Бактериологический метод используют для диагностики гепатита
Маркер
Определение
Клиническая интерпретация
Маркеры гепатита А
вирусом гепатита А
Маркеры гепатита E
вирусом гепатита Е
Маркеры гепатита В
Один из важных показателей для назначения терапии препаратами интерферона
Антитела к HBeAg не являются защитными
Маркеры гепатита D (дельта)
Маркеры гепатита С
белков вируса гепатита C
+
типирование РНК вируса
определение методом ПЦР или реакции молекулярной гибридизации
Маркеры гепатита G
Источник: www.eurolab.md
Читайте также
Вид:
Источник
Микроскопический метод при дизентерии не применяется ввиду морфологического сходства шигелл с другими энтеробактериями.
Бактериологический метод является основным методом лабораторной диагностики дизентерии. Исследуемый материал засевают на среды Плоскирева и Эндо в чашках Петри, а также на селенитовую среду для накопления, с которой через 16— 18 ч делают пересев на указанные плотные питательные среды. Посевы выращивают в термостате при 370 С 18 — 24 часов.
На второй день изучают характер колоний. Бесцветные лактозоотрицательные гладкие колонии шигелл пересевают на одну из полиуглеводных сред (Олькеницкого, Ресселя, Клиглера) для накопления чистой культуры. На 3-й день учитывают характер роста на полиуглеводной среде, а также пересевают материал на дифференциальные среды (Гисса и др.) для биохимической идентификации выделенной культуры. Определяют антигенную структуру выделенной культуры с помощью ОРА с целью ее идентификации до уровней вида и серовара. На 4-й день учитывают результаты биохимической активности (табл. 14).
Таблица 14.Биохимические свойства шигелл
Виды шигелл | Ферментация | индол | |||||
Глюкозы | лактозы | маннита | дульцита | ксилозы | орнитина | ||
S. dysenteriae | К | — | — | — | — | — | — |
S. flexneri | К | — | к | — | — | — | — |
S. boydii | К | — | к | — | ± | — | — |
S. sonnei | К | ± | к | к + | ± | к | + |
Обозначения: «к» – ферментация субстрата с образованием кислоты, «+» — наличие признака, «-« — отсутствие признака, «±» — непостоянный признак.
Шигеллы, в отличие от эшерихий, являются неподвижными микроорганизмами, они не ферментируют лактозу, глюкозу разлагают без образования газа, не декарбоксилируют лизин. Для серотипирования сначала ставят РА на стекле со смесью сывороток против преобладающих в данной местности видов и вариантов шигелл, а затем РА на стекле с монорецепторными видовыми сыворотками. Определяют также чувствительность выделенной культуры к поливалентному дизентерийному бактериофагу и антибиотикам. С эпидемиологической целью определяют фаговар и колициновар выделенных шигелл. Одним из свойств шигелл является их способность вызывать кератит у морских свинок (кератоконъюнктивальная проба)
Серологический метод. Для определения антител в крови больных дизентерией (обычно хронической формой) применяют РНГА с эритроцитарными шигеллезными диагностикумами. Диагностические титры: к шигеллам Флекснера у взрослых — 1:400, у детей до 3 лет — 1:100, у детей старше 3 лет — 1:200, к остальным шигеллам — 1:200. Реакцию ставят, как правило, повторно с сывороткой крови, взятой не менее чем через 7 дней; диагностическое значение имеет нарастание титра антител в четыре и более раз.
Экспресс-методы при дизентерии — прямая и непрямая РИФ, реакция ко-агглютинации, ИФА, РНГА с антительными эритроцитарными диагностикумами для быстрого обнаружения шигелл в исследуемом материале (обычно в фекалиях), а также ПЦР.
Самостоятельная работа студентов
1. Изучить основные этапы выделения чистой культуры шигелл.Учесть посевы на среды Плоскирева, Левина, Олькеницкого (демонстрация). Отметить наличие лактозоотрицательных бесцветных колоний на средах Плоскирева, Левина.
2. Провести контроль чистоты выделенной культуры шигелл. Со среды Олькеницкого приготовить мазок, окрасить его по Граму и промикроскопировать. Промикроскопировать и зарисовать демонстрационные препараты возбудителей дизентерииSh.dysenteriae,Sh.flexneri,Sh.sonnei- грамотрицательные палочки с закругленными краями;
Источник: studfile.net
Читайте также
Вид:
Источник
Гепатит «С» сегодня во всем мире считается одним из наиболее тяжелых инфекционных заболеваний. Вызывает его РНК-содержащий вирус, который является одной из основных причин заболевания печени. Нередко симптомы у больного человека либо не проявляются вовсе, либо проявляются, но в скрытой форме — повышенная утомляемость, тошнота.
