Количественный анализ на гепатит делают анализ крови

Гепатиты представляют собой серьезные заболевания, которые при неблагоприятном стечении обстоятельств могут приводить к раку печени, циррозу или печеночной недостаточности. В основе патологии лежат воспалительные процессы, обусловленные инфекционными или токсическими поражениями печени. Распространению гепатитов в обществе способствуют наркомания, алкоголизм, беспорядочные половые связи и низкое качество медицинских услуг.

Ключевым фактором в успешном лечении заболевания является его ранняя и точная диагностика при помощи лабораторных исследований крови. Рассмотрим основные виды анализов, которые необходимо сдать, чтобы подтвердить или опровергнуть наличие гепатита.

Какой анализ сдать? Маркёры вирусных гепатитов

Анализ может сдать любой желающий. Также пройти обследование рекомендуется лицам, у которых наблюдаются желтушность, изменение цвета экскрементов, слабость, тошнота, утрата аппетита, лихорадочные состояния, суставно-мышечные боли, тяжесть в правом подреберье. Если клинические симптомы вирусного гепатита отсутствуют, основанием для анализов являются повышенные концентрации внутриклеточных ферментов АсАт и АлАт, холестаз (уменьшение выделения желчи в двенадцатиперстную кишку) и контактирование с инфицированными гражданами. Обязательно сдавать кровь должны сотрудники медицинских учреждений, больные, которым предстоят операции, доноры крови и беременные женщины.

Гепатит A

(болезнь Боткина) передается через жидкости организма, продукты питания, воду и предметы быта. Патология может протекать в острой, подострой и субклинической (бессимптомной) формах. Она считается самой доброкачественной из всех форм инфекции и практически не вызывает хронических поражений печени. Смертность составляет менее 0,4%. Чаще всего симптомы патологии исчезают за 2 недели, а период восстановления функций печени не превышает 1,5 месяцев. Заболеваемость в странах СНГ составляет 20–50 человек на 100 000 населения.

Для диагностики проводятся следующие качественные методы исследования сыворотки крови:

определение специфичных участков РНК вируса в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени – обеспечивает 100% точность результата;
иммуноглобулины класса М–IgM обнаруживаются при первых клинических симптомах и далее 90–180 дней вплоть до полного выздоровления;
антитела класса G–IgG начинают вырабатываться во время болезни и остаются в организме навсегда. Исследование сыворотки крови на данные маркёры гепатита А может проводиться в целях контроля проведенной вакцинации, поскольку эти антитела показывают наличие иммунитета к заболеванию.

Гепатит B

вызывается вирусом Hepadnaviridae, передается половым путем или через кровь. Протекает в острой и хронической формах. Он приводит к значительному поражению печени, а нередко – к циррозу или раку. В данный момент около 300 млн людей на планете являются носителями этой инфекции. Для уточнения диагноза следует сделать такие тесты:

качественные или количественные анализы на антиген HBsAg, а также антитела Anti-HBc IgG, которые есть у больных, выздоровевших лиц и здоровых носителей. Содержание HBsAg в плазме крови у здорового человека не превышает 0,05 МЕ/мл;
качественные тесты на белок HBeAg и антитела Anti-HBc IgM, свидетельствующие об остром течении болезни;
определение ДНК вируса методом ПЦР в режиме реального времени.

Гепатит C

считается самым распространенным и наиболее опасным среди всех разновидностей заболевания. Часто он протекает бессимптомно на начальных стадиях и обнаруживается только при появлении таких серьезных осложнений, как цирроз или карцинома. Вирус передается преимущественно через жидкости организма и плохо поддается лечению. Его носителями в настоящее время считаются 500 млн людей.

Положительный анализ на гепатит С предполагает наличие соответствующего РНК-вируса в крови больного. Присутствие Anti-HCV и HCV IgG в организме, выявляемое качественными методами тестирования, говорит об острой стадии болезни. Количественные методы определения РНК методом ПЦР используются для оценки результативности терапии. Для генотипирования вируса и выбора тактики лечения необходимо исследование на интерлейкин-28-бета. Для проверки скрининговых анализов при положительном результате используется тест на антитела – рекомбинантный иммуноблот для выявления IgG-антител к различным антигенам вируса гепатита С.

