Днк вируса гепатита в количественный анализ норма

Многие знают, что гепатит — болезнь не только опасная, но и коварная, ведь диагностировать ее непросто. Иногда пациенту приходится пройти целый ряд исследований — от анализа крови на наличие антител до УЗИ печени. Заболевание диагностируется непосредственно по крови, а остальные исследования демонстрируют, в какой степени печень повреждена гепатитом.

Наиболее эффективный и современный метод — это метод ПЦР (полимеразная цепная реакция). Расшифровка количественного анализа на вирус гепатита С или В выявляет разновидность болезни и дает понимание, как вирус будет мутировать в организме человека.

ПЦР-анализ и его виды

Быстрый и точный ПЦР-анализ ищет возбудителя следующим образом: при исследовании существенно увеличивается часть ДНК вируса в образце крови. Взятую у человека кровь помещают в особые реактивы, и начинается клонирование клеток. Появление сотен ДНК позволяет обнаружить возбудителя еще на ранней стадии.

ПЦР-анализ бывает нескольких видов:

• Качественный анализ. Это исследование показывает, что в крови присутствуют гены-«вредители». Качественный анализ подтвердил опасения? Значит, следует провести количественное исследование, чтобы установить степень развития вируса. Результат обозначается простыми словами: «обнаружено» или «не обнаружено». В первом случае в организме пациента найдены РНК вируса, значит, человек уже болен. Во втором случае кровь чиста от гена вируса. Чтобы не оставалось сомнений, специалисты рекомендуют спустя 10 дней сдать повторный анализ.
• Количественный анализ. Такой вид исследования определяет, в каком количестве в крови присутствуют гены вируса, насколько тяжелая степень у заболевания. О результате говорят слова «положительно», «отрицательно» и «недействительный».
  1. Под словом «положительно» понимается инфекционная нагрузка. Такой метод диагностики нужен медикам, чтобы отслеживать, действует ли терапия. Время проведения анализа — 4, 12, 16 и 24 недели болезни. Показатель, не превышающий 8х10т МЕ/мл, свидетельствует об эффективности лечения.
  2. Результат «отрицательно» говорит, что ген инфекции отсутствует.
  3. «Недействительный» бывает тогда, когда ген вируса был обнаружен при качественном исследовании, но количественный анализ его не выявил. Такое случается при объеме инфекции ниже уровня.

Не все пациенты сдают количественный анализ (в этом его отличие от качественного). Если качественный подтверждает или опровергает присутствие «врага», то количественный подтверждает диагноз, помогает спрогнозировать развитие заболевания и определиться с терапией.

Количество РНК до начала лечения и во время терапии демонстрирует эффективность работы с пациентом. Кроме того, по числу РНК врачи понимают, какие дозы лекарств нужны больному.

Когда нужен количественный анализ

Если в крови были найдены антитела к гепатиту, то за качественным анализом следует количественный. «Пожертвовать» кровью больному придется несколько раз.

• Сначала — еще до того, как будет принято решение о курсе терапии, т.е. при первичной диагностике.
• Затем во время лечения — это необходимо, чтобы видеть клиническую картину результатов (как правило, на 1, 4, 12 и 24 неделях).
• Финальный анализ проводится после терапии — он показывает, возможен ли рецидив.

Врач, использующий количественный анализ как один из основных методов исследования, преследует несколько целей:

1. Медик должен понимать, насколько глубоко вирус проник в организм, какое количество антигенов присутствует в теле больного.
2. Доктор определяет, действует ли терапия.
3. Врач подбирает метод лечения и составляет прогноз.
4. Метод дополняет анализ крови, биопсию, эластометрию и т.п.

Существует несколько показаний к проведению количественного анализа:

1. Надо определить вирусную нагрузку и взять под контроль антивирусную терапию.
2. Результаты качественного ПЦР-анализа говорят о наличии антител гепатита С.
3. Пациент страдает от острого или хронического гепатита С.
4. У больного найден микст-гепатит.
5. Необходимость четко спланировать терапию.
6. После 12 недель лечения результаты качественного анализа все еще показывают присутствие вируса.

Подготовка к сдаче крови

Для исследования нужна кровь из вены. Есть ряд простых стандартных правил, которых должен придерживаться пациент:

1. Лучше всего отправиться на анализ утром натощак, до этого в течение 8-12 часов воздерживаться от пищи.
2. У человека не всегда есть возможность пройти исследование именно утром. В таком случае завтрак должен быть диетическим; после завтрака также следует «пост» (8-12 часов).
3. За 1-2 дня до сдачи крови пациент должен отказаться от спиртного и жирной/жареной пищи.
4. После обильного застолья приходить на анализ нельзя.
5. Как минимум за час до сдачи крови человек не должен курить.
6. Пациенту понадобится 10-15 минут спокойствия перед тем, как сдать биоматериал. Для чего нужна такая релаксация? Физическое и эмоциональное напряжение способно повлиять на результат, следовательно, человеку необходимо расслабиться.
7. Лечащий врач должен знать, принимает ли пациент какие-то препараты. Если да, то после последнего приема надо выждать 10-14 дней. Возможно, доктор изменит условия.
8. Если человек проходил физиотерапевтические процедуры, рентгенографию или ректальное исследование, то сдавать кровь придется через определенное время.
9. Реагенты, оборудование, единицы измерения и, конечно, точность в разных лабораториях могут отличаться. Лучше сдавать первичный и повторные анализы в одном месте.

