Вирусный гепатит а и его лабораторная диагностика
Гепатит А считается врачами относительно мягкой формой инфекционного процесса из-за редких случаев хронизации заболевания, но в последнее время этот недуг приобретает более широкое распространение. Вирусный гепатит А является наиболее распространенной формой гепатита. Микробиологические исследования доказали, что передается от человека к человеку инфекция парентальным путем, с пищей и питьем.
В некоторых случаях может иметь место молниеносный гепатит, такая разновидность патологического процесса способна закончиться смертельным исходом. По этой причине пускать развитие недуга на самотек нельзя.
Развитие болезни происходит в три этапа:
- преджелтушная;
- разгара болезни — желтушная;
- реконвалесценции – выздоровления.
Сразу после инфицирования начинается инкубационный период, в течение которого, изменения не выявляются, этот период характеризуется накоплением вирусных частиц в организме.
Патогенез гепатита А сопровождается формированием в организме больного различных синдромов, представляющих собой комплексы симптомов, свидетельствующих о возникновении различных нарушений провоцируемых интоксикацией.
Проведение первичной диагностики
Диагностика гепатита А предполагает использование нескольких диагностических методов. При появлении подозрений на наличие указанной инфекции больной в первую очередь должен обратиться к врачу-инфекционисту для проведения экспресс-теста.
Осуществление первичного обследования у врача
Для диагностирования наличия заболевания инфекционисту достаточно провести беседу с пациентом, в процессе которой выясняются особенности способа жизни человека. После проведения беседы врач осуществляет осмотр больного, обследует печень методом пальпации и ставит первичный диагноз.
Так как большинство симптомов у различных типов вирусных инфекций сходны между собой, поэтому требуется лабораторная диагностика гепатитов.
После первичного осмотра и обследования врач дает направление на анализы.
Проведение лабораторной диагностики гепатита А во многом сходно с лабораторной диагностикой гепатита С.
При проведении первичной диагностики вирусного гепатита А показательной будет следующая информация:
- Посещал ли пациент в последнее время страны Азии и Африки, где недостаточно развита работа коммунальных служб. Это связано с тем, что передача инфекции осуществляется пищевым и водным путем.
- Соблюдает ли человек элементарные гигиенические правила.
- Важной является информация о том, контактировал ли пациент с больными гепатитом А.
На основании полученной информации врач может сделать предварительное заключение и проводить дальнейшую диагностику заболевания. Одновременно с проведением осмотра врач выясняет, как осуществляет функционирование пищеварительная система пациента, присутствуют ли признаки мышечной интоксикации. При проведении процедуры пальпирования доктор определяет размеры печени.
Очень часто течение заболевания происходит в безжелтушной форме, но опытный врач проводит осмотр склер глаз, появление даже небольшой желтушности говорит о возможном факте инфицирования организма.
Применение экспресс-теста в диагностике
В качестве первичного метода диагностики на наличие у пациента вирусной инфекции можно использовать экспресс-тест на определение антигена вируса гепатита А в составе кала или крови.
Фармацевтическая промышленность предлагает использовать два вида тестовых наборов – тест компании Vegal и иммуноферментные тест-системы Vintrotest Vitrotest HAV-IgM TK069.
Первая разновидность экспресс-тестов включает в своем составе весь комплект необходимых реактивов и инструментов. Для проведения исследования требуется не более 15 минут. Этот способ не дает 100% точности.
Иммуноферментные тест-системы Vintrotest Vitrotest HAV-IgM TK069 позволяют достаточно быстро определить присутствие антител IgM к вирусным частицам. Это исследование позволяет получить результат в домашних условиях уже через 15 минут.
Использование результатов гемотестов, несмотря на большое количество положительных отзывов о них, не могут использоваться в качестве единственного способа проведения диагностики.
После использования такого метода рекомендуется провести дополнительные лабораторные исследования. Помимо этого, в связи с тем, что появляющиеся симптомы могут свидетельствовать о наличии в организме не только гепатита, а также, например, у взрослых людей алкогольного гепатоза и некоторых других заболеваний печени. По этой причине требуется проведение дифференциальной диагностики. Дополнительно нужно установить какая разновидность вируса поразила организм и спровоцировала появление болезни.
Анализы при диагностике гепатита А
Проведение диагностических мероприятий при подозрении на наличие патологии требует проведения целого комплекса исследований.
При диагностировании недуга применяются лабораторные и инструментальные методы проведения исследований.
Использование клинических способов диагностирования патологии
Показательные данные позволяет получить биохимический анализ крови и мочи.
