Железо в крови при гепатите с

Перевод статьи:
“Влияние уменьшения содержания железа в организме при HCV инфекции”

Авторы: Massimo Franchini, Giovanni Targher, Franco Capra, Martina Montagnana, and Giuseppe Lippi (Верона, Италия)

Опубликовано в журнале Hepatology International, сентябрь 2008.

Оригинал статьи на английском: https://www.pubmedcentral.nih.gov/articl … d=19669262
—————

Аннотация

Увеличивается количество доказательств того, что перегрузка железом, частая находка при HCV инфекции, играет важную роль в патофизиологии этого заболевания. Механизмы, посредством которых перегрузка железом вызывает повреждение печени, наряду с преимуществами уменьшения содержания железа с помощью кровопусканий, на биохимических и гистологических результатах у пациентов с хронической инфекцией HCV, обсуждаются в этом обзоре.

Введение.

HCV инфекция, которая затрагивает почти 2 % народонаселения, является значимой причиной болезней печени во всем мире. После острой инфекции HCV хроническое носительство установлено у около 80 % зараженных людей. Хотя много носителей вируса не имеют симптомов, хроническое заболевание часто сопровождается измененной функцией печени и прогрессирующей болезнью печени с кульминацией в виде цирроза печени или ГЦК у 20 % зараженных людей [1].

Легкая-умеренная перегрузка железом – частая находка среди пациентов с хронической инфекцией HCV; действительно, до 30-40 % из них может показать увеличенное насыщение трансферрина и увеличение ферритина сыворотки крови или увеличенную концентрацию железа в печени [2, 3]. С другой стороны, увеличенные индексы железа кореллируют с прогрессированием болезни печени и уменьшением ответа на антивирусную терапию [4-9].

Связь между перегрузкой железом и хронической инфекцией HCV, наряду с влиянием удаления железа на течение хронической инфекции HCV и ответ на антивирусную терапию, обсуждается в этом обзоре.

Источники

Мы сначала выполнили электронный поиск на MEDLINE, EMBASE, SCOPUS, и базах данных OVID без временных пределов, используя различные комбинации следующих ключевых слов: «кровопускание», “истощение запасов железа”, “перегрузка железом” “железное сокращение,” “гепатит C вирусная инфекция,” «HCV», “хронический гепатит C,” “антивирусная терапия,” «интерферон», и «рибавирин». Кроме того, библиографические ссылки всех восстановленных исследований и обзоров были оценены для дополнительных сообщений клинических испытаний. Только статьи с полным текстом, опубликованные на английском языке, рассмотрели в этом обзоре.

Перегрузка железом и хроническая инфекция HCV

Механизм гепатотоксичности перегрузки железом при хронической инфекции HCV все еще остается неясен. Распределение железа преимущественно в пределах купферовских клеток и портальных макрофагов, корреляция между печеночной воспалительной деятельностью и накоплением железа, и сокращение содержания железа в печени после ответа на интерферотерапию предполагает, что перегрузка железом печени – результат некроза гепатоцитов, который приводит к освобождению ферритина из гепатоцитов с последующим захватом его макрофагами [10-12]. Однако, другой возможный механизм, объясняющий увеличенное содержание железа, может быть увеличенным кишечным поглощением железа. Действительно, недавние исследования обнаружили уменьшенные уровни гепсидина (пептидного гормона, произведенного в печени, который имеет запрещающий эффект на поглощение железа), и увеличение уровня transferrin рецептора 2 (который расположен на мембране гепатоцита и вовлечен в процесс захвата железа гепатоцитом) при хронической инфекции HCV [13]. Таким образом, результирующий эффект этих отклонений может быть быть в увеличенной доставке железа к гепатоцитам из запасов железа макрофагов и кишечной слизистой оболочки.

