Вакцина против гепатита в микробиология

Живые
вакцины
— препараты, действующим началом в
которых являются ослабленные тем или
иным способом, потерявшие свою
вирулентность, но сохранившие
специфическую антигенность штаммы
патогенных бактерий.

Аттенуация
(ослабление)
возможна путём воздействия на штамм
химических (мутагены) и физических
(температура) факторов или посредством
длительных пассажей через невосприимчивый
организм. Так же в качестве живых вакцин
используются дивергентные штаммы
(непатогенные для человека), имеющие
общие протективные антигены с патогенными
для человека микробами. Примером такой
вакцины является БЦЖ и вакцина против
натуральной оспы.

Возможно
получение живых вакцин генно-инженерным
способом.
Принцип получения таких вакцин сводится
к созданию непатогенных для человека
рекмбинантных штаммов, несущих
протективные антигены патогенных
микробов и способных при введении в
орг. человека размножаться и создавать
иммунитет. Такие
вакцины называют векторными.

Вне
зависимости от того, какие штаммы
включены в вакцины, бактерии получают
путём выращивания на искусственных
питательных средах, культурах клеток
или куриных эмбрионах. В живую вакцину,
как правило, добавляют стабилизатор,
после чего подвергают лиофильному
высушиванию.

В
связи с тем, что живые вакцины способны
вызывать вакцинную инфекцию
(живые аттенуированные микробы
размножаются в организме, вызывая
воспалительный процесс проходящий без
клинических проявлений), они всегда
вызывают перестройку иммунобиологического
статуса организма и образование
специфических антител. Это так же может
являться недостатком, т. к. живые вакцины
чаще вызывают аллергические реакции.Вакцины
данного типа, как правило, вводятся
однократно.

Примеры:
сибиреязвенная вакцина, чумная вакцина,
бруцеллёзная вакцина, БЦЖ вакцина,
оспенная дермальная вакцина.

3. Гепатит в, с, д, g, tt.

Вирус
гепатита В—
семейс­тво Hepadnaviridae
род Orthohepadnavirus.

Морфология:
ДНК-содержаший
вирус сферичес­кой формы. Состоит из
сердцевины, состоящей из 180 белковых
частиц, составляющих сердцевинный
НВс-антиген и липидсодержащей оболоч­ки,
содержащей поверхностный HBs-антиген.
Внутри сердцевины находятся ДНК, фермент
ДНК-полимераза, обладающая ревертазной
ак­тивностью, и концевой белок
НВе-антиген.

Геном
представлен двунитевой ДНК коль­цевой
формы.

Культуральные
свойства.
Не
культиви­руется на куриных эмбрионах,
не облада­ет гемолитической и
гемагглютинирующей активностью. ВГВ
культивируется только в культуре
клеток.

Резистентность.
Высокая
к факторам окружающей среды и
дезинфицирующим веществам. Вирус
устой­чив к длительному воздействию
кислой среды, УФ-излучению, действию
спирта, фенола.

Антигенная
структура.
Слож­ная.
В суперкапсиде вируса находится
HBs-антиген,
который ло­кализован в гидрофильном
слое на поверх­ности вириона. В
формировании HBs-антигена
участвуют 3 полипептида в гликозилированной
форме:preSl
— большой полипептид; preS2
— средний полипептид; S
— малый полипептид.

Эпидемиология:
Развитие
инфекционного процесса при попадании
в кровь. Заражение проис­ходит при
парентеральных манипуляциях (инъ­екциях,
хирургических вмешательствах),
пере­ливании крови.

Патогенез
и клиника заболевания.
Инкуба­ционный
период 3—6 месяцев. Инфекционный процесс
наступает после проникновения вируса
в кровь. ВГВ из крови эндоцитозом
прони­кает в гепатоцит. После
проникновения вируса происходит
достраивание плюс-нити ДНК ДНК-полимеразой
до пол­ноценной структуры. Клиническая
картина характеризуется сим­птомами
поражения печени, в большинстве случаев
сопровождается развитием желтухи.

Иммунитет.
Гуморальный
иммунитет, пред­ставленный антителами
к HBs-антигену,
защищает гепатоциты от вируса, элиминируя
его из крови.

Клеточный
иммунитет освобождает организм от
инфицирован­ных гепатоцитов благодаря
цитолитической функции Т-киллеров.
Переход острой фор­мы в хроническую
обеспечивается наруше­нием Т-клеточного
иммунитета.