Вылечить гепатит «С» окончательно практически невозможно, а потому через некоторое время после инфицирования в 80% случаев он переходит в хроническую форму.Дальнейшее развитие заболевания у каждого пятого приводит к циррозу, который, в худшем варианте, ведет к гепатоклеточной карциноме. По оценкам экспертов, по всему миру количество носителей вируса гепатита «С» доходит до 700 миллионов человек.
Заразиться гепатитом «С» можно как от больного человека, так и от носителя вируса, даже если он себя еще не проявил. А при такой распространенности заболевания, своевременная высокоточная диагностика гепатита «С» сегодня является крайне актуальной проблемой. Сейчас существует несколько основных этапов диагностики гепатита «С». На первом этапе, для выявления антител к вирусу гепатита «С» обычно проводят серологический тест, в основе которого лежит иммуноферментный анализ (ИФА). Сам факт наличия антител говорит лишь о том, что человек болен гепатитом «С», но вот уточнить — последствия ли это перенесенной ранее инфекции, хроническая форма заболевания или острое его течение — невозможно.
При этом в ходе заболевания гепатитом «С» существует так называемое «серонегативное окно» — т.е. антитела появляются в крови больного человека не раньше, чем через 2-3 недели после начала заболевания. Известны даже случаи, когда такой период затягивается до 3 месяцев, и на протяжении всего этого времени серологические тесты дают отрицательный результат, несмотря на наличие вируса в крови. Серологические тесты (ИФА-тесты) пригодны для скрининга (первичного обследования) представителей всех групп риска и особенно рекомендуются в качестве первичной диагностики пациентам с клиническими признаками заболеваний печени.
Отрицательные результаты ИФА-тестирования с большой долей вероятности исключают гепатит «С». Однако, этого не достаточно для пациентов с иммунодефицитом и находящихся на гемодиализе. Существует также опасность попасть в период пресловутого «серонегативного окна». В этих случаях необходимо дополнительное обследование на наличие РНК вируса гепатита «С» методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
На данный момент разработаны специальные молекулярные тесты, которые позволяют при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) определить присутствие и количество генетического материала, т.е. РНК вируса гепатита «С» в крови. ПЦР, или полимеразная цепная реакция — один из основных методов молекулярной диагностики вирусов. Качественное обнаружение РНК говорит о стадии активной репликации вируса — т.е. о его активном размножении, что позволяет перейти к следующему этапу — проведению количественного анализа и к процессу генотипирования вируса, необходимых для правильного выбора курса лечения.
Для гистологического исследования тканей печени проводят биопсию. Этот метод получил свое название от латинского «био» — жизнь и «опсия» — смотрю. Заключается он в том, что у человека берут специальной тонкой иглой образец ткани, в данном случае печени, окрашивают его специальными красителями и изучают под микроскопом. При этом выявляются специфические изменения в клетках, которые происходят во время болезни. Биопсия используется для анализа состояния печени больного и принятия решения по дальнейшему ходу лечения.
После того, как наличие РНК вируса гепатита «С» в крови человека доказано, те же молекулярные тесты являются и показателем эффективности назначенного лечения. Т.е. эффективным считается лечение, при котором вирусная РНК не обнаруживается через 24 недели после прекращения приема лекарств. При этом длительность курса лечения рассчитывается согласно данным о количестве РНК вируса гепатита «С» в крови — так называемый показатель «вирусной нагрузки».
Для врача достаточно показательным является значение 8х105 МЕ/мл (2х106 копий/мл). Если концентрация вируса меньше этой цифры, то прогноз курса лечения считают благоприятным, если выше, то необходимо пробовать другие схемы лечения. Другим показателем эффективности терапии может служить скорость снижения концентрации РНК вируса гепатита «С». Если на третий день от начала лечения концентрация упала на 85% от исходных данных, то это доказывает, что лечение эффективно и дало ранний вирусологический ответ.
Таким образом, количественное определение вируса гепатита «С» в плазме крови является наиболее эффективным методом для диагностики заболевания, выбора терапии и для дальнейшего мониторинга — наблюдения за ходом болезни — независимо от того, какой препарат или схема лечения выбраны. Именно этот тест позволяет лечащему врачу подобрать наиболее оптимальную схему лечения для каждого пациента.
