Расшифровка анализов пцр при гепатите

Автор Vera На чтение 8 мин.

вирус гепатитаГепатит С — вирусное заболевание печени, вызываемое флавивирусом HCV (от англ. hepatitis C virus), в структуре которого содержится молекула рибонуклеиновой кислоты (РНК). РНК несет генетический код вируса. Ее наличие позволяет проводить анализ ПЦР на гепатит С.

Опасность HCV для человека заключается и в том, что так называемое серологическое окно (промежуток времени между заражением и появлением реакции со стороны иммунной системы) может быть достаточно длительным — от нескольких недель до шести месяцев.

Это не дает обнаружить инфицирование и начать лечение вовремя.

В зависимости от индивидуальных особенностей организма носителя HCV может проявляться в острой форме, а также протекать как хроническое заболевание, которое потребует длительного и дорогостоящего лечения. При выявлении антител к HCV проводится ряд лабораторных анализов, в том числе ПЦР на гепатит С. Этот тест делается всем людям, в чьей крови были найдены антитела к HCV.

Что такое анализ ПЦР?

Лабораторный анализ ПЦР на гепатит С — исследование биологического материала с целью выявить наличие флававируса.

Полимеразная цепная реакция (так расшифровывается аббревиатура) показывает количественное значение вирусного поражения организма, его качественные характеристики, а также генотип вируса, содержащего РНК.

На их основе, а также на базе дополнительных анализов определяется способ и длительность терапии, а также эпидемиологический фактор (степень риска передачи другому носителю).

Что такое РНК-анализ на гепатит С?

проведение анализаПЦР гепатита С еще называют РНК-анализом (HCV RNA), т.к. флававирус содержит в себе частицу РНК размером вириона 30-60 нм. Одной из особенностей этого микроорганизма является высокая склонность к мутациям.

Каждый из подвидов (генотипов) вируса имеет различную резистентность, что обуславливает разные методики лечения и характер дальнейшего прогноза для пациента.

Биологический материал (венозная кровь) сдается натощак и, как правило, тестируется методом Real-Time PCR (высокочувствительной диагностики в режиме реального времени с нижним лимитом определения 15 МЕ/мл с применением закрытых автоматизированных систем).

Существуют другие тесты, например COBAS AMPLICOR с сенситивностью 50-100 МЕ/мл. Для любого лабораторного исследования важен порог чувствительности, т.е. способности реагента выявить минимальную концентрацию вируса в биологическом материале.

Референсное значение теста (нормальные показатели) — «не найдено».

Виды анализа на гепатит С методом ПЦР

ПЦР на гепатит С включает в себя три важных составляющих:

  • качественный анализ;
  • количественный анализ;
  • генотипирование.

Эти тесты позволяют определить характер виремии, а также генетические признаки возбудителя. В зависимости от чувствительности диагностической системы, исследование проводится один раз, и иногда для подтверждения или уточнения результатов делается повторный тест с более чувствительным реагентом.

Качественный ПЦР гепатита С

кровь под микроскопомАнализ ПЦР на гепатит С качественный — это другое общее название анализа полимеразной цепной реакции. Стандартная чувствительность теста, позволяющего выявить наличие вирусного поражения, находится в пределах 10-500 МЕ/мл.

Негативный анализ ПЦР на гепатит С показывает, что концентрация вируса в крови пациента находится ниже порога восприимчивости диагностической системы.

Если качественный ПЦР дал ответ «не обнаружено», то для последующего лечения важно узнать порог чувствительности реагента.

Положительный ответ на ПЦР анализ на гепатит С может быть дан уже на 4-5 сутки после заражения HCV.

Белковые фракции к флававирусу появляются значительно позже.

Количественный ПЦР гепатита С

ПЦР гепатит С количественный — это показатель вирусной нагрузки, который отображает уровень концентрации РНК флававируса в организме. Это показатель, отображающий, сколько фрагментов вирусной РНК содержится на один кубический сантиметр крови. Результаты ПЦР РНК гепатита С количественного теста в общепринятой системе обозначаются в международных единицах на миллилитр (МЕ/мл) и могут записываться разными способами, например — 1,7 млн или 1.700.000 МЕ/мл.

