Цитокины при хроническом гепатите с

Use of Serum Levels of Proinflammatory Cytokine IL–1α in Chronic Hepatitis B
Источник: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4272509/

Причины хронической вирусной персистенции инфекции вируса гепатита В (HBV) неизвестны, но, вероятно, связаны с иммунными факторами хозяина. Цитокины играют важную роль в иммунной защите. Интерлейкин-1 (ИЛ-1) является провоспалительным цитокином, и в некоторых исследованиях показано, что продукция IL-1 была нарушена у пациентов с хроническими инфекциями вируса гепатита В, подразумевая, что ИЛ-1 может играть роль в разрешении вируса, прогрессировании фиброза и в злокачественном потенциале HBV. В этом исследовании наряду с обычными лабораторными исследованиями был проведен анализ уровней сывороточного провоспалительного цитокина IL-1 α в целях лучшего понимания и мониторинга хронического гепатита B.

Целью этого исследования было проанализировать полезность лабораторных тестов, которые обычно используются при оценке заболевания печени с указанными иммунологическими параметрами у пациентов с хроническим гепатитом B.

Всего 60 субъектов были разделены на две группы: положительная и отрицательная группы HBV-ПЦР. Была включена контрольная группа из 30 здоровых участников. Помимо стандартных лабораторных тестов, анализ включал сывороточные уровни цитокина IL-1 α.

IL-1α имел наивысшую среднюю концентрацию в группе 1-вирусного гепатита С с ПЦР-положительным тестом (5,73 пг / мл), а затем в группе 2-вирусного гепатита В, ПЦР-отрицательный тест (5,39 пг / мл). Тест ANOVA доказывает, что IL-1α в здоровой группе (3) отличается от других групп следующим образом: по отношению к группе 1 уровень статистической значимости был р

IL-1α был значительно повышен в воспалительных состояниях выраженной активности (ПЦР-положительный гепатит). IL-1α может играть важную роль в качестве маркера как воспаления, так и повреждения печени, особенно в ходе гепатита B. Результаты показывают, что воспалительные и иммунные параметры, проанализированные вместе, могут значительно способствовать пониманию и прогнозированию хронического повреждения печени. IL-1 может быть использован как важный показатель воспалительной активности и оценки фиброза и, в конечном счете, прогнозирования злокачественной трансформации при хроническом повреждении печени.

Иммунный ответ является ключевым компонентом активации и поддержания антивирусного иммунитета, путем индукции цитокинов и инициирования адаптивного иммунного ответа. Иммунорегуляторные цитокины влияют на сохранение хронической инфекции вируса гепатита В (HBV) и степени повреждения печени. Вирус гепатита B человека (HBV) может вызвать острый и хронический гепатит, цирроз и гепатоцеллюлярную карциному (1). Причины стойкой инфекции HBV неизвестны, но они, вероятно, связаны с иммунными факторами хозяина. Интерлейкин-1 (IL-1) играет важную роль в воспалении и регуляции иммунного ответа, а также в мембранной форме тримерного комплекса рецепторов IL-1 / IL-1 / mIL-1RAcP и демонстрирует, что HBeAg может вызывать реакцию хозяина IL-1 на связывание с mIL-1RAcP. Считается, что антиген HBV e (HBeAg), секретируемый белок и не требуется для репликации вируса, играет иммунорегуляторную роль во время вирусной инфекции. Однако функциональное участие HBeAg в иммунном ответе хозяина не было полностью выяснено. HBeAg может связываться с дополнительным белком рецептора интерлейкина-1 (IL-1RAcP) (2).

Провоспалительные цитокины участвуют в вирусном разминировании и при метаболических и вирусных заболеваниях печени. Th1 цитокины положительно коррелируют с воспалением печени при инфекции HBV. Функциональное нарушение, подавление или делеция антигенспецифических Т-клеток, по-видимому, является ключевым фактором, определяющим прогрессирование хронической и злокачественной прогрессирования. Важность среды цитокинов при определении вирусного клиренса была подчеркнута недавними исследованиями (3-7). Цитокины являются низкомолекулярными медиаторами сотовой связи, продуцируемыми множественными клеточными типами в печени, причем клетка Купфера критически важна. Провоспалительные цитокины, такие как интерлейкин-1, фактор некроза опухоли и интерлейкин-8, являются цитокинами острой фазы и играют роль в травме печени при острых и хронических заболеваниях печени (8).

Интерлейкин-1 (ИЛ-1) играет центральную роль в воспалительном процессе, особенно остром воспалении. Это показатель интенсивности воспалительной активности (9). В некоторых исследованиях было продемонстрировано, что продукция IL-1 была нарушена у пациентов с хроническим гепатитом B, что подразумевает, что IL-1 может играть роль в вирусном клиренсе, прогрессировании фиброза и злокачественном потенциале HBV (10-16).

