Активность вируса гепатита с анализ

Вирусный гепатит С представляет серьезную медико-социальную проблему. Около 180 млн. человек в мире сегодня страдают этим заболеванием, 350 тысяч ежегодно умирает. Длительное скрытое (бессимптомное) течение заболевания приводит к запоздалой диагностике. Анализ на гепатит С проводится с целью диагностики заболевания, дифференциальной диагностики, с его помощью определяют ранее перенесенное заболевание «на ногах».

Исследование применяется у лиц с симптомами гепатита С, повышенным уровнем ферментов печени, при получении сведений о перенесенном ранее заболевании неуточненной этиологии, у лиц из групп риска и скрининговых исследованиях.

Диагностика гепатита С проводится в 2 этапа:

1 этап. Определение наличия в сыворотке крови антител к вирусу (анти HCV).

2 этап. При наличии анти HCV проводится тест на наличие РНК (рибонуклеиновой кислоты) методом ПЦР на гепатит С. Тест позволяет выявить фазу процесса — «активная/неактивная», решить вопрос о необходимости лечения. Известно, что около 30% инфицированных лиц, самостоятельно избавляются от инфекции, так как имеют сильную иммунную систему и в лечении не нуждаются. С помощью ПЦР определяется генотип вируса. Разные генотипы по-разному реагируют на лечение.

Степень поражения печени определяется с помощью биопсии или других инвазивных и неинвазивных тестов (например, фибротест). Степень стеатоза печени определяется с помощью стеатотеста. Во всех случаях диагностика гепатита С должна базироваться на данных эпидемиологического расследования, клинике заболевания и данных биохимического исследования крови.

Рис. 1. Тяжелые последствия вирусного поражения печени — напряженный асцит.

Анализ на гепатит С: анти HСV

Антитела к вирусам (анти HCV) являются специфическими маркерами инфицирования. В организме больного человека к белкам вируса (антигенам) вырабатываются специфические антитела — иммуноглобулины класса IgM и IgG (анти HCV IgM/IgG).

При получении положительного результата на антитела выполняется подтверждающий тест — определение суммарных антител к структурным и неструктурным белкам вируса. К структурным оболочечным белкам вируса Е1 и Е2 вырабатываются aнти HCV IgM, нуклеокапсидному белку С — cor (aнти HCV IgG), к 7-и неструктурным белкам-ферментам NS (aнти HCV NS IgG).

Для выявления антител к вирусу гепатита С используется иммуноферментный анализ (ИФА). Для подтверждения (+) результатов ИФА применяют подтверждающие тесты — RIBA (рекомбинатный иммуноблотинг), реже Inno-Lia (анализ синтетических пептидов).

Анализ на анти HCV IgM

Антитела IgM появляются в сыворотке крови через 4 — 6 недель после инфицирования и быстро достигают максимума. По окончании острого процесса (через 5 — 6 мес.) их концентрация падает.
Длительная регистрация наличия анти HCV IgM говорит о том, что гепатит С приобрел хроническое течение.
Повышение уровня IgM в период хронического течения говорит о реактивации инфекционного процесса.
Уровень иммуноглобулинов IgM позволяет проводить оценку эффективности лечения.

Анализ на анти HCV IgG

Антитела IgG появляются в сыворотке крови больного через 11 — 12 недель после инфицирования. На 5 — 6 месяце регистрируется пик концентрации. Далее антитела сохраняются на постоянном уровне в течение всего срока заболевания в острый период и период выздоровления.

Анализ на суммарные антитела к вирусу гепатита С

Суммарные антитела к вирусу (аnti HCV total) используются для диагностики «свежих» случаев заболевания. Суммарные антитела — это антитела нуклеокапсидному белку С — cor (aнти HCV IgG) и 7-и неструктурным белкам-ферментам NS (aнти HCV NS IgG) — aнти HCV NS3, aнти HCV NS4 и aнти HCV NS5.

Суммарные антитела к вирусу гепатита С появляются в сыворотке крови инфицируемого спустя 11 — 12 недель от начала инфицирования, достигают пика к 5 — 6 месяцу и сохраняются на постоянном уровне в течение всего срока заболевания в острый период и в течение 5 — 9 лет после периода выздоровления.