ДНК вирусаКоличественная ПЦР диагностика гепатита С назначается пациентам перед началом противовирусной терапии, и на 12 неделе лечения, чтобы оценить результаты выбранного метода борьбы с HCV. Вирусная нагрузка позволяет определить три важных показателя заболевания:

  • инфекционность, т.е. степень риска передачи вируса от одного носителя к другому (чем выше концентрация РНК флававируса, тем выше вероятность заразить другого человека, например, при половом контакте);
  • метод и эффективность лечения;
  • длительность и прогноз противовирусной терапии (чем выше вирусная нагрузка, тем дольше длится лечение).

Количественная ПЦР диагностика гепатита С зависит от типа лабораторного теста и порога его чувствительности. Нижней границей нормы принято считать показатель до 600.000 МЕ/мл, среднее значение находится в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл. Результаты от 800.000 МЕ/мл и выше считаются высоким уровнем концентрации РНК-содержащего вируса.

Важно: нет прямой связи между уровнем HCV RNA в крови и тяжестью заболевания. У больного может быть очень высокая вирусная нагрузка, но это еще не свидетельствует о том, что имеется серьезное поражение клеток печени.

Генотипирование

Ввиду высокой мутационной активности HCV в природе при тестировании важно выявить, какой именно генотип вируса находится в крови пациента. Всего на планете зафиксировано 11 генотипов вируса гепатита С, в которые входят множество подвидов (субтипов). На территории РФ распространены 1,2 и 3.

ПЦР РНК гепатита С вместе с генотипированием — очень важная составляющая анализа, т.к. позволяет врачу определить резистентность (устойчивость) вируса, подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения.

Разные генотипы HCV по-разному поддаются противовирусной терапии. Например, 1 генотип требует до 48 недель лечения, а его эффективность в среднем составляет 60%, тогда как 2 и 3 генотипы лечатся в два раза быстрее с эффективностью до 85%.

Генотипирование также позволяет и косвенно определить состояние печени. Например, 3 генотип HCV нередко сопровождается стеатозом, при котором в клетках органа накапливается жир.

Анализ крови на ПЦР при гепатите С должен выдать цифру, определяющую генотип. В лабораторных ответах может быть написано «не типируется» — и это значит, что в крови человека находится вирус, не определяемый тестовой системой. Это может говорить о том, что генотип нехарактерен для данной географической зоны. В этом случае следует повторно сдать анализ с более высокой чувствительностью системы диагностирования.

Расшифровка анализа ПЦР на гепатит С

расшифровка анализаТест на гепатит С ПЦР количественный расшифровать можно на основе приведенных выше данных. При получении результатов лабораторных анализов обычно пишутся следующие данные:

  • «найдено»/ «не найдено» (ПЦР качественный на гепатит С);
  • количество РНК-содержащих фракций, например 831.680 ME/мл (анализ на ПЦР количественный);
  • цифра, определяющая генотип HCV, например — 1, 2, 3, 4;
  • название теста — чаще всего Real-time.
Читайте также:  Обнаружили гепатит с при беременности что

Наиболее важным при расшифровке анализа ПЦР на гепатит С считается второй пункт, который показывает вирусную нагрузку, определяющую прогноз, способ и длительность лечения.

Важно: в результате теста рядом с цифрой, показывающей генотип, может стоять латинская буква, например, 1а, что обозначает субтип вируса. Для врача он не имеет значения: для выбора метода лечения берется только генотип.

Если ПЦР анализ на гепатит С отрицательный, а ИФА положительный — что это значит?

Для расшифровки лабораторных анализов важно обратиться к гепатологу или инфекционисту, который разъяснит полученную информацию в соответствии с видом диагностической системы и порогом ее чувствительности. В медицинской практике существует множество данных анализов крови, которые могут ввести человека без медицинского образования в заблуждение.

Например, если тест на гепатит С ПЦР отрицательный, а ИФА положительный, то может обозначать, что в данный момент в крови пациента нет HCV, но ранее он перенес острую форму гепатита С. Принято считать, что позитивный иммуноферментный анализ (ИФА) показывает, что в крови есть антитела, выработанные после вторжения вируса в прошлом. Но в современной медицинской практике ИФА анализ считается недостаточно надежным и нередко дает нетипичные результаты, поэтому врачи используют его в качестве первичного скрининга. При диагностике заболевания специалисты ориентируются именно на ПЦР тесты.