Лишнее железо увеличивает формирование реактивных кислородных разновидностей, приводящих к пероксидации липидов, повреждению белков и ДНК, и таким образом мембран клеток и геномного повреждения. Реактивные кислородные разновидности, которые включают гидроксильные радикалы, могут вызвать активацию и пролиферацию звездообразных клеток печени, увеличение синтеза smooth muscle actin и коллагена, таким образом, способствуя печеночному фиброгенезу [11, 14, 15]. Исследования “в пробирке” также предполагают, что размещение железа в гепатоцитах улучшает репликацию HCV, таким образом, помогая вирусной инфекции в печени [16]. Кроме того, эти гидроксильные радикалы, как известно, производят промутагенные основания, такие как 8-гидрокси-2-дезоксигуанозин (8-OHdG), которые вовлечены в спонтанный процесс мутации и онкомутации ДНК [12].

Наконец, генные мутации гемохроматоза могут играть роль в патогенезе перегрузки железом среди пациентов с хронической инфекцией HCV [17]. Действительно, после начального наблюдения Smith с коллегами [18], в котором у HCV-зараженных пациентов, которые были носителями мутации C282Y, были более высокие уровни ферритина сыворотки, чем у пациентов с гомозиготой для дикого типа гена HFE, несколько других сообщений показали, что гетерозиготные HFE мутации являются более частыми и связаны с увеличенным накоплением железа среди пациентов с хронической инфекцией HCV [19-24]. Однако, исследования отношения между мутациями HFE и прогрессированием хронической инфекции HCV дали противоречивые результаты. Действительно, в то время как некоторые исследования нашли положительную корреляцию между мутациями HFE и степенью болезни печени [19, 22, 25–30], другие исследования не показали такой корелляции [31-36]. Методологические или популяционные различия в исследованиях могли быть причиной этих несоответствующих результатов [37]. Например, Tung и коллеги [19] изучили гистологию печени в 316 пациентах с хронической инфекцией HCV на различных стадиях и нашли, что присутствие мутаций HFE было связано с содержанием железна и продвинутым фиброзом в пациентах с компенсированной болезнью печени. Напротив, Thorburn и коллеги [31], выполнившие биопсии печени у 164 хронически HCV-зараженных пациентах наблюдали, что носительство мутации HFE не играло роли в накоплении железа или прогрессировании болезни печени.

Влияние уменьшения запасов железа на состояние печени при хронической HCV-инфекции

Несколько исследований в группах оценивали эффекты уменьшения запасов железа в организме при хронической инфекции HCV [38-46]. В большинстве исследований выполняли кровопускания 400-500 мл цельной крови каждую 1 или 2 недели до развития железодефицитной анемии. Hayashi и коллеги [39] первые сообщили, что уменьшение запасов железа, достигнутое повторными кровопусканиями, привело к нормализации уровня АЛТ в 5 из 10 пациентов. Уровни АЛТ сыворотки значительно уменьшились во всех пациентах (от 152 ± 49 — 55 ± 32 U/L, P <0.001). Согласно сообщению Piperno с коллегами [41], уровни АЛТ сыворотки значительно улучшились у 32 пациентов, подвергшихся терапии уменьшения запасов железа с хронической инфекцией HCV. О подобных результатах впоследствии сообщили другие группы, в которых применялись кровопускания [42-45]. Однако, значимого сокращения сывороточного уровня РНК HCV не наблюдалось [42, 46]. Долгосрочный эффект кроваопусканий на биохимических и гистологических параметрах хронической инфекции HCV был показан Yano и коллегами в 25 пациентах, подвергающихся 5-летней программе [47] поддерживающих кровопусканий. Авторы обнаружили, что средние уровни АЛТ сыворотки значительно уменьшились во время начальной стадии программы кровопусканий (от 117 до 75 U/l, P <0.05), и это улучшение сохранилось во время всего периода исследования. Кроме того, кровопускания оказались способны предотвратить прогрессирование заболевания по гистологии печени, потому что выраженность фиброза печени (staging score) уменьшилась от 2.3 до 1.7 (P <0.05) в группе выполнявших кровопускания, тогда как среднее значение в контрольной группе увеличились от 1.7 в начале к 2.0 в конце (P = не достоверно). Аналогично, выраженность воспламенения (grading score) оставалась неизменной в группе, выполнявшей кровопускания (1.8 против 2.0, P=не достоверно), но прогрессировала в контрольной группе (2.0 против 2.9, P <0.005). Таким образом, авторы пришли к выводу, что долгосрочная поддерживающая терапия удаления железа — безопасная и эффективная альтернатива интерферонотерапии и может быть особенно показана для тех пациентов, которые не отвечают на антивирусную терапию или не могут переносить применяемые в ней препараты.