Каждый из видов антител имеет самостоятельное диагностическое значение:

Анти HCV C (cor) являются основными показателями контакта с вирусами гепатита С.
Анти HCV NS3 выявляются одними из первых в процессе сероконверсии (выработки антител в ответ на присутствие вируса), указывают на остроту инфекционного процесса и свидетельствуют о высокой вирусной нагрузке. С их помощью определяется гепатит С у больных, не подозревающих у себя наличие инфекции. Продолжительное нахождение анти HCV NS3 в сыворотке крови говорит о высоком риске хронизации процесса.
Анти HCV NS4 говорят о том, что гепатит С имеет длительное течение. По уровню титров антител можно судить о степени поражения печени.
Анти HCV NS5 указывают на наличие вирусной РНК. Их обнаружение в острый период является предвестником хронизации процесса. Высокие титры антител на фоне лечения говорят о том, что больной не отвечает на лечение.
Анти HCV NS4 и анти HCV Данный вид антител появляются на поздних сроках развития гепатита. Их снижение указывает на формирование ремиссии инфекционного процесса. После излечения титры антител NS4 и NS5 снижаются в течение 8 — 10 лет. От повторного заражения этот вид антител не защищает.

Рис. 2. Макропрепарат. Цирроз печени — грозное осложнение вирусного гепатита С.

к содержанию ↑

Расшифровка анализа на гепатит С — анти HСV

Отсутствие антител к вирусу гепатита С обозначается термином «Норма». Однако это не всегда это обозначает отсутствие заболевания у человека. Так отсутствие антител в крови у инфицированного человека регистрируется до момента их появления в крови — в срок до 6-и месяцев с момента заражения (в среднем через 12 недель). Период отсутствия антител в крови инфицируемого называется «серологическим окном». Высокой специфичностью (до 99,7%) обладают тест-системы 3-го поколения (ELISA-3). Около 0,3% приходится на получение ложноположительных результатов.

Наличие анти HCV свидетельствуют о текущей инфицированности или перенесенной в прошлом инфекции.

Обнаружение антител IgM и антител Corе IgG , нарастание титров антител Corе IgG и (+) результат ПЦР при наличии клинических и лабораторных признаков острого гепатита говорит об остром периоде заболевания.
Обнаружение антител IgM, анти HCV Corе IgG, анти HCV NS IgG и (+) результат ПЦР при наличии клинических и лабораторных признаков заболевания указывает на реактивацию хронического гепатита С.
Обнаружение анти HCV Corе IgG и анти HCV NS IgG при отсутствии клинических и лабораторных признаков заболевания и отрицательном результате ПЦР говорит о наличии у больного хронического гепатита в латентной фазе.

Рис. 3. Макропрепарат печени. Первичный рак печени — грозное осложнение гепатита С.

к содержанию ↑

ПЦР на гепатит С

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является «золотым стандартом» диагностики вирусного гепатита С. Высокая чувствительность теста позволяет выявлять генетический материал вирусов (РНК) даже если их в исследуемом материале единицы. ПЦР способна выявлять РНК вирусов задолго до появления антител в сыворотке крови, но не ранее чем с 5-го дня от момента инфицирования. При заболевании с помощью ПЦР РНК вирусов обнаруживаются не только в сыворотке крови, но и в биоптатах печени.

Полимеразная цепная реакция позволяет определить наличие или отсутствие в крови вирусов гепатита С и решить вопрос о начале лечения. Известно, что до 30% больных самостоятельно избавляются от инфекции, так как имеют сильную иммунную систему и в лечении не нуждаются.
С помощью ПЦР определяется генотип вируса. Разные генотипы по-разному реагируют на лечение.
ПЦР применяется с целью контроля за эффективностью лечения.
ПЦР применяется при отсутствии антител в крови, но при наличии весомых подозрений на заболевание (повышение уровня щелочной фосфатазы, общего билирубина, превышение в 2 раза печеночных ферментов АСТ и АЛТ).
Анализ ПЦР на гепатит С используется с целью контроля над внутриутробной передачей вирусов гепатита.