Целью этого исследования было определить и проанализировать уровень IL-1α в сыворотке крови у пациентов с хроническим гепатитом В в соотношении присутствия вирусной генетической репликации и функционального статуса печени.

Исследование проводилось как открытое, однолетнее сравнительное клиническое испытание. Перед входом в исследование каждый пациент просмотрел и подписал информированное согласие. Все исследования, описанные в исследовании, с участием людей и материалов, полученных от людей, соответствовали этическим принципам. Стандарты хорошей клинической практики, хорошая лабораторная практика и декларация Хельсинки. Исследование проводилось на кафедре гастроэнтерологии и гепатологии Университета Сараево.

Пациенты

Всего было привлечено 90 пациентов одного пола, 18-80 лет. Критериями включения были пациенты с положительными антителами к HBV в сыворотке крови, проведен анализ полимеразной цепной реакции. Предыдущий диагноз биопсии печени гепатита В необходим не более чем за 6 месяцев до начала исследования. Критерии исключения: наличие заболевания печени, вызванного наследственным состоянием, циррозом печени и заболеваниями печени, возникающими во время беременности, сосудистыми заболеваниями печени, первичным билиарным циррозом, а также субъектами с трансплантацией печени, острым гепатитом, свидетельством острой или хронической воспалительный синдром другого известного происхождения, состояния иммунодефицита.

Респонденты с диагнозом хронического гепатита В — 60 пациентов были разделены на две группы:

Хронический гепатит B, положительный тест HBV-РНК-ПЦР,

Хронический гепатит B, отрицательный тест HBV-РНК-ПЦР.

Включена контрольная группа из 30 здоровых субъектов, а также 3 группы.

методы

Был проведен физический осмотр, и во время предварительного осмотра была проведена медицинская история. Следующие данные были зарегистрированы у всех пациентов: возраст, пол, ИМТ, история потребления наркотиков или прием переливания, история болезни печени, биопсия печени, сопутствующая патология. Были зарегистрированы биохимические параметры: полный анализ крови, международное нормированное соотношение (INR), активное частичное тромбопластиновое время (APTT) и обычные тесты функции печени, включая билирубин, аспартатаминотрансферазу (AST), аланинаминотрансферазу (ALT), щелочную фосфатазу и гамма-глутамилтрансферазу , протеинограмма. Использовалась полимеразная цепная реакция для обнаружения вирусной РНК в сыворотке.

Уровни сыворотки цитокина IL-1α, где определяли и измеряли методом количественного анализа сэндвич-ферментным иммуноанализом. Моноклональные антитела, специфичные для IL-1α, покрывали микрочастицами, которые вступали в контакт с образцом и основывались на возникновении определенного цвета, измеряя интенсивность, степень и концентрацию цитокина в образце.

Анализ проводили из замороженных образцов сыворотки, которые собирали в пробирке для сепарации сыворотки. Значения выражали в виде мкг / мл. Функциональный статус печени определяли с помощью модифицированных оценок Child Pugh и MELD (24, 25).

статистический анализ

Для обработки данных использовалась программа «Statistica для Windows 5.0». Категориальные данные были выражены как пропорции (%) и непрерывные данные как средние ± стандартное отклонение (SD). Статистические методы, используемые в этом исследовании, где: анализ теста дисперсии (тест ANOVA), модель многомерного анализа «факторный анализ» и t-тест Стьюдента для независимых образцов. Уровень значимости был р

В общей сложности 90 субъектов, разделенных на две группы из 30 пациентов, также с группой из 30 здоровых лиц, которых лечили для сравнения. В таблице 1 приведены основные демографические и антропологические параметры субъектов на группу, которые не были существенно различны по группам.

Основные демографические и антропологические параметры субъектов на группу.

Повышенная активность ферментов отмечалась в группах пациентов с заболеванием печени по сравнению с контрольной группой здоровых субъектов. INR и APTT существенно не отличались по группам (таблица 2). Значения общего белка не были существенно различны (табл. 3). Не было статистически значимых различий в анализе гематологических параметров (табл. 4).

Результаты средних значений активности ферментов, билирубина, INR и APTT в группах.

Результаты статистического анализа параметров белка в группах.

Результаты статистического анализа гематологических параметров в группах.

В гистограмме 1 представлены средние значения интерлейкина 1 (IL-1α) в группах. Анализ ANOVA теста на дисперсию доказывает, что IL-1α в здоровой группе (3) отличается от других групп следующим образом: по отношению к группе 1 уровень статистической значимости был р

Средние значения интерлейкина 1 (IL-1α) в группах.