Лидеры и отстающие в диагностике гепатита «С» В России сейчас остро стоит проблема производства большого количества специальных диагностических наборов для определения гепатита «С». И в лабораториях российских НИИ по мере сил стараются эту потребность удовлетворить. Увы, во всем мире использование технологий производства диагностических наборов, подобных большинству российских, не соответствует мировым стандартам, что во многом объясняется сомнительным качеством реагентов: низкая чувствительность, отсутствие воспроизводимости результатов как внутри лаборатории, так и между лабораториями и т.д. Все это ведет к росту ошибочных результатов.
Так, в 1996 году при проведении первого Европейского цикла контроля качества выявления РНК вируса гепатита «С» из 136 обследованных лабораторий, только 22 смогли абсолютно правильно определить наличие или отсутствие вирусной РНК в предлагаемых контрольных пробах. Не лучший результат отмечен и в России в 2001 году — из 14 лабораторий-участников только 3 смогли правильно решить поставленную задачу.
Лидером разработки и массового производства диагностической аппаратуры и реагентов в области ПЦР-диагностики является швейцарская компания Хоффманн-Ля Рош. Длительная практика — с 1984 г. — позволила ей отработать до мелочей все тонкости постановки ПЦР-реакции и создать закрытую автоматическую систему «Кобас Ампликор». В ряде западных стран даже существует государственная программа диспансерного обследования населения по выявлению гепатитов при помощи этой технологии.
По материалам сайта: medinfo.com.ua
Перед применением препаратов, указанных на сайте, проконсультируйтесь с врачом.
Source: health.sarbc.ru
Читайте также
Вид:
Источник
Инфекционные болезни — это заболевания, вызванные проникновением в организм бактерий, грибков или вирусов. Самая важная часть диагностики инфекций — это определение возбудителя и его концентрации. Для этих целей используются разнообразные лабораторные методы, которые позволяют выяснить, чем именно и как давно атакован организм, а в некоторых случаях — спрогнозировать эффективность лечения тем или иным препаратом.
Особенности диагностики инфекционных заболеваний
В клинической практике данный тип заболеваний встречается очень часто. Именно они, по данным Всемирной организации здравоохранения, становятся причиной 26% всех смертей. В список самых распространенных инфекционных заболеваний входят инфекционная пневмония и другие воспалительные заболевания дыхательных путей, гепатит, ВИЧ, туберкулез, малярия, воспаления органов половой системы и мочевыводящих путей, гистоплазмоз, ротавирусные инфекционные заболевания, ветряная оспа, герпес, вирус папилломы человека и еще несколько десятков болезней. Хотя бы раз в жизни каждый из нас сталкивается с инфекционными заболеваниями и необходимостью быстрой постановки диагноза.
Все инфекционные болезни делятся на пять типов — прионные, вирусные, бактериальные, протозойные и грибковые поражения. Далее будут рассмотрены последние четыре типа как наиболее распространенные. Разные возбудители иногда могут вызывать одно и то же заболевание. В частности, пневмония может быть результатом как вирусной, так и бактериальной инфекции. Лечение зависит не от проявлений, а от возбудителя болезни. Противовирусные препараты бесполезны в борьбе с бактериями и грибками, антибиотики не действуют на вирусы. Поэтому основная задача лабораторной диагностики инфекционных заболеваний — выявление типа возбудителя.
На заметку
Слово «Прион» предложено в 1982 году американским врачом, профессором неврологии и биохимии Университета Калифорнии в Сан-Франциско Стенли Прузинером. Это особый класс возбудителей, состоящих их белка. Вызывают такие болезни, как болезнь Крейтцфельда — Якоба, куру, фатальная семейная бессонница.
Способы лабораторной диагностики инфекционных болезней можно разделить на два типа: неспецифические и специфические методы.
К неспецифическим относятся общий анализ крови и исследование соотношения ее белковых фракций, печеночные пробы, общий анализ мочи и кала. Эти методы не дают информации о виде возбудителя, но позволяют узнать, в какой мере болезнь затронула органы и системы организма, что именно в их работе нарушено и насколько далеко зашел процесс.
Специфические — вирусологический и бактериологический методы, микроскопическое исследование возбудителей, анализы на антигены и антитела — направлены непосредственно на обнаружение возбудителя.
Методы лабораторной диагностики бактериальных инфекций
Современная медицина располагает множеством методов выделения возбудителей бактериальной инфекции:
Бактериоскопический
. Исследуется окрашенный специальным образом мазок.
Бактериологический
. Биоматериал высеивается в питательную среду, и через некоторое время специалист исследует колонию бактерий, выросшую в ней.
Биологический
. Направлен на определение патогенности микроорганизмов.