Гепатиты D, G

. Активность вируса гепатита D зависит от наличия в организме вируса типа B. Заболевание протекает очень тяжело. Если заражение двумя типами вируса происходит одновременно, то у больного диагностируется патология в острой стадии, если же дельта-вирус (гепатит D) развивается на фоне уже имеющейся печеночной инфекции, то отмечается обострение заболевания. Гепатит G предположительно активизируется при наличии других типов инфекции, сам же он не вызывает активную форму болезни.

Лабораторное тестирование предусматривает выявление РНК-цепочек вирусов, а также выявление антител класса IgM, позволяющих отличить острую форму заболевания от хронической. Эти исследования являются качественными.

Гепатит E

по своему течению имеет сходство с вирусом типа А. Он передается через жидкости организма, сопровождается выраженным болевым синдромом и может принимать молниеносные формы. Эта патология особенно опасна для беременных женщин. У них болезнь может осложниться острой печеночной недостаточностью и энцефалопатией. В 20–30% случаев заболевание заканчивается смертью беременной. Если при лабораторном тестировании у пациента обнаруживаются антитела класса IgG и IgM, то это свидетельствует о патологии в острой стадии.

Подготовка к сдаче анализа и процедура забора крови

Биоматериал необходимо сдавать строго натощак. Также в течение суток перед посещением лаборатории следует воздерживаться от употребления жирной пищи и алкоголя. Результаты качественных тестов в большинстве случаев готовы уже через четыре часа после забора крови. На проведение количественного исследования может уйти до одного рабочего дня, не считая дня сдачи анализов.

Расшифровка результатов анализов на гепатит

Особенности расшифровки ответов зависят от типа исследования. Качественный тест позволяет установить факт наличия или отсутствия инфекции, а количественный дает возможность определить конкретную концентрацию исследуемого вещества. В некоторых случаях позитивным знаком является полное отсутствие антигена или белка, а в некоторых – содержание вещества в количестве ниже установленного уровня.

«Отрицательный» результат

Формулировка «анализ на гепатит – отрицательный» в бланке анализа свидетельствует об отсутствии заболевания. Подобный результат можно получить при прохождении качественного исследования методом ПЦР, объектом которого является РНК- или ДНК-цепочка вируса. Отрицательный ответ при проведении количественного иммунологического анализа говорит об отсутствии положительной реакции на наличие антигенов соответствующего типа. Но иногда при серологических (иммунологических) исследованиях в бланке анализов пишут величину ниже определенного значения, и в таком случае результат количественного теста считают отрицательным. Например, для вируса гепатита B пороговый уровень содержания антигена HBsAg в сыворотки крови составляет 0,05 МЕ/мл (единиц на миллилитр), когда показатель ниже – результат отрицательный, выше – положительный. На самом деле концентрацию ниже 0,05 МЕ/мл оборудование просто не может обнаружить, но, если де факто HBsAg присутствует в сыворотке крови в сколь угодно малом количестве – это означает инфицирование. Нормой является полное отсутствие как ДНК- или РНК-цепочек вирусов, так и их антигенов в биоматериале. А вот наличие антител к антигенам при отсутствии последних свидетельствует о том, что у вас выработан иммунный ответ на определенный вирус, либо вы переболели вирусным гепатитом ранее или прошли вакцинацию.

Анализ на гепатит «положительный»

Если результаты оказались положительными, то пациенту рекомендуется повторно пройти обследование, так как в некоторых случаях ложноположительный ответ может объясняться нарушением техники проведения тестирования, некачественными реактивами, неправильной подготовкой к процедуре (проведением теста после приема пищи), чувствительностью и специфичностью метода исследования, точностью анализаторов. Позитивный результат также может наблюдаться у человека, который некоторое время назад переболел острой формой вируса или является его здоровым носителем.