Цитокин IL-1α статистически анализировали отдельно и сравнивали по группам с использованием t-критерия Стьюдента для независимых образцов. Статистическая значимость наблюдалась между группами 1 и 2 при p = 0,026. IL-1 α положительно коррелировал с продолжительностью болезни (p

В клинической практике для определения степени функционального статуса печени используются детские системы Туркут Пью и MELD. В этом исследовании наряду с обычными лабораторными исследованиями был проведен анализ уровней сывороточного провоспалительного цитокина IL-1α в целях лучшего понимания и мониторинга хронического гепатита B.

Измерения средних значений ферментной активности (АСТ, АЛТ, γGT и AP) и билирубина в группах показали повышенную активность этих ферментов в группах пациентов с хроническим гепатитом по сравнению с контрольными, что, как ожидается, связано с хроническим процессом печени. Значения общих белковых и гематологических параметров существенно не различались по группам. Функциональные показатели поражения печени (оценки ребенка Пью и MELD) показали корреляцию в обеих группах, но не как хорошую систему оценки интенсивности воспаления и участия в процессе фиброза печени. Что объясняет их основную цель при оценке терминальных стадий повреждения печени.

Статистический анализ анализируемых цитокинов показал очень впечатляющие результаты. Анализ уровня сыворотки интерлейкина-1 показал высокую степень корреляции с активной репликацией генетического материала (группа 1), что привело к высокой статистической значимости. Наиболее активный воспалительный процесс произошел в этой группе, в то время как в другой группе воспалительная реакция спадала, и ее лучше контролировали, что согласуется с результатами. Увеличение IL-1α отвлекает воспалительную реакцию преимущественно экссудативно-клеточных ответов под воздействием IL-1α на ответ на фибробласт-грануляцию. Гистологически говоря, на данном этапе ожидать значительную активность фибробластов, волокнистых компонентов размножения в воспалительной области. Если этот процесс чрезвычайно интенсивный, возникает значительная предрасположенность к замене функциональной ткани печени фиброзом, которая может иметь длительные патологические изменения в структуре печени, а затем и функциональные последствия. На этом этапе необходимо оценить, насколько благоприятным является «восстановление воспалительной реакции». Если он слишком интенсивный, стабилизация сформированной волокнистой ткани в долгосрочной перспективе может функционально подавлять ткань печени. Из этого следует, что мониторинг изменений концентрации IL-1 и других цитокинов (TGF-β1) может иметь значение «предсказатель цирроза».

Первичный рак печени является важной причиной смерти от рака, а гепатоцеллюлярная карцинома (HCC) составляет 70% -85% от общего рака печени во всем мире. Хроническая инфекция вируса гепатита B (HBV) способствует> 75% случаев HCC. Высокая вирусная нагрузка в сыворотке является самым надежным показателем репликации вируса при прогнозировании развития HCC. HBV-генотип C тесно связан с HCC у пациентов с циррозом в возрасте> 50 лет, тогда как генотип B связан с развитием HCC у нецирротических молодых пациентов и послеоперационным рецидивом HCC. Нагрузка HBV, генотип C, вирусные мутации и экспрессия воспалительных молекул в HBV-родственных тканях HCC значительно связаны с плохим прогнозом. Дисбаланс между внутриутробными CD8 (+) Т-клетками и регуляторными Т-клетками или цитокинами Th1 и Th2 в перитуморальных тканях может прогнозировать прогноз HCC-связанного HCC. Эти факторы важны для разработки активной профилактики и наблюдения за инфицированными HBV субъектами, которые с большей вероятностью будут разрабатывать HCC, или для адаптации подходящего лечения для улучшения выживаемости или отсрочки послеоперационного рецидива HCC. Более ранние исследования показывают, что повышенные уровни IL-1 в образцах ткани печени указывают на выраженную активность гепатита B и стойкость вирусной активности (16, 17), и в этих условиях ожидается увеличение уровней сывороточного цитокина в этих условиях, что это исследование.

В хронических воспалительных тканях печени, высокой ДНК HBV, мутациях HBV, высоких плотностях макрофагов, активированных звездчатых и тучных клетках, высокой экспрессии макрофагального колониестимулирующего фактора / его рецептора и фактора роста плаценты, Th1 / Th2-подобном цитокиновом сдвиге, связанная с сигнатурой и активация путей, связанных с канцерогенезом, предсказывают поздний рецидив HCC (18-23).

Дальнейшие исследования должны быть сфокусированы на разработке надежной стратегии путем интеграции вирусных факторов, воспалительных факторов и клинических факторов комплементарной прогностической ценности для обеспечения высокой достоверности оценки прогноза возникновения HCC.

Анализ провоспалительного цитокина IL-1α и функционального статуса печени выявил подробную информацию об условиях хронического гепатита B. IL-1α был значительно повышен в воспалительных состояниях выраженной активности (ПЦР-положительный гепатит) и может быть использован в качестве важного параметра воспалительного активности и оценки фиброза и, в конечном счете, злокачественной трансформации при хроническом повреждении печени.

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ: НЕТ ДЕКЛАРАЦИИ