к содержанию ↑

Вирусная нагрузка при гепатите С

С помощью анализа ПЦР возможно определить не только наличие РНК вирусов в крови — качественный анализ (обнаружено/не обнаружено), но и их количество — вирусную нагрузку (количество единиц вирусной РНК в 1 мл крови). Количественный показатель ПЦР применяется с целью контроля эффективности лечения.

Методы, применяющиеся для проведения ПЦР, обладают разной чувствительностью. В РФ согласно методическим рекомендациям 2014 года рекомендовано применять методики, обладающие чувствительностью 25 МЕ/мл и менее. Согласно рекомендациям Европейской ассоциации по изучению печени 2015 года предлагается применять методики определения вирусной РНК, обладающих чувствительностью 15 МЕ/мл и менее.

В зависимости от чувствительности тест-системы больной получает тот или иной результат исследования:

Минимальная чувствительность анализатора COBAS AMPLICOR составляет 600 МЕ/мл (анализатор старого поколения).
Минимальная чувствительность анализатора COBAS AMPLICOR ВГС-TEST составляет 50 МЕ/мл, что составляет 100 копий в 1 мл.
Минимальная чувствительность анализатора РеалБест РНК ВГС составляет 15 МЕ/мл, что составляет 38 копий в 1 мл (входит в группу современных тест-систем). Специфичность данных анализаторов составляет 100%. С их помощью выявляются РНК вирусов гепатита С субтипов 1а и 1b, 2а, 2b, 2c и 2i, 3, 4, 5а и 6.

При наличии копий РНК ниже порога чувствительности данного анализатора пациент получает ответ «не обнаружено».

Рис. 4. Пример анализа ПЦР (количественный тест). Определение вирусной нагрузки.

Интерпретация результатов анализа ПЦР на гепатит С

Отсутствие РНК вируса указывает на отсутствие инфицирования.
Отсутствие РНК в анализе на фоне наличия антител в крови указывает на исчезновение болезни под влиянием лечения или при самоизлечении.
В ряде случаев вирус присутствует в крови, но в подпороговых уровнях, когда его концентрация не улавливается анализаторами. Такие больные остаются опасными в плане заражения.
Выявление РНК вируса в течение 6 месяцев подряд у больных с острым гепатитом С говорит о том, что заболевание приняло хроническое течение.
Снижение вирусной РНК в анализах на фоне лечения говорит об эффективности проводимой терапии и наоборот.

Рис. 5. Макропрепарат. Жировой гепатоз — одно из последствий заболевания.

к содержанию ↑

Основные биохимические анализы крови при гепатите С

Биохимические анализы крови помогают установить функциональное состояние многих органов и систем человека.

Анализ крови на печеночные ферменты АЛТ и АСТ

Печеночные ферменты синтезируются внутриклеточно. Они принимают участие в синтезе аминокислот. Их большое количество находится в клетках печени, сердца, почек и скелетной мускулатуры. При поражении органов (нарушение целостности клеточных мембран) ферменты поступают в кровь, где их уровень повышается. Повышенный уровень ферментов регистрируется при поражении (лизисе, разрушении) печеночных клеток, инфаркте миокарда и других заболеваниях. Чем выше уровень трансаминаз в сыворотке крови, тем больше клеток подверглось разрушению. АЛТ преобладают в клетках печени, АСТ — в клетках миокарда. При разрушении клеток печени уровень АЛТ повышается в 1,5 — 2 раза. При разрушении клеток миокарда уровень АСТ повышается в 8 — 10 раз.

При диагностике хронического вирусного гепатита необходимо обращать внимание на соотношение АСТ/АЛТ (коэффициент де Ритиса). Превышение уровня АСТ над АЛТ говорит о поражении печеночных клеток.

