Днк вируса гепатита в качественный положительно
Вирусный гепатит B встречается не очень часто, так как существует вакцина, которая предупреждает инфицирование вирусом-возбудителем недуга. Детей прививают сразу же после рождения, а в дальнейшем вакцинация происходит по достижению совершеннолетия.
Тем не менее, распространенность гепатита B высокая. Распознать данное заболевание достаточно просто. Нужно лишь пройти ПЦР-исследование (полимеразная цепная реакция). При помощи анализа можно выявить ДНК вируса гепатита B. Для постановки более точного диагноза производится количественное исследование.
Лечат ВРВ сугубо консервативно. Пациенту назначаются интерфероны, поливитаминные комплексы, гепатопротекторы, противовирусные ЛС. Рассмотрим подробнее патогенез болезни и выясним, в каких случаях нужно сдавать ПЦР-исследование, и как его правильно расшифровать.
Патогенез и особенности вирусного гепатита Б
Гепатит Б (сокращенно ВРВ) – вирусное заболевание, при котором наблюдается воспалительный процесс в клетках печени. Недуг может привести к увеличению печени и изменению ее структуры. При отсутствии своевременной терапии гепатит перестает в цирроз или жировой гепатоз.
Возбудитель ВРВ – ДНК-содержащий вирус из семейства гепаднавирусов (сокращенно называют вирус ГВ или HBV). Антиген к инфекционном агенту был открыт только в 1964 году. Отличительная особенность вируса состоит в том, что он чрезвычайно стойкий к химическим и физическим факторам.
Так, инфекционный агент не погибает при резких перепадах температур, под воздействием заморозки, а также при длительном воздействии кислой среды. Более того, врачи утверждают, что HBV может сохраняться при комнатной температуре до нескольких недель. К примеру, инфекционный агент может сохраняться на бритве зараженного человека, в пятнах крови, на различных медицинских инструментах. По различным оценкам, ВРВ страдают порядка 300 тысяч людей.
Выделяют 4 пути передачи инфекционного агента:
- Половой. При незащищенном половом контакте происходит травматизации слизистых оболочек половых органов, вследствие чего вирусу в разы легче попасть в кровоток, а оттуда в воротную вену и печень. HBV при защищенном половом акте не передается. Кстати, инфицирование при поцелуях и объятьях считается невозможным.
- Вертикальный путь. Инфекционный агент может поникнуть через плаценту. Также возможно инфицирование при прохождении ребенка через родовые пути. А вот через грудное молоко заразиться практически нереально.
- Бытовой. Заразиться можно, если здоровый человек использует одни и те же средства личной гигиены с носителем вируса.
- Парентеральный, то есть через кровь. Так, HBV можно заразиться при посещении стоматологических клиник, студий тату, косметологических салонов, маникюрных, педикюрных, кабинетов пирсинга. Возможно инфицирование при переливании крови, при трансплантации органов, во время гемодиализа, при оперативных вмешательствах.
Гепатит Б не передается воздушно-капельным путем. А при контакте с биологическими жидкостями человека (спермой, слюной, секретом внутренних органов, менструальными и влагалищными выделениями) вероятность инфицирования сохраняется.
ПЦР-исследование на ДНК вируса
Подготовка к анализу
Выше уже отмечалось, что для постановки диагноза нужно сдать ПЦР гепатита B. Чтобы исследование было точным, пациенту нужно соблюсти ряд несложных правил. Первое и самое главное – сдавать анализ натощак. Только так можно получить точный результат. Пить воду в день исследования можно.
Также накануне исследования крайне не рекомендуется принимать алкогольные напитки. В идеале – воздерживаться от приема спиртного хотя бы за 3-5 дней до проведения забора крови. Известны случаи, когда вследствие употребления алкоголя человек получал ложноположительный или ложноотрицательный результат. Хотя на сегодняшний день это считается практически невозможным, так как ПЦР – высокоточный анализ.
Не помешает:
- В день исследования не курить.