Согласно постановлениям Главного государственного санврача РФ от 22.10.2013 г. № 58 и от 28.02.2008 г. № 14, а также приказу Управления Роспотребнадзора по г. Москве от 01.10.2008 г. № 122 сведения о положительных результатах исследований на маркёры вирусных гепатитов передаются в ОРУИБ центров Госсанэпиднадзора.

Для того чтобы пройти обследование, нужно предъявить сотруднику диагностической лаборатории паспорт или документ, заменяющий его. Документ должен содержать информацию об адресе регистрации больного, а также его фотографию. При желании пациент может пройти тестирование анонимно, но подобные результаты не принимаются для оказания медпомощи.

При получении положительного ответа больной должен обратиться к врачу-инфекционисту, который назначит дополнительные исследования с целью подтверждения диагноза. Во время терапии тестирование может проводиться раз в 3 дня с целью отслеживания динамики состояния больного и эффективности лечения. При хроническом гепатите анализы сдаются каждые 6 месяцев с целью контроля состояния пациента.

Полное излечение возможно при своевременном проведении и правильно выбранной тактике терапии. Эффективность лечения зависит от конкретной инфекции, стадии болезни и общего состояния больного. Необходимость госпитализации определяется индивидуального для каждого пациента, в зависимости от тяжести его состояния. После выздоровления у человека сохраняются антитела, обеспечивающие ему пожизненный иммунитет либо устойчивый иммунный ответ на несколько лет, что зависит от многих факторов: возраста, индивидуальных особенностей организма и других.

Может ли анализ на гепатит быть ошибочным?

Ошибочные результаты нередко фиксируются при использовании некачественных реактивов, проведении исследования на устаревшем оборудовании или нарушении технологии тестирования. Иногда точность метода исследования предполагает определенный процент ошибки. Ложноотрицательный ответ возможен при тестировании на слишком ранней стадии заболевания, когда антитела еще не начали вырабатываться в нужном количестве, ложноположительный – на последней стадии острого гепатита, в период выздоровления.

Стоимость анализа

В государственных клиниках по направлению врача можно сдать анализ на гепатит бесплатно. Исследование на платной основе проводится в большинстве крупных городов страны. Цена зависит от конкретной лаборатории, используемого оборудования, сроков проведения, типа теста, региона и ряда других факторов.

Качественный тест на антитела к РНК- и ДНК-вирусу можно сделать в Москве и Санкт-Петербурге по цене 550–900 рублей. Стоимость количественного исследования варьируется в пределах 1200–10 000 рублей в зависимости от конкретного антигена, метода исследования, класса медицинского оборудования. Например, оценка вирусной нагрузки с детекцией в режиме реального времени, необходимая для определения эффективности лечения гепатита С, обойдется в 17 000–22 000 рублей. Выявление антигенов качественным методом в таких городах, как Новосибирск, Мурманск, Кострома, Махачкала, Симферополь будет стоить 300–800 рублей.

Сдача анализа на гепатит позволяет оперативно выявить заболевание и начать его лечение. А своевременно проведенная терапия в большинстве случаев обеспечивает полное выздоровление пациента или подавление активности вируса. Одним из главных способов профилактики гепатита B (наряду с соблюдением правил гигиены, а также с избеганием беспорядочных половых связей и отказом от приема наркотиков) является вакцинация. Ее обязательно нужно проводить тем, кто находится на гемодиализе, часто меняет сексуальных партнеров, работает с кровью или проживает в одной квартире с лицами, страдающими хронической формой болезни. Самые эффективные вакцины – отечественные. Они прицельно рассчитаны на те штаммы (генотипы) вируса, которые преобладают в нашей стране. Кроме того, современные российские вакцины производят без консерванта, в основе которого содержится ртуть.

Источник

Гепатит – это одно из самых опасных и трудно диагностируемых вирусных заболеваний. Чтобы с точностью поставить диагноз и выбрать метод лечения врач может назначить целый ряд анализов: от анализа крови на антитела до УЗИ печени. Но, сам гепатит диагностируется по крови, все дополнительные исследования предназначены в основном для понимания насколько вирус повредил печень.