Когда будут известны результаты? Зависит от конкретной лаборатории и занятости ее сотрудников. Уже через 4-5 часов можно подвести итоги и уже на следующий день получить заключение.

Расшифровка результатов

Иногда о результатах говорят не цифры, а слова — «не обнаружено» или «ниже диапазона измерений».

• «Не обнаружено» означает, что вирус не найден.
• Слова «ниже диапазона изменений» говорят о том, что инфекция присутствует в небольшом количестве. В таком случае нужен количественный анализ, который «чувствительнее» качественного.

Медики ориентируются на вирусную нагрузку. Специалисты должны выяснить, сколько вирусных РНК содержится в 1 мл крови.

Принято пользоваться формулой МЕ/мл, но в некоторых лабораториях число измеряется в копиях/мл. Коэффициенты перевода варьируются от 1 до 5, важно, какой метод используется при определении количества.

Разные тест-системы предлагают свои варианты перевода компонентов в международные значения. Разработана таблица расшифровки количественного анализа на гепатит С, и вы можете ознакомиться с ее данными. Нормам ПЦР соответствуют определенные значения вирусной нагрузки:

Если здоровый человек сдает количественный анализ на гепатит С, то его норма — результат «не обнаружено». Для тех, кому не повезло заболеть, нормы другие. Количество вируса в их организме должно снижаться, о чем говорит убывание нулей в результате анализа: с 1*106 МЕ/мл до 1*105 МЕ/мл и т.д. При использовании амплификатора концентрация вируса не должна покидать границы от 1,8*102 до 2,4*107 МЕ/мл.

Когда можно утверждать, что лечение производит нужный эффект? В том случае, если при повторном исследовании нагрузка меньше 8*105 МЕ/мл.

Какова вероятность раннего вирусологического ответа? Примерно 85%. В таком случае на третий день терапии снижается количество вирусных РНК.

При показателе, превышающем 8*105 МЕ/мл, необходимо поменять тактику лечения. Зависимость простая: чем выше уровень, тем печальнее прогноз.

Что касается гепатита В, то за норму приняты такие значения вирусной нагрузки:

Узнав количество вируса, медики получают возможность определить форму болезни — острую, хроническую или носительство. Эта информация помогает понять, надо ли проводить дополнительные исследования. Результаты рассказывают, как вирус и пораженный им организм реагируют на терапию:

1. Превышающее норму значение трансаминазы говорит о хроническом гепатите В, как и активность вируса больше 4 наравне с количеством ДНК-копий 105/мл.
2. Стандартный уровень трансаминазы и концентрация ниже 105/мл — это носительство.
3. При гепатите В нужно все время отслеживать устойчивость, каждые 3 месяца отправляясь на анализы. Внезапно увеличившаяся в 10 раз вирусная нагрузка — свидетельство того, что коварный вирус стал устойчив к лекарствам.
4. Если через 3 дня лечения нагрузка снизилась на 85%, то ход терапии можно назвать благоприятным.
5. Иногда показатель АЛТ превышает норму (не чаще 2 раз за полгода), а вирусная нагрузка становится выше 105/мл. В таком случае нужна биопсия печени. Если же уровень АЛТ повышается чаще 2 раз за 6 месяцев, а вирус очень активен, то немедленно назначается антивирусная терапия.

И доктору, и пациенту хочется знать, как вирус поведет себя, переходя из острой формы в хроническую. Прогноз таков:

Результаты, выходящие за пределы нормы, — это тревожный сигнал: вирус размножается, и болезнь готова вернуться.

Преимущества методики

У ПЦР-анализа масса плюсов:

1. Точность метода позволяет быстро определиться с диагнозом и начать лечение.
2. Скорость. Нет необходимости разграничивать и выращивать разные виды возбудителя. Четко налаженный процесс позволяет оперативно получить результат всего за 4-5 часов.
3. Возбудитель определяется прямым путем. Найдена «та самая» часть ДНК? Значит, диагноз ясен. Например, обнаруживающий белки-маркеры ИФА находит лишь продукты жизнедеятельности бактерий, но не дает полной гарантии.
4. Специфичность исследования. Возможна реакция на ложные совместно-реагирующие агенты, но в данном случае исследуется только то вещество, которое характерно именно для конкретного возбудителя.
5. Даже самое незначительное количество вируса будет обнаружено, значит, восприимчивость — еще один плюс.
6. Универсальность метода. Способность найти фрагменты ДНК или РНК конкретных организмов позволяет работать при беспомощности других методов и использовать один материал для диагностики.
7. ПЦР-анализ обнаруживает и явные, и скрытые инфекции, изучая даже стойкие и не выращиваемые агенты.

Ошибочные случаи

Медицина — это не математика, иногда расшифровка количественного анализа на гепатит С или В оказывается ошибочной.

Важно сдавать ПЦР-анализ в клинике, заработавшей себе хорошую репутацию и отзывы. ПЦР находит вирус с точностью до 100%, но иногда показатели падают до 95%. Причина тому — некачественные реактивы, устаревшее оборудование и т.д.

Если за дело берутся профессионалы, работающие в авторитетном медицинском учреждении, то можно не беспокоиться, вероятность ошибки практически нулевая.