Недавно, Alexander и коллеги [48] нашли, что уменьшение содержания железа в организме было связано с биохимическим ответом у 22 % пациентов, которые не отвечали на монотерапию интерфероном, и что среди пациентов с нормализацией АЛТ сыворотки, было значительное сокращение сывороточных маркеров фиброза печени (проколлаген III пептидов). Kaito и коллеги [49] нашли, что терапия уменьшения содержания железа в организме кровопусканиями значительно уменьшала преоксидацию липидов и окислительный стресс, посредством которых перегрузка железом оказывает вредное влияние на печень.

Наконец, исследования в других группах продемонстрировали, что совместное применение диеты с низким содержанием железа и кровопусканий имеет дополнительный эффект в устранении вызванного железом окислительного стресса [50, 51]. Действительно, в исследовании, проводимом Kato и коллегами [51], 34 пациента с хронической инфекцией HCV, нечувствительных к терапии IFN, поддерживались в железодефицитном состоянии кровопусканиями и диетой с низким содержанием железа в течение 6 лет. Эта терапия была связана с высоким процентом биохимического ответа (65 %), улучшением гистологии печени, сокращения печеночных уровней 8-OHdG, маркера окислительного стресса. В недавнем исследовании те же самые авторы продемонстрировали, что долгосрочная терапия кровопусканиями в сочетании с диетой с низким содержанием железа уменьшала риск прогрессирования хронической инфекции HCV в гепатоцеллюлярную карциному [52].

Влияние уменьшения содержания железа на антивирусную терапию

Основываясь на находках, что перегрузка железом связана с более продвинутой стадией заболевания печени и том, что увеличенная концентрация железа в печени предполагает слабый ответ на монотерапию IFN [4, 9], некоторые исследователи оценили воздействие кровопусканий на ответ IFN-терапии хронической инфекции HCV [38, 41, 46, 53–60]. В исследовании 81 пациента с хронической инфекцией HCV Piperno и коллеги [41] обнаружили, что уменьшение содержания железа кровопусканиями не улучшало ответ на IFN-α у наивных (не получавших ранее лечение) пациентов и неответчиков. Аналогично, Herrera [46] и Guyader и коллеги [53] получили, что истощение запасов железа не эффективно для стимулировании вирусного ответа у пациентов с хронической инфекцией HCV, которые не отвечали на IFN-терапию. В мультицентровом проспективном рандомизированном контролируемом исследовании на 96 IFN-неответчиках с хронической инфекцией HCV, Di Bisceglie и коллегами [55] сравнивали уменьшение содержания железа кровопусканиями с уменьшением содержания железа плюс повторным леченим IFN. Они пришли к выводам, что хотя предшествующая терапия кровопусканиями не улучшала процент устойчивого ответа при повторном лечении IFN, эта терапия привела и к уменьшению уровней АЛТ сыворотки и к небольшому улучшению гистопатологии печени. Напротив, Tsai и коллеги [54] заметили, что перелечивание IFN, которому предшествовало истощение запасов железа, помогла 15 % пациентов из числа неответчиков. В мультицентровом исследовании Fargion и коллеги [56] рандомизировали 114 ранее нелеченных пациентов с хронической инфекцией HCV, чтобы они получали монотерапию IFN или кровопускания с последующей терапией IFN, и нашли, что удаление железа улучшило степень ответа на IFN. Фактически, у пациентов в группе комбинации (кровопускания с последующей терапией IFN), было 2.32 отношение разногласий (95%-ый доверительный интервал = 0.96–6.24) получения устойчивого вирусологического ответа по сравнению с пациентами в группе монотерапии IFN. Точно так же, сокращение некровоспалительной активности и улучшение ответа на IFN наблюдались Carlo и др. [57] в группе пациентов, которые подверглись кровопусканиям перед антивирусной терапией.