В том случае, если выявлены повышенный билирубин, а также увеличенная концентрация печеночных ферментов, то это означает, что развивающийся в организме гепатит уже привел к нарушению работы клеток печеночной паренхимы.
Проведение детальной расшифровки анализа крови и мочи позволяет определить в некоторых случаях степень повреждения печени и организма в целом.
Наиболее показательными лабораторными методами диагностики гепатита А являются:
- анализ мочи;
- общий анализ крови;
- биохимия крови;
- коагулограмма.
Лучше всего сдавать анализы натощак, это позволит получить наиболее точные результаты.
Присутствие вируса в организме можно увидеть по анализу мочи, при появлении в ней билирубина, она начинает светлеть. У здорового человека в моче оно не выявляется, при наличии гепатита А наблюдается повышение концентрации в составе мочи уробилиногена. При тяжелом течении патологии в моче выявляется наличие низкомолекулярных плазменных белков, которые не должны выявляться в моче здорового человека.
При общем анализе крови при гепатите А наблюдается снижение концентрации гемоглобина и лейкоцитов. Помимо этого фиксируется снижение концентрации тромбоцитов. Эти изменения свидетельствуют о наличии аномальных процессов в печени.
Биохимия крови позволяет выявить отклонения в концентрации печеночных ферментов. Такие отклонения свидетельствуют о патологических нарушениях в функционировании печени и разрушении гепатоцитов.
После проведения первичного осмотра и лабораторных анализов можно поставить диагноз, но для качественной диагностики требуется проведение дополнительных тестов и исследований.
Использование лабораторных методов
После ряда анализов врач-инфекционист направляет больного для количественных и качественных обследований гепатита А.
Существует ряд методик, позволяющих определить количество вируса в организме и степень его агрессивности.
Наиболее распространенными методами проведения такой диагностики являются:
- Иммуноферментная диагностика.
- Ультразвуковое исследование.
- Полимеразная цепная реакция.
Наиболее точной и специфической диагностикой является выявление РНК вируса в крови при помощи ПЦР.
Применение иммуноферментного обследования
Для точного определения наличия антител к вирусу необходимо проверить кровь на маркеры. Специфическими маркерами являются иммуноглобулины класса М анти-HAV IgM. Наличие этого компонента можно установить с первых дней после проникновения патогена в организм при помощи методики ИФА.
Иммуноглобулины появляются в организме больного в первые месяцы развития патологии. Выработка антител у больного происходит в независимости от тяжести, формы и симптомов болезни. Эти антитела носят название ранних, это связано с тем, что спустя полгода после инфицирования их уже невозможно выявить методом ИФА в организме. Спустя 6 месяцев наблюдается их возврат в крови пациента, после возвращения анти тела способны сохраняться в составе крови на протяжении всей жизни.
Наличие указанных антител к вирусу является доказательством того, что человек инфицировался гепатитом А и у него выработался иммунитет к этому патогену. Аналогичные антитела появляются у человека, если ему делалась прививка против вируса в качестве профилактики развития патологии.
Для определения наличия маркеров требуется сдать кровь для проведения лабораторных тестов. Сотрудники клинической лаборатории в процессе проведения тестов имеют возможность выявить не только само наличие антител, но и их количество в организме пациента.
Эта методика определения патологии относится к высокоточным лабораторным методам, требующим наличие специального оборудования и реактивов.
Проведение ультразвукового исследования
Применение ультразвукового исследования позволяет выявить наличие нарушений вызванных инфекционным процессом в структуре и форме печени. Такие нарушения являются частым спутником при развитии у человека гепатита А.
В процессе исследования выявляется наличие пятен на органе что говорит о повышении эхогенности, наличие уплотнений может свидетельствовать о развитии в печени цирроза.
УЗИ может помочь диагностировать присутствие в железе любых серьезных изменений на самых ранних стадиях их прогрессирования. Так, например, при помощи ультразвука выявляются нарушения, возникающие в результате развития холестаза и цитолиза гепатоцитов.
УЗИ может быть назначено человеку для подтверждения наличия вирусной инфекции даже в случае наличия у него на руках результатов ИФА, это требуется для того чтобы определить полную картину развивающихся патологических изменений в тканях железы.
Для получения максимально точной картины нарушений УЗИ рекомендуется проводить натощак, а за два дня до процедуры исключить из рациона питания такие продукты как:
- горох;
- фасоль;
- свежие фрукты;
- молоко;
- капусту;
- соки.
Исключение указанных компонентов из рациона связано с тем, что они усиливают процессы газообразования, а это в свою очередь приводит к неточностям при проведении ультразвукового обследования.