На сеансе доктор может назначить вам метод ПЦР (полимеразная цепная реакция) — это наиболее современный и действенный метод изучения гена вируса и его возможностей. Такая диагностика способна установить разновидность заболевания и определить его дальнейшую мутацию в организме больного гепатита.

Что такое ПЦР и его виды

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это более быстрый и точный метод, что направлен на поиск возбудителя заболевания, путем существенного повышения части ДНК вируса гепатита в образце.

Анализ проводится путем забора крови, которую в последующем помещают в специальные реактивы, в которых происходит клонирование клеток. Из одной клетки получается две, и так далее. В итоге появляются сотни ДНК, благодаря которым можно диагностировать возбудитель и выявить вирус на ранней стадии.

ПЦР делится на несколько видов:

Качественный анализ — распознает гены инфекция в крови. Если при проведении качественного анализа у пациента подтверждается заболевание, то следует провести количественный анализ, устанавливающий степень инфекции. В результате проведения данной диагностики специалисты пишут “обнаружено/ не обнаружено”. “Обнаружено” — говорит о том, что недуг присутствует в организме и выявлен уже его РНК. “Не обнаружено” — свидетельствует об отсутствии в пробе гена вируса, то есть РНК гепатита отсутствует. Но врачи рекомендуют провести повторное исследование через 10 дней.
Количественный анализ — определяет объем генетического материала инфекции в крови. Такая диагностика помогает установить тяжесть болезни и всю клиническую историю. В результате такого анализа может быть написано только: “Положительно/Отрицательно/Недействительный”. “Положительно” — изображает инфекционную нагрузку. Доктора такой метод диагностики болезни назначают для определения действенности проводимого лечения на 4, 12, 16 и 24 неделях болезни. Если показатель вируса находится в диапазоне 8х10т МЕ/мл, то лечение эффективно, если показатели выше — то нет. “Отрицательно” — ген инфекции не обнаружен. “Недействительный” — такое бывает, если ген вируса обнаружили при качественном, но при этом не выявили при количественном анализе. Встречается подобное при условии, что объем инфекции ниже уровня.

Отличием количественного анализа есть то, что не все его проходят. Качественный — определяет наличие, а количественный — помогает с подтверждением заключения «вирус гепатита», прогнозом протекания болезни и определения хода лечения.

Насколько эффективна терапия, смотрят по числу РНК до и во время лечения. Также с его помощью определяют назначение доз препаратов.

Гепатит В количественный анализ норма

В каких случаях делают количественный анализ

Исследование делается параллельно с качественным анализом после того, как проверка крови на наличие антител к гепатиту (ИФА) показала положительный результат. Делают его несколько раз:

При первичной диагностике гепатита С до принятия решения о выборе курса лечения;
Во время лечения заболевания (обычно на 1, 4, 12 и 24 неделе) для определения клинической картины результатов терапии;
После лечения для определения рецидива.

Количественный анализ является одним из основных видов исследования, на которые врач полагается при выборе методов лечения гепатита. Он служит для того чтобы:

Понять как сильно организм заражен вирусом, количественное присутствие антигенов в теле.
Эффективности выбранной терапии.
Подобрать метод лечения и составить его прогноз.
Анализ крови, эластометрия, биопсия и другие.

Как правило, его производят до начала излечения. Основными показаниями могут быть:

Определение вирусной нагрузки и контроль за антивирусной терапией;
Качественный ПЦР нашел антитела гепатита С;
Нахождение острого и хронического гепатита С;
Существование микст-гепатитов;
При планировании лечения;
Если качественное исследование еще находит присутствие болезни по прошествии двенадцатой недели терапии.