Три рандомизированных исследования сравнили комбинацию уменьшения запасов железа с IFN-терапией и монотерапию IFN [57-59]. Van Thiel и коллеги [58] показали, что такая комбинированная терапия была эффективна для неответчиков IFN (60 % длительного вирусологического ответа в группе комбинированной терапии по сравнению с 13 % в группа монотерапии IFN). Однако, усиленный режим IFN, используемый в этом исследовании (5 ME ежедневно), мог вызвать высокий процент наблюдаемого вирусологического ответа. Fong и коллеги [59] наблюдали более высокий процент длительных вирусологических ответов у наивных пациентов, леченых кровопусканиями до и во время IFN-терапии, чем у тех, которые получали один только IFN (29 % против 5 %). В подобном испытании Fontana и коллеги [60] показали, что сокращение содржания железа с помощью кровопусканий улучшило вирусологический и гистологический ответ на терапию IFN. Недавно, Desai и др. [61] выполнили метаанализ шести проспективных рандомизированных контролируемых исследований и нашли, что кровопускания улучшают ответ на IFN в пациентах с хронической инфекцией HCV.

Заключение

В целом, данные литературы предполагают, что истощение запасов железа с помощью кровопусканий улучшает биохимические и гистологические результаты у пациентов с хронической инфекцией HCV. Кроме того, в многих исследованиях обнаружено, что истощение запасов железа, объединенное с монотерапией IFN, может улучшить процент вирусологического ответа у ранее нелеченых и неответчиков

Заметим, недавние исследования показали, что концентрация железа в печени не влияет на ответ на антивирусную терапию интерфероном с рибавирином [62, 63]. Кроме того, железодефицитная анемия из-за повторных кровопусканий может быть фактором риска для неудачного результата комбинированной антивирусной терапии из-за снижения дозы рибавирина. Таким образом, будет интересно посмотреть результаты будущих рандомизированных контролируемых исследований, оценивающих эффективность комбинированной терапии истощения запасов железа с пегилированным IFN и рибавирином при лечении хронической инфекции HCV.

Лабораторные показатели при гепатите С позволяют определить общее состояние здоровья человека, степень, стадию, вирусную нагрузку, генотип заболевания. Гепатит имеет скрытое течение и часто выявляется в процессе обычных исследований крови. Также сдача анализов необходима перед началом и в процессе противовирусного лечения для оценки его эффективности. Чем раньше выявляется гепатит С, тем больше шансов на полное выздоровление. 

Что покажут анализы на гепатит при инфекции

Показатели анализов при гепатите С сначала оценивает терапевт. После основных анализов врач может направить больного на дополнительное обследование: биопсию, УЗИ печени. Это позволит увидеть полную картину заболевания. 

ИФА

Исследуя показатели крови при гепатите С, обязательно назначают иммуноферментный анализ (ИФА). Он показывает ответ иммунной системы на столкновение с вирусом HCV. На момент проведения обследования количество патогенных клеток может быть очень мало, а антитела к вирусу гепатита С уже циркулируют в кровеносной системе. Появляются они в срок от нескольких дней до 2 недель после инфицирования. 

Анализ показывает только наличие и количество иммуноглобулинов G и М, поэтому диагноз с точностью поставить невозможно. Можно лишь определить стадию гепатита.

По иммуноглобулинам М видно, что человек только заразился. Это говорит об острой фазе патологии. Иммуноглобулины G свидетельствуют о хроническом течении болезни (более 6 месяцев) или об инфицировании в прошлом. 

При исследовании показателей крови методом ИФА можно получить псевдоотрицательный результат. Это значит, что инфицирование произошло недавно и антитела еще не успели выработаться. Врачи называют этот период «диагностическим окном», который может длиться до полугода. 

Также возможен ложноположительный результат, когда реагент связывается с неспецифическим белком сыворотки крови. Такой показатель возможен при:

• наличии онкологии;

• вакцинации, которая была проведена накануне взятия крови;

• туберкулезе;

• склеродермии, рассеянном склерозе и прочих аутоиммунных заболеваниях;

• повышенной температуре тела.