Полезное видео

В следующем видео очень подробно и интересно рассказывается, в чем суть метода ПЦР, как проводится анализ:

Заключение

Для анализа на ПЦР гепатита С обычно берется венозная кровь. Чаще всего происходит двойной забор биологического материала — для ИФА, и непосредственно для ПЦР теста. Для корректных результатов тестов требуется соблюдение основных правил лабораторного забора биологического материала:

  • кровь на анализ сдается в первой половине дня натощак;
  • между приемом пищи и забором крови должно пройти не менее 8 часов;
  • перед сдачей анализа нужно также исключить алкоголь и жареную пищу;
  • в течение суток перед сдачей крови необходимо избегать высоких физических нагрузок.

Результаты тестирования крови обычно готовы на следующий день.

Источник

Вирусный гепатит С является одним из самых серьезных заболеваний, с которым может столкнуться современный человек. Проблема в том, что это тяжелое заболевание протекает практически бессимптомно, и человек может чувствовать себя нормально, в то время как коварный недуг наносит непоправимый урон его печени. 

Чтобы избежать опасных последствий, необходимо своевременно диагностировать ВГС. Одним из лучших диагностических методов является анализ ПЦР качественный на гепатит С. Этот способ выявления диагноза является наиболее информативным и совершенно безболезненным для пациентов. Но как сдавать анализ на гепатит С ПЦР? Что представляет собой данный анализ? Как диагностируется гепатит с методом ПЦР? Поговорим об этом в статье.

Анализ на гепатит С качественный — что это?

В настоящее время существует немало методов диагностики вирусных заболеваний, включая ВГС. Но анализ крови ПЦР по гепатиту С — что это такое? Прежде всего следует сказать, что это – исследование биологических материалов пациента на предмет обнаружение патогена ВГС. Анализ крови ПЦР на гепатит С проводится в лабораторных условиях. Это исследование требуется абсолютно всем пациентам, в чьей крови были обнаружены антитела к антигенам гепатовируса. Основной целью ПЦР-диагностики гепатитов является выявление флававируса.

Аббревиатура ПЦР расшифровывается как «Полимеразная цепная реакция». Это означает, что при помощи данного анализа гепатита С качественного выявляется максимальная площадь поражения гепатовирусом клеток и тканей печени. Этот аналитический метод позволяет определить количественные масштабы поражения организма, а также качественные характеристики патогена. 

Благодаря результатам качественного анализа на гепатит ПЦР, лечащие гепатологи могут определиться со схемой терапии ВГС для конкретного пациента. Также благодаря этому методу определяется длительность терапевтического курса, так как с его помощью можно определить то, насколько сильное заражение необходимо побороть.

Статья опубликована при поддержке исследовательского института индийского фармацевтического производителя Zydus Heptiza. Официальный сайт в России Zydus.ru

Как сдавать анализ на гепатит С ПЦР?

При постановке диагноза ВГС проводится большое количество различных исследований с целью выявления максимально подходящего способа терапии рассматриваемого заболевания. Но как сдавать анализ на ПЦР при гепатите С?

Прежде чем ответить на этот вопрос, следует уточнить, что рассматриваемый тип анализов еще называют РНК-тестом. Ведь во флававирусе располагается частица РНК, габариты вириона которой – от 30 до 60 нм. Вирус склонен к мутациям, и это всегда учитывается при диагностике подобного типа. Резистентность каждого генотипа патогена ВГС значительно различается, поэтому прогноз течения болезни очень сильно зависит от этого анализа на качественный гепатит.