Когда необходим количественный анализ на гепатит С

Подготовка к сдаче крови на количественный анализ

Сдача биоматериала на проведение анализа происходит из вены. Особых рекомендаций по подготовке нет, поэтому актуальны стандартные правила, которые нужно соблюдать перед сдачей крови на исследование:

Делать это лучше утром натощак (последний прием пищи должен быть не ранее 8-12 часов до сдачи).
Если забор крови происходит не утром, то на завтрак нельзя употреблять жирную пищу (интервал в 8-12 часов также должен соблюдаться).
Отказаться от алкоголя, жирной и жаренной еды за 1-2 дня до исследования.
Не приходить на анализ на следующий день после праздничного застолья.
Курение запрещено как минимум за час до сдачи биоматериала.
Перед забором крови стоит посидеть 10-15 минут в спокойствии, чтобы расслабить тело, исключить влияние на результаты напряжения, как физического, так и психологического.
Если принимаете какие-либо лекарственные средства или им подобные препараты, то анализ можно сдавать спустя 10-14 дней после последнего их приема. (об этом факте необходимо сообщить врачу, возможно он установит иное условие).
Биоматериал не сдается сразу после выполнения ректального исследования, рентгенографии, физиотерапевтических процедур.
Первоначальный и повторный анализы лучше сдавать в одной и той же лаборатории (медицинском учреждении), так они разные заведения могут использовать различные реагенты, оборудование, единицы измерения и точность.

Срок выдачи результатов отличается в зависимости от медицинского учреждения и его загруженности. Итоги можно подвести спустя 4-5 часов после начало исследования. Поэтому результат могут выдавать уже на следующий день после забора крови.

Как подготовиться к количественному анализу гепатита С

Расшифровка результатов результатов количественного анализа на вирус гепатита с и b

После проведения исследования расшифровать анализ могут не в цифрах, а словами: «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено». Количественный ПЦР более чувствителен качественного. Вывод «не обнаружено» может говорить, что инфекция не найдена.

«Ниже диапазона измерений» — испытание не нашло вирус, но он есть в малой величине. В этой ситуации делают повторное исследование.

Вирусная нагрузка — определение числа инфекционного РНК в установленном объеме крови (количественно 1мл=1куб.сан). Формулируется в интернациональных замерах МЕ/мл. Отдельные лаборатории обозначают копии/мл. Коэффициенты перевода разные (колеблются примерно от 1 до 5) и зависит от метода, использованного для определения количественного показателя.

В основном на практике принято, что 1 МЕ/мл = 4 копиям на мл. Расшифровать перевод компонентов в межнациональные значения различные тест-системы могут по-своему.

При гепатите C нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки(виремии):

Цифровое обозначение числа вируса	Описание итога
Не обнаружено	Норма для здорового человека. Вирус не найден или исход ниже грани чувствительности методики.
До 1.810^2 МЕ/мл (7,5102 копий/мл)	Обнаружено в концентрации ниже линий границы.
До 810^5 МЕ/мл (2106копий/мл)	Обнаружен вирус при хорошем прогнозе болезни и эффективном лечении. Низкая вирусная нагрузка.
Больше 810^5 МЕ/мл (2106 копий/мл)	Обнаружено вирус и большая вирусная нагрузка.
Больше 2,410^7 МЕ/мл (1108 копий/мл)	Обнаружен вирус в концентрации выше линейного диапазона.

Расшифровка результатов количественного анализа на гепатит С и В

Когда человек здоров, норма есть — «не обнаружено». У заболевших людей нормой будет снижение дозы вируса в результатах на логарифмическую единицу, что проявляется убыванием числа нулей в анализе на один (например, с 1*106 МЕ/мл до 1*105 МЕ/мл). Рамки диапазона концентрации вируса, что определяет амплификатор, находятся в границах 1,8*102 — 2,4*107 МЕ/мл.

Если при повторном анализа нагрузка вируса является меньшей, чем 8*105 МЕ/мл, то можно утверждать, что терапия идёт в правильном направлении и в борьбе с заболеванием есть успех.
Говорить о раннем вирусологическом ответе можно при условии снижения количественного присутствия РНК вируса на третий день лечения. Но вероятность этого находится на уровне 85%.
Если же, показатель более 8*105 МЕ/мл, то доктор должен пересмотреть схему лечения и выбрать более подходящую. Соответственно, чем больше уровень, тем сильнее вирус поразил организм и хуже прогноз.