Осуществление обследования ПЦР
Метод ПЦР дает возможность определить уровень нуклеиновых кислот и присутствие чужеродной ДНК или РНК.
Использование ПЦР позволяет выявить генетический материал патогена еще на самой начальной стадии, когда в составе крови отсутствуют антитела. Эта методика диагностики является наиболее многогранной и точной, что позволяет проводить наиболее раннюю диагностику заболевания.
Использование этого метода оправдано в тех случаях, когда требуется получение наиболее точного результата в максимально короткие сроки для предотвращения распространения инфекционного процесса.
Недостатком методики является высокая стоимость инструментов необходимых в процессе анализа, а также его недоступность в целом ряде стран с высокой степенью распространения вирусной инфекции.
Методика ПЦР дает возможность определить чувствительность вируса к определенным противовирусным препаратам и определяет точное расположение очагов заболевания – мест наибольшего скопления частиц патогена. Наличие у лечащего врача такой информации позволяет подобрать наиболее оптимальный вариант проведения терапевтических мероприятий.
Специфичность методики составляет около 98%. Наличие у ПЦР высокой степени чувствительности позволяет его использовать, как наиболее показательный при проведении диагностики гепатита А.
Источник
В настоящее время в категории вирусных
гепатитов рассматривается 7 амостоятельных
нозологических форм: гепатиты А, В, С,
D, E, F, G. По путям передачи вирусные
гепатиты делят на:
1. Энтеральные,
передающиеся фекально-оральным путём.
К ним относятся гепатиты А, Е и,
очевидно, F.
2. Парентеральные,
передающиеся через парентеральные
манипуляции, включая, в естественных
условиях, трансплацентарный и половой
пути передачи. К ним относятся гепатиты
В, С, D, G.
Наибольшее
распространение получили гепатиты А,
В, С, сравнительная характеристика
которых представлена в табл. 3.
Таблица 3
Сравнительная характеристика вирусных гепатитов а, в, с
Признак | Гепатит А | Гепатит В | Гепатит С |
Вирус (семейство) | Picomaviridae | Hepadnaviridae | Flaviviridae |
Тип нуклеиновой | однонитчатая | двунитчатая ДНК | однонитчатая |
Размер вириона | 27-32 нм | 42-45 нм | 30-60 нм |
Суперкапсид | отсутствует | имеется | имеется |
Путь заражения | фекально-оральный | парентеральный | парентеральный |
Инкубационный | в среднем 25-30 | в среднем 60-90 | в среднем 35-70 |
Возрастные группы | преимущественно | дети и взрослые | дети и взрослые |
Сезонность | чаше август-сентябрь | в течение всего | в течение всего |
Переход в | отсутствует | имеет место | имеет место в 50 % случаев |
Носительство | отсутствует | длительное | длительное |
Онкогенность | отсутствует | имеет место | имеет место |
I.
Гепатит А (гА).
Лабораторная диагностика гА основывается
либо на выявлении самого возбудителя
(метод иммунной электронной микроскопии
— ИЭМ), его антигенов (радиоиммунный,
иммуноферментный, иммунофлюорес-центный
метод — РИА, ИФА, ИФ) или антител к вирусу
гА (РИА, ИФА).
Для ранней
диагностики заболевания, а также
выявления источников инфекции
используется определение антигена
вируса гА в фекалиях больных, где он
появляется за 7-10 дней до клинических
симптомов и в первые дни заболевания.
Из
определяемых в настоящее время
специфических маркёров гА важнейшими
являются антитела класса Ig M к вирусу
гА, которые появляются в сыворотке крови
и слюне уже в начале заболевания и
сохраняются в течение 3-6 месяцев.
Обнаружение антител класса Ig M к вирусу
гА однозначно свидетельствует
о гепатите А и используется для диагностики
заболевания, в том числе и бессимптомных
случаев инфекции,и выявления источников
инфекции в очагах.
Антитела
к вирусу гА класса Ig
G
выявляются с 3-4-й недели заболевания и
сохраняются длительно, что позволяет
оценить состояние иммунитета населения,
динамику специфического гуморального
иммунитета.
Вирус
гепатита А в материале от больного можно
выявить методом иммунной
электронной микроскопии. В основе метода
лежит смешивание суспензии вируса
с антисывороткой, отделение иммунных
комплексов и исследование их
в электронном микроскопе.
II.