- Накануне сдачи соблюдать диету.
- По рекомендации врача прервать прием препаратов, которые в той или иной степени способны оказывать влияние на полученный результат.
- Избегать физических нагрузок.
Если человек уже проходит противовирусную терапию, то прерывать прием ЛС накануне ПЦР не нужно. Цена комплексного ПЦР-исследования в частных лабораториях (Синево, Гемотест и пр.) стартует от 2000 рублей.
Качественный анализ
Обнаруживать ДНК ВРВ помогает качественный ПЦР-анализ. Он назначается не только при подозрении на гепатит Б. Проходить качественное исследование рекомендуется тем людям, которые проходят или закончили прохождение противовирусной терапии. ПЦР может назначаться людям, которые проживают с инфицированным человеком.
Цель качественного ПЦР – обнаружить ДНК вирусного агента. Расшифровка проводится очень просто. Качественный анализ дает либо положительный, либо отрицательный результат. В первом случае вирус обнаружен, во втором – нет.
Но есть один нюанс. Несмотря на то, что ПЦР достаточно точный анализ, получить ложноположительный или ложноотрицательный результат можно. По словам гепатологов, лучше сдать исследование два раза в разных лабораториях.
Количественный анализ
Количественный анализ на гепатит B проводится тоже в обязательном порядке при подозрении на наличие ВРВ в организме. Что такое количественное исследование и зачем оно нужно? Как понятно из названия, анализ помогает определить количество инфекционного агента в организме. При помощи исследования врач может оценить степень тяжести патологии.
Также количественный анализ нужно сдавать тем людям, которые уже проходят лечение. При помощи него можно определить эффективность терапевтических мероприятий, и по необходимости внести коррективы.
Единица измерения вируса – МЕ/мл. Иногда используется ДНК/мл (количество копий). Усредненное значение – 1 МЕ/мл = 5 копий/мл. Если результат анализа меньше 75 МЕ/мл, то ВРВ у пациента отсутствует.
Расшифровка количественного исследования следующая:
- До 2 * 105 копий/мл. Означает, что вирус ведет себя не очень активно. В таких случаях вылечить ВРВ относительно нетяжело.
- От 2 * 105 до 2 * 106 копий/мл. Означает, что активность вируса средняя. Инфекционный агент достаточно активен, и вероятность хронизации воспалительного процесса достаточно высокая.
- От 2 * 106 до 2 * 107. Виремия большая. Активность вируса очень высокая, воспалительный процесс протекает реактивно.
Дополнительные исследования при подозрении на гепатит Б
Помимо ПЦР, в обязательном порядке пациенту нужно сдать ИФА (иммуноферментный анализ). С его помощью можно обнаружить антитела к ВРВ. Если антитела есть, значит, с высокой долей вероятности вирусное заболевание у пациента присутствует. Рассмотрим основные антитела, единица их измерения – индекс.
Один из самых главных – HbsAb. Под этой аббревиатурой скрываются антитела к поверхностному белку вируса. При контакте иммунной системы с протеином ВРВ происходит выработка специфических антител, которые прикрепляются к вирусу и мешают ему проникнуть в клетки печени.
Еще есть анти-HBc (total) (HBcAb). Они представляют собой антитела к ядерному белку вируса гепатита Б. Но тут не все так просто. Наличие данных антител может свидетельствовать о том, что гепатит был в прошлом. То есть наличие этого маркера не говорит о том, что воспалительный процесс имеется именно сейчас.
Также могут обнаруживаться IgM анти-HBc (HBcAb IgM). Они формируются на начальных этапах развития недуга.
Если иммуноферментный анализ выявил, что у человека имеются IgM анти-НВс (НВсАb IgM) и анти-НВе (HBeAb), то это говорит о том, что воспалительный процесс протекает остро и заразность крови больного очень высокая. В норме данные антитела должны отсутствовать.
Чтобы оценить общую клиническую картину, помимо ПЦР и ИФА, пациенту могут быть назначены:
- Общий анализ крови.