Серологический
. Выявляет антитела и антигены в сыворотке крови — особые вещества, которые вырабатываются организмом при контакте с возбудителем определенной болезни.
Чаще всего для исследований используют кровь или сыворотку крови, реже — слюну, мочу, кал, клетки эпителия (мазок и соскоб) и другой биоматериал.
Диагностика вирусных инфекций
В лабораторной диагностике вирусных заболеваний используются:
Вирусологическое исследование
. Световая и электронная микроскопия дает возможность выявить наличие вирусных включений и сами вирусы и идентифицировать их.
Серологическое исследование
для обнаружения антител и антигенов. Этот метод дает возможность быстро выявить агрессора, как и в случае с бактериальными инфекциями. Для диагностики используются разнообразные способы исследования материала — реакции гемадсорбции, гемагглютинации или метод непрямой иммунофлюоресценции. Имунноблоттинг, в частности, позволяет выявлять антитела сразу к нескольким инфекциям и считается современным и точным диагностическим методом.
Молекулярно-генетические методы
. Последнее слово в лабораторной диагностике. Позволяют обнаружить вирус даже тогда, когда его концентрация ничтожно мала — то есть на самых ранних стадиях. Самым известным из этих методов является ПЦР, при которой фрагмент вируса многократно копируется до тех пор, пока специалист не получит достаточно материала для определения типа вируса и его изначальной концентрации.
Для выявления вирусов обычно требуется сделать анализ крови.
Справка
Вирусные включения представляют собой выявляемые с помощью микроскопа образования в клетках, которые возникли при внедрении в организм вируса.
Методы диагностики протозойных инфекций
Так называют инфекции, вызванные простейшими паразитами, например, амебами. Малярия, амёбиаз, токсоплазмоз, лямблиоз, трихомониаз, сонная болезнь — вот неполный список самых распространенных протозойных инфекций. Лабораторная диагностика таких заболеваний включает в себя следующие методы:
Микроскопический
. Простейшие паразиты выявляются путем исследования под микроскопом окрашенных образцов биоматериала. Самый простой и надежный метод для многих возбудителей.
Культуральный
. Посев биоматериала в питательную следу для дальнейшего исследования размножившихся простейших. У этого метода есть существенный недостаток: результатов нужно ждать долго, сам процесс может занять не менее 5-6-ти дней.
Серологический
. Используют редко ввиду малой информативности.
Аллергический
. Также не является распространенным. Кожные аллергопробы делают для того, чтобы подтвердить лейшманиоз и токсоплазмоз. Это вспомогательный диагностический метод.
В качестве биоматериала для исследований в основном используется кровь, иногда — – кал или моча.
Диагностика грибковых инфекций
Грибковые инфекции распространены не так широко, как вирусные или бактериальные потому, что они поражают в основном людей с ослабленным иммунитетом. Обычно при словах «грибковая инфекция» люди думают о заболеваниях кожи и ногтей, но сфера деятельности микозов шире: они могут поражать практически любые ткани. Самые распространенные грибковые поражения – это кандидоз, или молочница, микозы стоп, аспергиллез. При диагностике грибковых инфекций чаще всего используются следующие лабораторные методы:
Микроскопическое исследование
. Препарат окрашивается и рассматривается под мощным микроскопом. Посредством иммунофлюоресцентной микроскопии исследуется проба, помеченная флюоресцеинами — специальным красителем. Наиболее быстрый способ выявления грибка по сравнению с другими методами.
Культуральный
. Происходит посев пробы на питательную среду и дальнейшее исследование полученной в результате колонии грибков.
Серологический
. Используется для выявления грибковых поражений, однако для микозов он считается не особенно точным.
Гибридизация нуклеиновых кислот
. Самый современный способ выявления грибковых инфекций, его применяют для идентификации основных возбудителей системных микозов. Из культуры извлекается РНК и вносится особым способом помеченная молекула ДНК. Если в пробе наличествует один из основных патогенных грибков, ДНК объединится с его РНК, создав легко различимую структуру. Несомненным преимуществом метода является возможность определить инфекцию на самых ранних стадиях.
Биоматериалом для исследований являются клетки кожи, волос и ногтей, клетки слизистых оболочек (мазок или соскоб), мокрота, моча, секрет простаты, сперма, грудное молоко.
Современные методики диагностики инфекций позволяет выявить их на начальном этапе, Чем раньше болезнь будет обнаружена, тем проще ее вылечить. Поэтому сдавать анализы на инфекции желательно регулярно, даже если вы ни на что не жалуетесь и не замечаете никаких перемен в самочувствии.
Источник