Микробиологическая
диагностика.
Исполь­зуют
серологический метод и ПЦР. Методами
ИФА и РНГА в крови определяют маркеры
гепатита В: антигены и антите­ла. ПЦР
определяют наличие вирусной ДНК в крови
и биоптатах печени. Для острого гепатита
ха­рактерно обнаружение HBs
антигена, НВе антигена и анти-HBc-IgM
антитела.

Лечение.
Использование интерферона, интерфероногенов:
виферона, амиксина, инги­битора
ДНК-полимеразы, препарата аденинрибонозида.

Профилактика.
Исключение
попадания вируса при парен­теральных
манипуляциях и переливаниях крови
(применением одноразовых шприцев,
проверкой на ге­патит В по наличию
HBs-антигена
в крови доно­ров крови).

Специфическая
профилактика осущест­вляется
вакцинацией рекомбинантной
ген­но-инженерной вакциной, содержащей
HBs-антиген.
Вакцинации подлежат все новорож­денные
в первые 24 часа жизни. Длительность
поствакцинального иммуните­та — не
менее 7 лет.

Вирус
гепатита С
относится
к се­мейству Flaviviridaeроду
Hepacivirus.

Морфология.
Сложноорганизованный
РНК-содержащим вирус сфе­рической
формы. Геном представлен одной линейной
«+» цепью РНК, обладает большой
вариабельностью.

Антигенная
структура.
Вирус
обладает слож­ной антигенной
структурой. Антигенами яв­ляются:

1.
Гликопротеины оболочки

2.
Сердцевинный антиген НСс-антиген

3.
Неструктурные белки.

Культуральные
свойства.
ВГС
не культиви­руется на куриных
эмбрионах, не облада­ет гемолитической
и гемагглютинирующей активностью.
Резистентность.
чувствителен
к эфиру, УФ-лучам, нагреванию до 50С.

Эпидемиология.
Заражение
ВГС аналогично заражению ВГВ. Наиболее
часто ВГС передается при переливаниях
крови, трансплацентарно, половым путем.

Клиника:
Часто
встречаются безжелтушные формы, течение
инфекции в острой форме, в 50 % случаев
процесс переходит в хроническое те­чение
с развитием цирроза и первичного ра­ка
печени.

Микробиологическая
диагностика:
Используются
ПЦР и серо­логическое исследование.
Подтверждением активного инфекционного
процесса является обнаружение в крои
вирусной РНК ПЦР. Серологическое
исследование направлено на определение
антител к NS3
методом ИФА.

Профилактика
и лечение.
Для
профилакти­ки – тоже, что и при
гепатите В. Для лечения применяют
интерфе­рон и рибовирин. Специфическая
профилак­тика – нет.

Вирус
гепатита D
—

дефектный вирус, не имеющий собственной
оболочки. Вирион имеет сферическую
форму, который состоит из однонитчатой
РНК и сердцевинного HDc-антигена.
Эти белки регулируют синтез генома
ви­руса: один белок стимулирует синтез
генома, другой — тормозит. Различают
три генотипа вируса. Все генотипы
относятся к одному серотипу.

Резервуаром
BFD
в природе являются но­сители ВГВ.
Заражение BFD
аналогично ин­фицированию ВГВ.

Микробиологическая
диагностика
осуществляется серологичес­ким
методом путем определения антител к
BFD
методом ИФА.

Профилактика:
все те мероприятия, которые исполь­зуют
для профилактики гепатита В. Для ле­чения
используют препараты интерферона.
Вакцина против гепатита В защищает и
от гепатита D.

Вирус
гепатита G.

Гепатит
G вызывается РНК — содержащим вирусом
из группы флавивирусов. Вирус передается
парентерально, способен вызывать острые
и хронические гепатиты. Описано несколько
генотипов HGV. У этого вируса обнаружено
два структурных оболочечных белка — Е1
и Е2 и пять неструктурных белков. Маркеры
гепатита
G распространены среди населения даже
чаще, чем — вируса гепатита С, особенно
при трансплантации почки, у наркоманов,
больных гемофилией, при гемодиализе и
наиболее часто — у носителей вируса
гепатита С.

Как
метод лабораторной диагностики
чаще используют ПЦР — определение РНК
вируса (при остром гепатите G в первые
шесть месяцев можно определить только
вРНК), антитела к оболочечному белку
Е2 выявляют не ранее 5 — 6 месяцев с момента
инфицирования.

Острый
гепатит G
переходит в хронический реже, чем
гепатит С. С хроническими гепатитами
G связана персистенция вируса,
возникновение циррозов печени. Гепатит
G к настоящему времени изучен еще
недостаточно.