Гепатит В (гВ). В
организме людей, заражённых вирусом
гВ, с разной частотой
и на разных этапах могут выявляться
серологические маркёры: поверхностный
HBs
Ag
и сердцевинный НВе Ag,
а также антитела к ним (anti-НВс,
anti-HBe,
anti-HBs).
Динамика их появления и интерпретация
результатов представлены
в табл. 4 и 5.
Таблица 4
Источник
Диагностика гепатита А основана на эпидемиологических, клинических и лабораторных данных. Лабораторная диагностика основана на выявлении маркеров репликации вируса — антител IgM и IgG к антигенам возбудителя и проведение генетического анализа — обнаружение в сыворотке крови вирусной РНК. Ограниченное значение имеет методика выявления антигенов вируса, что связано с тем, что пик их образования приходится на период инкубации и самый ранний желтушный период. Культуральное исследование для диагностики гепатита А используется редко. На многослойных культурах клеток вирусы не растут. Предпочтение отдается лейкоцитарным или органным культурам.
Рис. 1. Желтуха у больного.
Клинические данные, указывающие на гепатит А
При диагностике заболевания следует учитывать тот факт, что наиболее часто заболевание регистрируется у детей от 5 до 14 лет. У детей в возрасте до 5-и лет в 80% болезнь протекает бессимптомно в безжелтушной форме. У детей старшего возраста и взрослых желтушная форма заболевания регистрируется в 70% случаев.
На наличие у больного гепатита А указывают следующие клинические данные:
- Контакт с больным гепатитом А, употребление воды из непроверенных источников, немытых овощей и фруктов и др., посещение стран Азии, Африки и Латинской Америки в среднем за 14 — 28 дней до заболевания. Амплитуда колебания инкубационного периода находится в пределах 7 — 50 дней.
- Острое начало заболевания с гипертермией, интоксикационным, диспептическим и астеновегетативным синдромами.
- При желтушной форме заболевания преджелтушный период короткий.
- Улучшение самочувствия больного с появлением желтухи.
- Значительное повышение (в 5 — 40 раз) уровня аминотрансфераз (АЛТ и АСТ) в сыворотке крови и тимоловой пробы.
Для диагностики гепатита А используется, в основном, сыворотка крови и фекальные массы.
Рис. 2. Потемнение мочи и обесцвечивание кала — опорные признаки болезни.
к содержанию ↑
Диагностика заболевания с помощью серологических исследований
Идентифицировать гепатит в острой фазе можно только путем выявления в сыворотке крови специфических антител IgM и IgG. Данные маркеры заболевания выявляются с помощью серологических реакций ИФА (иммуноферментный анализ) и РИА (радиоиммунный анализ). Оба метода диагностики высокоспецифичны и высокочувствительны. При постановке РИА используются специфические IgG меченные радионуклидом 125И, при постановке ИФА — ферментом пероксидазой. С помощью реакции иммуннофллюоросценции можно исследовать биоптаты печени. Серологические методы диагностики используются также с целью эпидемиологического обследования контактных лиц.
- IgМ начинают вырабатываться в организме больного уже с конца инкубационного периода и присутствуют в крови в течение 3 — 6 месяцев после перенесенного заболевания.
- IgG начинают вырабатываться на 2 — 3 неделе заболевания и в последующем присутствуют в сыворотке крови пациента в течение всей жизни.
В разных регионах удельный вес здоровых лиц, имеющих антитела IgG в сыворотке крови к вирусу гепатита А, составляет от 30 до 60%.
Рис. 3. Антитела вырабатываются клетками иммунной системы больного в ответ на антигены вируса гепатита. Чем выше иммунный ответ, тем больше концентрация антител в сыворотке крови.
Антитела (иммуноглобулины) класса IgМ
IgМ («ранние» антитела) первыми вступают в борьбу с чужеродными микроорганизмами. Они начинают вырабатываться в организме больного уже с конца инкубационного периода — за 5 — 10 дней до появления первых симптомов гепатита А. Титр IgМ возрастает в 4 раза в первые 3 — 6 недель и далее постепенно снижается. Через 6 -8 месяцев (иногда 12 — 18 месяцев) IgМ исчезают. С помощью IgМ выявляется гепатит А, протекающий в безжелтушной, стертой и субклинической формах.
Определение антител к вирусу гепатита А класса IgМ является основным тестом специфической диагностики гепатита А. Их присутствие в сыворотке крови говорит об острой фазе или недавно перенесенном заболевании.