Чтобы получить точные показатели, результаты ИФА интерпретируют совместно с ПЦР. 

ПЦР

Полимеразная цепная реакция проводится для выявления РНК вируса в крови человека. Выделяется несколько видов ПЦР-анализа:

• Качественный, благодаря которому выявляется генетический материал HCV.

• Количественный анализ. Предназначен для определения вирусной нагрузки при гепатите С. Обязателен перед началом противовирусного лечения, а после на 1, 4, 12 и 24 неделе терапии для оценки ее эффективности.

• Генотипирование для выявления генотипа вируса гепатита, поскольку он постоянно мутирует.

Расшифровкой показателей занимается врач-гепатолог. Он интерпретирует их в комплексе с результатами ИФА, биохимии крови, УЗИ и биопсии. В заключении при сдаче качественного анализа пишется:

• Обнаружено. Это означает, что в крови человека выявлен генетический материал HCV, и инфицирование подтверждается.
• Не обнаружено. Заражение не подтверждено или уровень РНК возбудителя находится ниже границы чувствительности аппаратуры. 

Показатели количественного анализа:

Расшифровка показателей генотипирования:

Когда анализ ПЦР является отрицательным, а ИФА — положительным, это означает, что человек ранее уже перенес гепатит С, но вылечился самостоятельно. 

Общеклинический анализ крови

Посредством общего анализа крови при гепатите С определяется его стадия. Исследование включает в себя много показателей, которые меняются при воспалительном процессе в организме. Вот что показывает клинический анализ крови при заражении гепатитом С:

• Уровень гемоглобина. У мужчин норма — 130-160 г/л, у женщин — 120-140 г/л. При хроническом гепатите С может оставаться в пределах нормы. Повышение показателей свидетельствует о гемохроматозе, снижение — о различных кровотечениях, приеме противовирусных препаратов. Если гемоглобин снижается ниже 100 г/л, ПВТ противопоказана. 
• Количество эритроцитов. Норма у женщин — 3,80–5,10×10¹² г/л, у мужчин — 3,50–5,7×10¹² г/л в зависимости от возраста. Снижение показателей может свидетельствовать о гемолитической анемии из-за диффузных изменений в печени. Увеличение (эритроцитоз) — о развитии гемохроматоза. 
• Лейкоциты и их фракции. Норма — 4-9×10⁹ г/л. Они могут быть в пределах нормальных значений или немного снижаться в зависимости от стадии гепатита С. Повышение лейкоцитов (лейкоцитоз) свидетельствует о том, что иммунные клетки активно борются с вирусом. При абсолютной лейкопении ниже 1,5 г/л ПВТ противопоказана. 
• Тромбоциты. Норма — 180-320 х 10⁹ г/л. При снижении этих показателей определяется дисфункция печени, нарушается свертываемость крови. Значительное сокращение клеток также может говорить об инфицировании HCV 1 генотипа. Если уровень тромбоцитов ниже 50 г/л, противовирусная терапия противопоказана. 
• СОЭ. Норма для мужчин 2-10 мм/ч, для женщин 2-15 мм/ч. Показатели увеличиваются при поражении клеток печени, серьезном воспалительном процессе в железе. Повышение происходит вследствие приема противовирусных лекарств. 

Показатели биохимического анализа при гепатите С

Биохимический анализ крови при гепатите С является одним из самых достоверных способов диагностики заболевания, степени поражения тканей печени и общего состояния здоровья больного. Сдается он натощак с утра. Последний раз можно кушать как минимум за 10 часов до сдачи крови. 

Билирубин

Это желчный пигмент, результат распада эритроцитов. Бывает прямым, непрямым и общим.

В норме показатели общего билирубина у женщин составляют от 8,5 до 19,8 мкмоль/л максимум, у мужчин — от 3,3 до 19 мкмоль/л максимум. 

У человека с патологическими изменениями в печени количество общего пигмента не превышает 21,0 мкмоль/л. О том, что началась гипербилирубинемия, свидетельствует концентрация более 17,1 мкмоль/л. Если показатели повышены (от 30 мкмоль/л), наблюдается желтушный синдром. При этом выделяется три его формы: 

• тяжелая (более 160 мкмоль/л);
• средняя (в пределах 87-160 мкмоль/л);
• легкая (менее 86 мкмоль/л). 