Норма АСТ для мужчин составляет до 41 ед./л, женщин — до 35 ед./л, детей старше 12 лет — до 45 ед./л.
Норма АЛТ для мужчин составляет до 45 ед./л, женщин — до 34 ед./л, дети 12 лет и старше — до 39 ед./л.
В норме (у здоровых людей) коэффициент АСТ/АЛТ имеет значение от 0,91 — 1,75.

Анализ крови на билирубин

Билирубин является продуктом распада гемоглобина. Билирубин в крови содержится в виде непрямого (до 96%) и прямого (4%). Процесс распада этого вещества происходит, в основном, в клетках печени, откуда с желчью выводится из организма. При разрушении клеток печени уровень билирубина в сыворотке крови возрастает. В норме содержание общего билирубина составляет менее 3,4 — 21,0 мкмоль/л. При уровне 30 — 35 мкмоль/л и выше билирубин проникает в ткани, из-за чего кожа и склеры приобретают желтушную окраску.

Рис. 6. Желтуха — один из признаков поражения печени.

Все о гепатите С

Статьи раздела «Гепатит С»

Самое популярное

ПОНРАВИЛАСЬ СТАТЬЯ?

Подпишитесь на нашу рассылку!

Источник

Активность вируса гепатита с анализ

Активность гепатита С – это степень интенсивности воспаления печени, вызванного вирусом. Если она незначительная, болезнь прогрессирует медленно, а если высокая – быстро. Интенсивность инфекционного процесса влияет на успешность медикаментозного лечения, выбор антивирусных препаратов. Чем выше вероятность осложнений, тем чаще прибегают к многокомпонентной терапии безинтерфероновыми лекарствами.

Классификация по степени активности

С помощью лабораторных анализов и аппаратных обследований определяют активность воспаления печени. Чем она выше, тем больше риск фибротических и цирротических изменений в печеночной ткани (паренхиме). В зависимости от стадии гепатит С осложняется фиброзом, жировым гепатозом, циррозом, гепатоцеллюлярной карциномой. От состояния органов гепатобилиарной системы – печени, желчных путей и желчного – зависит прогноз противовирусной терапии (ПВТ).

Минимальная

Хронический гепатит с минимальной активностью воспаления имеет наиболее благоприятный прогноз. Вирус HCV проникает в клетки печени (гепатоциты), вызывая минимальные изменения в их структуре. В связи с сохранением работоспособности гепатобилиарной системы протекает в бессимптомной форме. В редких случаях возникают жалобы на:

тошноту;

снижение аппетита;

эмоциональную нестабильность;

быструю утомляемость.

Минимальная степень активности объясняется генетической недостаточностью иммунной системы. Из-за угнетения клеток-защитников (Т-киллеров, Т-лимфоцитов) организм не подавляет размножение HCV. Поэтому не возникают естественные реакции, при которых выделяются медиаторы воспаления.

Низкая

Если в крови обнаруживается малый процент РНК вируса, это свидетельствует о низкой активности вирусного гепатита. Из-за слабой инфекционной нагрузки симптоматика почти отсутствует, изменения в печени происходят медленно. Заболевание проявляется диспепсическим синдромом, для которого характерны:

тяжесть в области желудка;

отрыжка;

чувство переполнения;

раннее насыщение;

ухудшение аппетита;

изжога;

тяжесть после еды.

Если гепатит сочетается с другими заболеваниями ЖКТ, больные жалуются на расстройства стула, горечь во рту, налет на языке.

Умеренная

При активной репликации вируса гепатита С отмечается умеренное воспаление гепатоцитов. Эта форма гепатита диагностируется у половины заболевших. Вследствие нарушения печеночных функций клиническая картина быстро пополняется новыми симптомами:

тошнота;

желтушность кожи;

сонливость;

головные боли;

запоры;

боли в суставах;

обесцвечивание кала;

потемнение мочи.

В результате нарушения работы гепатобилиарной системы и застоя желчи возникают колющие боли в боку справа. В анализах крови гепатит умеренной активности проявляется увеличением концентрации печеночного фермента АЛТ.