Антитела (иммуноглобулины) класса IgG
«Поздние» антитела IgG начинают вырабатываться иммунной системой на 2 — 3 неделе заболевания. Их титр нарастает медленно, максимум определяется на 4 — 6 неделе болезни и далее постепенно снижается. В последующем IgG присутствуют в сыворотке крови пациента в течение всей жизни. Обнаружение в сыворотке крови антител IgG у здоровых лиц говорит о ранее перенесенном заболевании. Специфические IgG вырабатываются у вакцинированных лиц.
Антитела (иммуноглобулины) класса IgА
Антитела класса IgA накапливаются в слизистых оболочках кишечника, верхних дыхательных и мочеполовых путей, они содержаться в слюне, слезной жидкости, молозиве и молоке и первыми защищают организм от чужеродных микроорганизмов. В сыворотке крови появление антител IgA происходит параллельно с появлением антител IgМ, но исчезают IgA из крови значительно быстрее. Антитела IgA определяются в фекалиях.
Рис. 4. Специфические антитела IgM и IgG выявляются с помощью серологических реакций ИФА (иммуноферментный анализ) и РИА (радиоиммунный анализ).
к содержанию ↑
Анализ кала на гепатит А
Антигены вируса гепатита А можно выявить в экстрактах фекалий больного, для чего используются иммуноэлектронная микроскопия, иммуноферментный и радиоиммунный анализы. Наличие вирусов в каловых массах больного является 100% подтверждением диагноза, но их отсутствие не исключает наличие гепатита А.
к содержанию ↑
Диагностика заболевания с помощью ПЦР
РНК вируса (генетический материал) выявляют в сыворотке крови больного, фекальных экстрактах, пищевых продуктах и воде (водоемы, стоки и др.) с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Чувствительность данного метода диагностики составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, специфичность — 98%. РНК вируса выявляются с 3-й недели заболевания и еще около 20-и дней после появления первых симптомов заболевания. РНК вируса в фекалиях выявляются с 3-й недели заболевания и еще около 3-х месяцев после появления первых симптомов заболевания.
Рис. 5. РНК вирусов определяются методом проведения ПЦР.
к содержанию ↑
Выделение вирусов у лабораторных животных
Выделить вирусы гепатита А можно при заражении восприимчивых животных (обезьян мармозеток, шимпанзе или павианов), что производится только в высокоспециализированных лабораториях. Материал, полученный от зараженных животных, подвергается исследованию на обнаружение самих возбудителей и его антигенов вышеописанными способами.
Рис. 6. Выделить вирусы гепатита А можно при заражении восприимчивых животных (обезьян мармозет, шимпанзе или павианов), что производится только в высокоспециализированных лабораториях.
к содержанию ↑
Клинические и биохимические анализы
Клинические анализы при диагностике гепатита А, имеющие диагностическое значение:
- Лейкопения или нормоцитоз.
- Относительный лимфоцитоз.
- Замедление СОЭ.
Биохимические анализы при диагностике заболевания, имеющие диагностическое значение:
- Непродолжительное (в течение 1 — 2 недель) повышение активности аминотрансфераз АЛТ и АСТ в 5 — 40 раз. Их нормализация регистрируется к 21 дню заболевания.
- Повышение уровня билирубина непродолжительное (1 — 2 недели), умеренное. Полная нормализация отмечается на 3-й неделе заболевания.
- Значительное повышение тимоловой пробы в первые 10 дней желтушного периода.
- Повышение уровня щелочной фосфатазы.
- В случае развития на фоне основного заболевания панкреатита отмечается повышение уровня амилазы в моче и крови.
- В случае развития основного заболевания на фоне алкогольной интоксикации в крови регистрируются высокие показатели у-ГТ (гамма-глютамилтрансферазы).
Рис. 7. У детей в возрасте до 5-и лет болезнь в желтушной форме протекает в 20% случаев. В 80% — бессимптомно в безжелтушной форме.
к содержанию ↑
Дифференциальная диагностика
Дифференциальную диагностику гепатита А следует проводить со следующими заболеваниями:
- Вирусные гепатиты С, В и Е.
- При безжелтушной форме в ранний, дожелтушный периоды, зачастую гепатит А протекает под маской ОРЗ или пищевой токсикоинфекции.
- Рак большого сосочка 12-и перстной кишки.
- Хронический гепатит и цирроз печени.
- С желтухой могут протекать инфекционный мононуклеоз, токсоплазмоз, лептоспироз, псевдотуберкулез, цитомегаловирусная инфекция.
Рис. 8. Пожелтение кожи при гепатите.
Гепатит А
Статьи раздела «Гепатит А»
Самое популярное
ПОНРАВИЛАСЬ СТАТЬЯ?
Подпишитесь на нашу рассылку!
Источник