При достижении уровня 300 мкмоль/л развивается печеночная кома. 

АЛТ, АСТ и коэффициент де Ритиса

АЛТ (аланинаминотрансфераза) и АСТ (аспартатаминотрансфераза) — это ферменты, которые вырабатываются печенью. АСТ и АЛТ при гепатите С начинают активно распространяться за пределы железы.

Нормальный уровень АСТ у мужчин — до 47 МЕ/л, у женщин — до 30 МЕ/л. При гепатите С, который развивается без цирроза, этот показатель превышен в 4-6 раз, а с циррозом — в 6-10 раз. 

Норма АЛТ у мужчин — до 45 МЕ/л, у женщин — до 35 МЕ/л. В случае гепатита С без цирроза количество фермента возрастает в 6-10 раз, с циррозом — более, чем в 10 раз. 

Коэффициент де Ритиса — это соотношение АЛТ и АСТ. Вычисляется из полученных результатов исследования. Необходим для выявления проблем в работе печени и сердца. Самостоятельного значения он не имеет, рассчитывают только при отклонениях в показателях АЛТ и АСТ. У здорового человека коэффициент колеблется от 0,91 до 1,75. При снижении индекса менее 0,91 имеются проблемы с печенью. Если показатели варьируются от 0,55 до 0,83, это говорит о гепатите В и А, причем данные биохимические показатели видны за 2 недели до проявления первичных признаков. 

Белок

Концентрация общего белка в сыворотке крови зависит от синтеза и распада глобулинов и альбумина — двух главных белковых фракций. У взрослых показатели 66-83 г/л — в пределах нормы. Снижение показателей до 60-63 г/л может говорить о развитии хронических заболеваний печени, воспалительных процессов, злокачественных новообразований.

Расшифровка низких результатов показывает недостаточность функции печени (гепатиты, цирроз печени). Сокращение количества общего белка до 50 г/л часто сопровождается гипопротеинемическими отеками тканей. 

Щелочная фосфатаза

Это наиболее информативный фермент в анализе на печеночные пробы. При исследовании показателей при гепатите С внимание обращается на активность печеночного подвида. У взрослого здорового человека она лежит в пределах 30-90 Ед/л, у подростков — до 400 Ед/л, беременных женщин — до 250 Ед/л. 

Повышенный уровень щелочной фосфатазы (в 10 и более раз) свидетельствует о механической желтухе, связанной с затруднением секреции прямого билирубина в желчный пузырь и поступлением желчи в кишечник. Это часто происходит при хроническом гепатите С. 

Другие данные биохимии

При биохимическом исследовании крови выявляются также уровень креатинина. Это результат обмена белков в печени. Выводится вещество с мочой почками. Нормальные показатели у взрослых — 39,9-72 мкмоль/л. Когда уровень завышен, врачи подозревают нарушения в работе почек. Данный показатель необходимо проверять перед проведением противовирусной терапии для оценки ее безопасности.

Триглицериды — это жиры, которые содержатся в жировой ткани. Норма — 0,45-2,16 мкмоль/л для женщин, у мужчин — 0,61-3,62. Повышение этих показателей врач может расценивать как ожирение, сахарный диабет, заболевания печени (цирроз, гепатит, жировая дистрофия). Их уровень повышается также во время приема интерферонов. 

Показатели анализа мочи

Общеклинический анализ мочи при гепатите С влияет на состояние печени, мочевыделительной системы, метаболизма. При инфицировании HCV меняются физические свойства мочи:

1. на ее поверхности появляется пена;
2. в процессе хронического течения заболевания цвет меняется со светлого до темно-коричневого. 

При лабораторном исследовании выявляются следующие отклонения:

1. В урине появляется уробилиноген или билирубин — вещества, которые отсутствуют в моче у здорового человека.
2. Повышается уровень лейкоцитов из-за воспалительного процесса. 

Также увеличивается удельный вес мочи, поскольку возрастает концентрация веществ.