Но как сдавать кровь на ПЦР на гепатит С? При диагностике большое значение имеют как подготовительные действия пациента, так и сама процедура сдачи крови:

  • В течение суток до сдачи крови на качественный ПЦР на гепатит пациенту следует отказаться от жирной пищи, алкоголя и табакокурения. В противном случае результаты окажутся неточными;
  • Вечером, накануне сдачи анализа крови на гепатит с ПЦР, больной не должен ничего есть;
  • Сдавать биологические материалы следует ранним утром, до 8 часов. Есть и даже пить перед этим категорически запрещается;
  • Образец крови пациента собирают из вены при помощи одноразового стерильного шприца. В рамках личной безопасности пациенту рекомендуется проследить, чтобы процедура проводилась исключительно стерильным шприцом.

После прохождения анализа на гепатит С ПЦР пациент отправляется домой. Крови для лабораторного тестирования забирается немного, поэтому негативных эффектов от незначительной ее потери не последует.

Читайте также:  Анализ крови на антитела гепатита

Расшифровка результатов исследования

Расшифровкой ПЦР диагностика гепатита С занимаются в лабораторных условиях. Работники лабораторий проводят ряд специфических исследований, результат которых фиксируется в письменном виде. Стандартизированная чувствительность теста, благодаря которой можно выяснить наличие и распространение патогена, колеблется в пределах от 10 до 500 МЕ/мл.

Результаты тестирования расшифровываются подобным образом:

  • Положительный результат говорит о большой концентрации патогена в крови носителя. При этом чем выше показатель, тем серьезнее болен пациент, страдающий ВГС;
  • Негативные показатели теста свидетельствуют о чрезвычайно низкой концентрации гепатовируса в крови человек. Если гепатит С ПЦР не обнаружено, для последующей терапии следует выявить предельный порог чувствительности биологического материала пациента к различным реагентам.

После проведенного исследования биоматериала, работниками медицинской лаборатории выносится конкретный вердикт, который в обязательном порядке документируется и архивируется.

Что делать пациенту после получения результатов исследования?

После получения результатов исследования образцов крови, пациенту следует отправиться к лечащему врачу. Самостоятельно делать выводы о своем диагнозе и намечать определенное лечение не рекомендуется категорически.

В зависимости от результатов тестирования, гепатолог назначает ту или иную терапевтическую схему с применением активных противовирусных препаратов. В зависимости от определенного аналитическим образом генотипом ВГС, могут назначаться следующие схемы лечения этого опасного заболевания:

  • Софосбувир в сочетании с Ледипасвиром при 1, 4, 5 и 6 генотипах;
  • Софосбувир и Даклатасвир – при 1, 2, 3 и 4;
  • Софосбувир в сочетании с Велпатасвиром – при любом из известных генотипов патогена.

В зависимости от общего состояния организма, концентрации гепатовируса и особенностей поражения, может назначаться терапия длительностью в 12 или 24 недели, с применением Рибавирина или без такового. Пациенту следует приобрести лекарства на весь терапевтический период, так как прерывать его нельзя ни в коем случае. 

Однако вовсе не обязательно копить деньги на дорогие американские лекарства – можно приобрести более дешевые индийские аналоги. Эти препараты изготавливаются по официальной рецептуре. Более низкая стоимость связана с возможностью массового производства препарата. При этом индийские производители настолько уверены в высоком качестве своей продукции, что предоставляют своим покупателям любые гарантии. К примеру, Zydus Heptiza предлагает Гарантию Выздоровления. Это – документ, согласно которому пациент имеет право на повторное лечение за счет компании, если предыдущая терапия не помогла.

Важно! После приобретения лекарства больному необходимо полностью следовать рекомендациям лечащего врача и ежедневно употреблять лекарство в течение всего терапевтического периода.

Где можно сдать качественный анализ на ПЦР?

Итак, ответ на вопрос «Анализ ПЦР на гепатит С как сдавать?». Также известно, что делать пациенту после соответствующего обследования. Но остается еще одна дилемма – где именно можно сдать кровь на анализ ПЦР на гепатит С качественный.

По большому счету, в нашей стране пройти диагностику рассматриваемого типа можно:

  • В государственных поликлиниках;
  • В частных клиниках с обслуживанием эксклюзивного уровня;
  • В больницах и клиниках стационарного типа;
  • В независимых медицинских лабораториях.

Также анализ крови ПЦР гепатита С можно сдать и в зарубежных клиниках и лабораториях. Этот метод исследования относится к стандартным.

Что еще следует знать о качественном анализе крови на гепатит С?