- Биохимический анализ крови. Исследуется уровень печеночных ферментов (АСТ, АЛТ, щелочная фосфатаза, прямой и непрямой билирубин, ГГТ). При гепатите Б уровень ПФ повышается.
- УЗИ печени. Воспалительный процесс приводит к тому, что орган становится отечным, несколько изменяется его структура, возможно наличие участков фиброза.
- Биопсия печени. Предусматривает забор печеночных клеток и их дальнейшее гистологическое исследование. Обязательно используется в составе дифференциальной диагностики.
По необходимости может быть рекомендована сдача ПЦР-исследование на РНК вируса гепатита C, так как случаи одновременного инфицирования гепатитом Б и гепатитом Ц весьма нередки. Причем оба заболевания передаются парентерально.
Что делать при наличии вируса в организме?
Если качественный тест был положительным, и пациенту был поставлен диагноз «вирусный гепатит B», ему нужно пройти комплексное лечение. При составлении схемы терапевтических мероприятий учитываются результаты теста на антитела и результаты количественного ПЦР-исследования.
Уничтожить вирус и купировать воспалительный процесс помогают специализированные противовирусные медикаменты. Препаратами выбора являются . Чтобы укрепить сопротивляемость организма инфекционным агентам, назначаются интерфероны, в числе которых Интераль-П, Интрон А, Пегасис, Пегинтрон.
Кроме того:
- Назначаются гепатопротекторы. Они помогают стабилизировать липидный и белковый обмен, снизить активность печеночных трансаминаз, купировать воспалительный процесс в паренхиме печени. Также под воздействием гепатопротекторов происходит нормализация детоксикационной функции печени, увеличивается синтез желчи и стабилизируется ее пассаж. При гепатите Б препаратами выбора являются Урдокса, Урсофальк, Лив 52, Карсил Форте, Эссенциале Форте Н, Резалют Про.
- Корректируется рацион. Больному нужно отказаться от продуктов, перегружающих печень. Таковыми являются сладости, жирные блюда, полуфабрикаты, острые овощи, кислые фрукты, свежая выпечка.
- Показан отказ от алкогольных напитков, так как они усугубляют течение воспалительного процесса и плохо сочетаются с противовирусными препаратами.
ВРВ вылечить полностью возможно. Хронизация воспалительного процесса происходит лишь у 10-20% пациентов.
Прогноз и профилактика заболевания
Лучшая профилактика гепатита Б – своевременное вакцинирование. Оно делается сразу после рождения, а затем по достижению совершеннолетнего возраста. Сколько длится послепрививочный иммунитет, сказать сложно.
Первоначально считалось, что человек остается устойчивым к воздействию ВРВ в течение 5-7 лет после прививки. Но исследования, проведенные еще в 80-х годах XX века, опровергли это. Медики выяснили, что иммунитет может сохраняться и до 25 лет. Но медработникам и людям, чья работа предусматривает контакт с кровью и другими биологическими жидкостями, все равно рекомендуется вакцинироваться каждые 5 лет.
Прогноз при вирусном гепатите Б благоприятный. Хронизация воспалительного процесса происходит достаточно редко, особенно если человек обратился за помощью своевременно. Если же воспалительный процесс запущенный, то вероятность перехода патологии в хроническую форму достаточно высокая.
Несвоевременное лечение может привести к различным последствиям. Так, хронический ВРВ часто приводит к развитию фиброза, который со временем перестает в цирроз.
Также на фоне воспалительного процесса могут развиться рак печени, дискинезия желчевыводящих путей, жировой гепатоз, острый холецистит, холангит. Есть еще одна особенность. При ВРВ пациент может заразиться гепатитом D. Репликация последнего возможна только при наличии HBV.
Источник
Определение ДНК вируса гепатита В необходимо преимущественно в диагностике хронической формы болезни. Проводится качественный и количественный анализ ДНК гепатита для установления активности репликации возбудителя (вирусная нагрузка) и принятия решения о необходимости начала специфической противовирусной терапии.
