьего поколений в качестве антигенов использовались или рекомбинантные, или синтетические пептиды. В настоящее время можно выделить также тест-системы четвертого поколения, в которых в качестве иммуносорбента используют сочетания рекомбинантных и синтетических пептидов. Опыт применения тест-систем различных поколений в мире очень большой. Было установлено, что если с помощью тест-систем первого или второго поколения у больных с острым вирусным гепатитом С антитела выявляли на 10-16, а в ряде случаев и 25-30 неделе от начала заболевания, то диагностикумы третьего поколения позволяли сократить этот срок до 2-3 недель. Согласно обобщенным данным чувствительность тест-систем первого, второго и третьего поколений составляет соответственно 70-80%, 92-95% и 97%. В то же время, по данным С. Colin, 2001, чувствительность тест-систем третьего поколения составила 98,9% у пациентов с хроническими заболеваниями печени и 97,2% на специальных контрольных панелях сывороток. Достижение высокой чувствительности иммуноферментных тест-систем 3 и 4 поколения сопряжено с некоторыми проблемами в обеспечении специфичности исследований, что в ряде случаев может приводить к появлению ложноположительных результатов. В литературе имеются данные о возможных погрешностях в специфичности ELISA 3 тест-систем. Они являются общими для всех ELISA тест-систем, включая тест-системы для диагностики СПИДа. Ложнопозитивные результаты могут быть следствием повышенного содержания в образцах гамма-глобулинов (сыворотки пациентов африканской расы, миеломная болезнь, ревматоидные факторы), заболеваний печени (цирроз, рак), аутоиммунных заболеваний (коллагенозы, аутоиммунные гепатиты), других вирусных инфекций (ВИЧ, гепатит В) и длительного хранения сывороток в меняющихся температурных условиях. Проведение какой-либо иммунизации также может сопровождаться повышением частоты ложнопозитивных реакций. Рекомендуемые в настоящее время меры по устранению этой проблемы следующие: а) повторная постановка образца в этой же ИФТС; б) повторная детекция anti-HCV в другой ИФТС; в) использование подтверждающих тестов на основе ИФА и иммуноблота. Однако использование предлагаемых способов подтверждения результатов зачастую приводят к расхождениям в их итоговой трактовке, что показано исследованиями российских и зарубежных исследователей. В настоящее время производители ИФТС для детекции anti-HCV достигают высокой чувствительности или за счет более полного выявления антител к NS3 или антител к антигенам core. Сравнительные исследования, выполненные на различных группах риска и специальных контрольных панелях показали, что тест-системы, лучше выявлявшие антитела к NS3, оказались несколько более чувствительными, чем тест-системы, лучше выявлявшие антитела к антигенам core. Их чувствительность составляла, соответственно 99,9% и 98,6%. — Также рекомендуем «Современная диагностика вирусного гепатита А. Антигены HAV» Оглавление темы «Диагностика вирусных гепатитов»:
|
Источник