При гепатите В нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки (виремии), копий/мл:

< 10^3 — нагрузка очень низкая, вирус ведет себя неактивно;
от 10^4 до 10^5 — нагрузка низкая, вирус обычно неактивен;
10^6 — нагрузка умеренная, вирус ведет себя активно;
10^7 — виремия большая, вирус высокоактивен.

Результаты количественного анализа на гепатит

Зная количественно, как ведет себя вирус в организме, можно определить форму заболевания (хроническая, острая или носительство), необходимость проведения дополнительных исследований, реакцию организма и вируса на лечение:

Хронический гепатит б диагностируется, если значение трансаминазы будет выше нормы, активность вируса — больше 4, а концентрация ДНК-копий в миллилитре крови составит 10^5 копий.
Носительство определяется по следующей картине, которую дают результаты — концентрация < 10^5 копий/мл, а уровень трансаминазы равен стандартному значению.
Резистентность (устойчивость) при HBV постоянно контролируется во время лечения. Анализы сдаются каждые 3 месяца. Если в один из моментов виремия при гепатите увеличится в 10 раз, то это означает, что ВГВ приспособился к используемым лекарственным препаратам — стал устойчивым.
Благоприятный ход лечения покажет снижение виремии на 85% через 3 дня после начала терапии.
Направление на биопсию печени больной получает лишь тогда, когда показатель АЛТ (аланинаминотрансферазы) превышает нормальное значение не более 2 раз за 6 месяцев, а расшифровка ПЦР на гепатит В показывает виремию > 10^5 копий/мл. Когда же при большой вирусной активности наблюдается повышение уровня АЛТ чаще 2-х раза за полгода, то сразу же назначается антивирусная терапия.

Чтобы узнать, как будет вести себя ДНК гепатит в плане хронизации, то есть перехода к хронической форме из острой, также используются результаты ПЦР-диагностики:

ДНК ВГВ < 2 х 10^4 копий/мл означает, что острая стадия не перейдет в хроническую форму;
ДНК ВГВ лежит в пределах от 2 х 10^4 до 2 х 10^6 копий/мл означает, что у каждого 4-ого больного ВГВ станет хроническим, то есть хронизация составляет 25-30%;
ДНК ВГВ > 2 х 10^6 копий/мл означает, что приобретение хронической формы недуга неизбежно.

При изменениях результатов анализов вне нормы, это может свидетельствовать о возвращении болезни и размножении вируса.

Норма количественного анализа гепатита

Плюсы методики

Методика ПЦР дает возможность дать заключение и назначить правильное лечение.
Быстрота результатов — не требует разграничения и выращивания видов возбудителя. Автоматизация процесса позволяет обрабатывать и изучать материал с получением результата за 4−5 часов.
Прямота определения возбудителя — найдя особую часть ДНК, прямо указывает на наличие недуга. Например, ИФА — находит белки-маркеры (продукты жизнедеятельности бактерий), что не дает точного подтверждения наличия болезни.
Специфичность — исследуется вещество, характерное только для конкретного возбудителя, что исключает реакцию на ложные совместно-реагирующие агенты.
Восприимчивость — может обнаружить самое малое количество вирусов.
Универсальность — основывается на нахождении фрагментов ДНК или РНК конкретных организмов. Это дает возможность провести диагностику для любых агентов из одного биоматериала, если другие методы бессильны.
Выявляет не только явные, но и скрытые инфекции — эффективен для изучения агентов трудно выращиваемых, не выращиваемых, стойких.

К сожалению, диагностика может быть ошибочной. Очень важно проходить ПЦР в клинике, которая хорошо себя зарекомендовала. Ведь несмотря на то, что ПЦР определяет наличие вируса с точностью до 100%, этот показатель может снизиться до 95%, если учреждение использует устаревшее оборудование или неподходящие реактивы.

При правильной подготовке к анализу в современных лечебных центрах такая вероятность близка к нулю.

Автор статьи врач-инфекционист, гепатолог

Источник