В процессе лечения хронического гепатита В и после завершения полного курса эти анализы проводятся повторно для оценки эффективности проведенной терапии.
Что такое ДНК вируса гепатита B
HBV DNA – это главная составляющая возбудителя гепатита В, в которой хранится генетическая информация о вирусе. В клинической практике определение ДНК HBV вместе с HBsAg и другими маркерами вирусного гепатита используется в диагностике хронической формы болезни, реже – острой.
Если в крови пациента не обнаружено следов ДНК HBV (качественный анализ отрицательный), то это позволяет полностью исключить диагноз острого и хронического гепатита В. Именно этот анализ помогает в сложных диагностических случаях, когда серологические маркеры вирусного гепатита В вызывают сомнения у лечащего врача.
Если позволяют технические возможности, то в крови пациента выявляют только ДНК HBV методом ПЦР без определения серологических маркеров вирусного гепатита В. Этот метод может быть использован в качестве скринингового как самый надежный, но не всегда доступный из-за своей высокой стоимости.
Показания к проведению исследования
В отечественной клинической практике традиционно принято не начинать обследование пациента с ДНК HBV, а стартовать с более доступных с финансовой и технической точек зрения серологических маркеров вирусного гепатита Б.
Необходимость выявить наличие ДНК HBV (или подтвердить ее отсутствие) целесообразно в таких ситуациях:
- длительное течение острой формы гепатита В (затяжной вариант с высокой вероятностью хронизации);
- при получении сомнительных результатов серологических маркеров (например, отрицательный HBsAg и положительный HBeAg);
- перед началом противовирусной терапии пациенту с хроническим гепатитом В для оценки концентрации вирусных частиц в крови (вирусная нагрузка);
- через месяц от момента старта противовирусной терапии для оценки эффективности назначенных противовирусных средств (вирусная нагрузка должна снижаться);
- после завершения курса специфического лечения для оценки его эффективности (качественный и количественный анализ ДНК HBV должны стать отрицательными).
Семейный доктор также может назначить анализ на ДНК HBV в процессе проведения дифференциальной диагностики, если у пациента заподозрено заболевание печени или диагностирован синдром желтухи неустановленной этиологии.
Кратность проведения анализов на ДНК HBV, какой именно вариант необходим (качественный или количественный) – решает лечащий доктор. Пациенту лучше не заниматься самодиагностикой, так как ПЦР-диагностика на ДНК HBV достаточно дорогая.
Правила подготовки к анализу
Полимеразная цепная реакция не требует специальной подготовки. Правила подготовки такие же, как и к другим традиционным лабораторным исследованиям. Если у пациента возникают вопросы, то их необходимо задать лечащему доктору или сотруднику лабораторного комплекса. Перед определением ДНК HBV пациенту необходимо:
- на протяжении 3 дней отказаться от приема лекарственных препаратов;
- исключить жирную пищу;
- выдержать период голодания в течение 8-10 часов до момента взятия крови;
- запланировать визит в лабораторный комплекс на первую половину дня;
- приходить натощак, но обязательно выпить 1-2 стакана обычной питьевой воды или некрепкого чая.
Допускается взятие крови пациента в одном подразделении и последующая доставка контейнера с биологическим материалом в лабораторный комплекс. Венозная кровь наливается в емкость с веществом, препятствующим свертыванию крови.
Биологический материал в обязательном порядке транспортируется в лабораторный комплекс в условиях переносного холодильника (температура от 2 до 8 градусов). Информативный результат может быть получен только при условии доставки крови в течение 24 часов.
Читайте также: Анализ на гепатит В – расшифровка результата и норма показателей
Определение ДНК HBV методом ПЦР
ДНК HBV обнаруживают методом полимеразной цепной реакции. Это значит, что с помощью амплификации в биологической жидкости обследуемого пациента участки ДНК вируса гепатита В синтезируются – их концентрация увеличивается в несколько раз. Каждый макро- и микроорганизм обладает уникальной неповторимой последовательностью нуклеотидов.