При возникновении необходимости ПЦР-диагностики гепатита С следует знать некоторые особенности этой формы тестирования. В частности:

  • Результаты рассматриваемого анализа крови могут быть положительными на ВГС уже на 4-5 сутки после инфицирования. Белковые соединения формируются позже;
  • При расшифровке результатов качественного анализа крови на гепатит С рядом с генотипом патогена может стоять буква. Например, «1а». Это обозначение субтипа, которое никоим образом не влияет на особенности терапии;
  • Результаты тестирования предоставляются очень быстро. Уже на следующие сутки после проведения диагностики пациент получает соответствующий документ;
  • Одновременно с данным тестом кровь берется и для обследования ИФА.

Бытует мнение насчет качественного анализа на гепатит С, что это исследование крови пациента не является самым лучшим способом определения уровня типа ВГС. Это мнение верно лишь отчасти, потому что диагностика должна быть комплексной.

Оцените статью:

| Всего голосов: 1 Средняя оценка: 5

Источник

Диагностика гепатита включает целый комплекс анализов для определения наличия вируса в крови. Одним из способов обнаружения заболевания является такой метод исследования, как ПЦР на гепатит С. Что это такое, почему анализ ПЦР на гепатит так важен, как его проводят и расшифровывают?

Что это такое

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, используется для диагностики язвы желудка, колита, энтерита. Но главное ее преимущество заключается в том, что она помогает обнаружить в организме как сам вирус гепатита C, так и антитела к нему, которые обладают способностью не вызывать реакции иммунной системы из-за их способности к мутации.

Исследование и его суть заключаются в создании определенных условий, при которых происходит цепная реакция РНК гепатита. Если при их сопоставлении с нуклеотидной последовательностью вируса гепатита C выявляются совпадения, это свидетельствует о том, что в крови имеются вирусные частицы, а в печени происходят процессы распада. Если количество вируса ниже определенного уровня, выносится отрицательный диагноз, если выше – положительный.

Важно понимать, что в первом случае не исключается недавнее инфицирование или мощная противовирусная терапия, являющиеся факторами, снижающими концентрацию опасных частиц, и анализ ПЦР на гепатит не работает. Высокий же уровень содержания вируса в организме в большинстве случаев сигналит о том, что в печени вот-вот начнется инфекционный процесс. Не исключено, что заболевание находится в запущенном состоянии и понадобится серьезная терапия, вплоть до пересадки органа.

Читайте также:  Гепатит с заражение при половом контакте

Существует два вида исследования крови методом ПЦР при гепатите: количественный анализ и качественный анализ.

Вирус гепатита
Враг печени номер один

Количественный ПЦР, как упомянуто выше, определяет концентрацию РНК вируса гепатита. Кроме того, он способен дать информацию об интенсивности, с которой развивается патология, и эффективности назначенного лечения. Количественный анализ на гепатит C крайне важен, поскольку фиксирует резистентность к действию противовирусных препаратов и позволяет скорректировать терапию.

После того как больной пройдет курс лечения, ПЦР помогает определить дальнейший порядок назначений. В некоторых случаях выявляется необходимость дополнительных обследований. Например, если уровень АЛП повышен (но не более, чем в 2 раза в течение полугода), а расшифровка анализа указывает на вирусную нагрузку выше 105 МЕ/мл, пациенту назначается биопсия. Если количественный анализ на ПЦР выявляет сильное воспаление и фиброз, больному прописывают курс лечения противовирусными препаратами.

В ситуациях, когда большое количество вирусных частиц сочетается с высоким показателем АЛТ, пациенту незамедлительно должно быть назначено лечение без проведения дополнительных диагностическим мероприятий.

Качественно расшифровать показатели при количественном анализе крови на гепатит могут только квалифицированные и опытные специалисты, а современные технологии помогают сделать это при низкой концентрации вируса в крови.

Качественный анализ ПЦР направлен на определение и подтверждение фактического присутствия вируса в организме. Его проводят при обнаружении в крови антител к гепатиту. Именно качественный анализ на гепатит гарантирует точность результата на 100% и позволяет поставить диагноз на ранних стадиях заболевания, что дает возможность начать борьбу с гепатитом уже в течение первых недель после заражения и повышает шансы на полное выздоровление (в случае с заболеванием типа B).