Современные
представления о вирусных гепатитах
изменяются быстро, список вирусов
расширяется. К новым гепатотропным
вирусам, действие которых уточняется,
следует отнести TTV (ДНК- вирусы нового
семейства Circinoviridae) и SEN- вирусы.

TTV-
вирус-
спутник, сопутствующий известным
вирусным парентеральным гепатитам.
Это- вирус — оппортунист, активирующийся
при иммунодефицитах (в т.ч. ВИЧ- инфекции).
SEN- вирусы- это ДНК -вирусы, близкие к
семейству TTV, связаны с переливаниями
крови, реплицируются в гепатоцитах,
чаще встречаются у больных с парентеральными
вирусными гепатитами В и С, генетически
высоко изменчивы.

Билет
42

61.   
Молекулярные
вакцины. Генно-инженерные вакцины.
Принципы получения, применение.

Молекулярные
вакцины.

АГ нах-ся в молекулярной
форме или в виде фрагментов его молекул, определяющих специфичность
антигенности, т.е в виде эпитопов, детерминант.

Антигены в молекулярном
виде получают:

а) в процессе биосинтеза
при выращивании природных, а также рекомбинантных штаммов бактерий и вирусов и

б) химическим
синтезом.(более трудоёмок и имеет ограниченные возможности по сравнению с
биосинтезом.

Типичным примером
молекулярных антигенов, образуемых биосинтезом природными штаммами, являются анатоксины (столбнячный,
дифтерийный, ботулинический и др.), получаемые из обезвреженных токсинов. В мед
практике используется молекулярная вакцина против Вир. Гепатита В, полученная
из АГ вируса, продуцируемого рекомбинантным штаммом дрожжей.

Генно-инженерные
вакцины. Генно-инженерные вакцины
содержат Аг возбудителей, полученные с использованием методов генной инженерии,
и включают только высокоиммуногенные компоненты, способствующие формированию
защитного иммунитета

Возможны несколько
вариантов создания генно-инженерных вакцин.

•  Внесение генов вирулентности в авирулентные или
слабовирулентные микроорганизмы.

•              
Внесение генов
вирулентности в неродственные микроорганизмы с последующим выделением Аг и его
использованием в качестве иммуногена.

•              
Искусственное
удаление генов вирулентности и использование модифицированных организмов в виде
корпускулярных вакцин.

Векторные (рекомбинантные) вакцины

Вакцины, полученные
методами генной инженерии. Суть метода: гены вирулентного микроорганизма,
отвечающий за синтез протективных антигенов, встраивают в геном какого — либо
безвредного микроорганизма (e. Coli), который при культивировании продуцирует и накапливает
соответствующий антиген.

Примером может служить
рекомбинантная вакцина против вирусного гепатита В, вакцина против ротавирусной
инфекции. Наконец, имеются положительные результаты использования т.н.
векторных вакцин, когда на носитель — живой рекомбинантный вирус осповакцины
(вектор) наносятся поверхностные белки двух вирусов: гликопротеин D вируса простого герпеса и гемагглютинин вируса гриппа
А. Происходит неограниченная репликация вектора и развивается адекватный
иммунный ответ против вирусной инфекции обоих типов. Действие отдельных
компонентов микробных, вирусных и паразитарных антигенов проявляется на разных
уровнях и в разных звеньях иммунной системы. Их результирующая может быть лишь
одна: клинические признаки заболевания — выздоровление — ремиссия — рецидив —
обострение или другие состояния организма. Так. в частности. АДС — через 3
недели после ее введения детям приводит к возрастанию уровня 1 -клеток и
увеличению содержания ЕКК в периферической крови, поливалентная бактериальная
вакцина Lantigen В стимулирует антителообразование Ig А в крови и
слюне, но самое главное, что при дальнейшем наблюдении у вакцинированных
отмечено уменьшение числа случаев заболевания, а если они и возникали, то
протекали легче. Клиническая картина болезни, т.о. является наиболее
объективным показателем вакцинации.

Рекомбинантные вакцины —
для производства этих вакцин применяют рекомбинантную технологию, встраивая
генетический материал микроорганизма в дрожжевые клетки, продуцирующие антиген.
После культивирования дрожжей из них выделяют нужный антиген, очищают и готовят
вакцину. Примером таких вакцин может служить вакцина против гепатита В (Эувакс
В).

Вакцины в основном используют для активной спецефической профилактики,
иногда для лечения болезней.