Разработаны праймеры – так называемые эталоны, в сравнении с которыми устанавливается порядок нуклеотидов и идентифицируется микробный агент. Это значит, что практически исключена диагностическая ошибка.
Ложноположительный и ложноотрицательный результаты встречаются крайне редко. Компания-производитель на упаковке с диагностической тест-системой всегда указывает значение (концентрацию вируса), которое расценивается как положительный результат.
ПЦР-диагностика – быстрый метод диагностики. Результат известен через 2-3 часа от момента начала работы с биологической жидкостью пациента. Лаборатория выдает ответ на бланке, где указан не только сам результат (положительный или отрицательный, или же концентрация вирусных частиц), но и название тест-системы, а также ее чувствительность.
Качественное исследование
Качественное исследование ДНК вируса гепатита В предполагает только выявление этого микробного агента. Этот анализ назначается чаще, чем количественный, так как его диагностическая ценность несколько выше.
Это исследование позволяет отличить норму от патологии, то есть получить однозначный ответ на вопрос, есть ли в крови обследуемого пациента возбудитель вирусного гепатита В или его нет. Чаще всего качественный анализ на ДНК вируса гепатита В необходим для диагностики хронической формы гепатита, когда клинические признаки этого варианта поражения печени минимальны.
В диагностике острого вирусного гепатита В качественный анализ на ДНК необходим только в сложных диагностических случаях. Например, если в крови пациента уже не обнаруживается ни поверхностный антиген HBsAg, ни антитела anti-HBs. В такой ситуации вероятно затяжное течение болезни или трансформация острой формы в хроническую.
Возникает необходимость назначения специфической мощной противовирусной терапии, поэтому необходимо оценить уровень репликации возбудителя гепатита В. Если это так называемое «серонегативное окно», то есть краткий период, когда отсутствует и антиген, и антитела, то противовирусная терапия не нужна. Если репликация вируса установлена, то это означает необходимость контроля за состоянием пациента и назначением противовирусной терапии.
Количественное исследование
Анализ концентрации ДНК вируса гепатита В необходим преимущественно в диагностике хронической формы болезни. В клинической практике количественный анализ называется чаще вирусной нагрузкой, так как исследуется количество вирионов вируса гепатита В в 1 мкл крови пациента.
Обнаруженный уровень вирусной нагрузки до начала лечения является своеобразным эталоном. С изначальной цифрой сравнивается последующий результат, который назначается через месяц от начала специфической терапии и после завершения полного курса противовирусного лечения.
Расшифровка результатов
Нужно не просто найти вирус гепатита В в биологическом материале пациента, но и знать, как трактовать полученные результаты. Пациенту следует понимать, что анализировать сделанные самостоятельно выводы – далеко не всегда правильно. Оценивать весь комплекс анализов на основании клинического осмотра больного может только лечащий доктор.
Предварительно расшифровать полученный ответ можно с помощью таблицы:
| Анализ | Результат |
| Качественный | отрицательный – пациент не инфицирован вирусом гепатита В, дальнейшая диагностика этого вирусного заболевания нецелесообразна |
| положительный – пациент инфицирован вирусом гепатита В, необходим качественный анализ для оценки уровня репликации микробного агента и принятия решения о необходимости старта противовирусной терапии | |
| Количественный | более 2000 ME/мл или 10 000 копий/мл – вирусная нагрузка высокая, репликация возбудителя интенсивная, необходима специфическая терапия при отсутствии противопоказаний к ней |
| менее 2000 ME/мл или 10 000 копий/мл – вирусная нагрузка низкая, решение о старте противовирусного лечения принимается после комплексной оценки других результатов обследования (биохимические и серологические тесты) |
Заключение
Бланки ПЦР-анализа на ДНК вируса гепатита В не являются диагнозом и основанием для назначения терапии противовирусными лекарственными средствами. Все выводы и необходимые дальнейшие рекомендации делает лечащий доктор.
Источник