Печень
Страдает не только печень, но и соседние органы

Преимущества ПЦР

При исследовании методом ПЦР и расшифровке анализа крови на гепатит можно также определить генотип возбудителя заболевания. Всего существует 6 генотипов вируса и большое количество субтипов, однако в нашем регионе распространение получили 1, 2 и 3 генотипы.

Другими преимуществами данного вида диагностики являются:

  • высокая точность полученных показателей и низкая вероятность ошибки в них;
  • высокий уровень чувствительности к вирусным частицам в крови;
  • возможность выявления сразу нескольких возбудителей;
  • диагностика болезнетворных внутриклеточных микроорганизмов, обладающих высокой антигенной изменчивостью;
  • работа с расшифровкой анализа на гепатит позволяет обнаружить скрытые текущие инфекции.

Кому назначают

Анализ ПЦР на гепатит обязательно сдают следующие категории людей:

  • беременные женщины;
  • сотрудники учреждений здравоохранения;
  • потенциальные доноры крови и органов;
  • те, кто имеют характерные признаки заболевания;
  • ВИЧ-инфицированные лица;
  • наркозависимые;
  • лица, ведущие беспорядочную половую жизнь.

Беременная женщина на приеме у врача
Планируя ребенка, необходимо сделать анализ на гепатит

Как проводится анализ и требуется ли к нему подготовка

Забор крови для ПЦР-исследования производится из вены. Как правило, это происходит утром до того, как человек поел, поскольку после приема пищи должно пройти минимум 8 часов. В крайних случаях кровь могут взять на исследование днем или вечером, но временной зазор между анализом и приемом пищи должен составлять не менее 5 часов.

Человеческий фактор может количественно отразиться на результатах: их точность в некоторых случаях снижается со 100% до 95%, поэтому к сдаче крови необходимо заблаговременно готовиться. Качество биоматериала для анализа будет соответствующим при следовании пациентом следующим правилам:

  • перед сдачей крови можно пить только чистую воду;
  • за двое суток до проведения исследования нужно отказаться от приема жареной и жирной пищи, а также алкогольных напитков;
  • за сутки до посещения лаборатории следует прекратить прием лекарственных средств. В случае если это не представляется возможным, об этом в обязательном порядке необходимо предупредить лаборанта и лечащего врача;
  • накануне нужно избегать стрессовых ситуаций и физических нагрузок;
  • не следует проходить ультразвуковое, рентгенологическое и инструментальное исследования незадолго до сдачи крови;
  • в течение часа до анализа необходимо воздержаться от курения;
  • за 20 минут до сдачи крови нужно отвлечься, успокоиться и выровнять дыхание.

Если исследование проходит ребенок до 5 лет, родители должны проследить, чтобы он пил кипяченую воду каждые 10 минут в течение получаса до забора биоматериала.

Расшифровка полученных данных

Расшифровка анализа может быть представлена словами (в случае качественного исследования), например, «не обнаружено» или «ниже диапазона изменений». В первом случае, это свидетельствует о том, что инфекция не обнаружена. Во втором – что вирус присутствует, но в незначительном количестве. Такая ситуация требует проведения повторного исследования.

Вирус
Вирус типа С

Вирусная нагрузка определяется по количеству инфекционного РНК и обозначается как МЕ/мл или копии/мл.

Нормальным показателем (нормой) количественного анализа на гепатит C является диапазон от 1,8х102 до 2,4х107 МЕ/мл.

Концентрация вируса в крови может быть:

  • низкой: от 600 МЕ/мл до 3х104/мл;
  • средней: от 3х104 МЕ/мл до 8х105 МЕ/мл;
  • высокой: более 8х105 МЕ/мл.

Количественны и качественны анализ ПЦР на гепатит позволяет определить наличие вируса в организме и уровень его концентрации. Полиразмерная цепная реакция способна диагностировать заболевание на ранних стадиях, но для этого необходимо, чтобы больные как можно раньше обращались в медицинские учреждения за помощь и строго следовали рекомендациям лечащего врача.

Источник