Высокая

Гепатит с высокой степенью активности имеет наименее благоприятный прогноз. Такие пациенты нуждаются в срочном проведении ПВТ. Миллионные копии HCV внедряются в клетки печени, вызывая воспаление. Чем меньше в органе остается функциональной ткани, тем ярче клиническая картина:

боль в эпигастрии;

метеоризм;

непереносимость жирной пищи;

снижение массы тела;

отек конечностей;

неустойчивый стул;

кожный зуд;

телеангиоэктазии (сосудистые звездочки на коже).

Вирусное заболевание с высокой активностью воспаления нередко осложняется циррозом, который носит необратимый характер.

Чем интенсивнее происходит репликация HCV, тем выше вирусная нагрузка. При быстром прогрессировании гепатита гепатоциты замещаются рубцовой тканью, что приводит к фиброзу.

Хронический вирусный гепатит С с холестазом

При гепатите с высокой активностью инфекционного процесса страдает не только печень, но и желчные протоки, пузырь. Из-за изменений в структуре органов нарушается отток желчи, что становится причиной холестатического синдрома. Он наблюдается у многих пациентов с длительно протекающим заболеванием – более 8-12 месяцев.

Холестаз – замедление оттока желчи, связанное с повреждением гепатоцитов или непроходимостью желчных путей. Если проблема вызвана разрушением функциональной ткани печени, болезнь протекает в безжелтушной, а если сужением желчных протоков – в желтушной форме.

Признаки хронического гепатита с холестазом:

увеличение печени;

обесцвечивание кала;

расстройство пищеварения;

боль в подложечной области;

темная пенистая моча;

раздражительность;

нарушение сна.

При высокой активности гепатита чаще встречается внепеченочная форма холестаза. Застой желчи ведет к всасыванию в кровь желчных пигментов, из-за чего слизистые оболочки, глазные яблоки и кожа окрашиваются в желтый цвет. Вследствие интоксикации возникают аллергические реакции – высыпания, зуд.

Из-за ухудшения желчеотведения увеличивается нагрузка на гепатоциты, что только ускоряет их массовую гибель. Несвоевременное устранение холестаза опасно фиброзом и циррозом печени.

Как выявляют активность

Чтобы уточнить стадию воспаления печени, определяют индекс гистологической активности (ИГА) по Knodell. Он представляет собой сумму нескольких компонентов:

портальное воспаление и отмирание печеночных долей – 0-4 балла;
выраженность мостовидного/перипортального некроза долей печени – 0 до 10 баллов;
степень фибротических изменений в печени – 0-4 балла.

Если ИГА составляет 0 баллов, воспаление отсутствует. При 1-3 баллах активность гепатита минимальная, при 4-8 – низкая, при 9-12 – умеренная, а при 13-18 – высокая.

Для определения активности инфекционного воспаления делают серологический и молекулярный анализ. Это индикация в плазме крови специфических иммуноглобулинов (антител) к вирусу и определение самого возбудителя.

Иммуноферментный анализ (ИФА). В ходе лабораторного анализа определяют антитела к HCV (anti-HCV) двух классов – IgM, IgG. Их наличие свидетельствует о контакте организма с возбудителем гепатита, но не доказывает наличие вируса в данный момент.
Качественный и количественный ПЦР-анализ. При молекулярно-биологическом исследовании определяют генотип возбудителя, количество его копий. По концентрации вируса уточняют степень вирусной нагрузки, активность гепатита.

Из неинвазивных методов дополнительно назначаются печеночные пробы. При высокой активности воспаления из поврежденных гепатоцитов высвобождаются ферменты – АлАт, АсАт. Чем выше их концентрация в крови, тем интенсивнее воспаление паренхимы.

Результаты биохимии крови при гепатите разной степени активности

Активность инфекционного процесса	Во сколько раз увеличена концентрация АлАт и АсАт
минимальная	1.5-2
низкая	2-5
умеренная	5-10
высокая	свыше 10

Прижизненная биопсия (забор кусочка ткани и рассматривание его под микроскопом) – самый достоверный метод оценки активности вирусной болезни. Он отличается высокой информативностью и точностью, так как по изменениям в печеночной паренхиме удается определить степень ее рубцевания.

Лечение вируса гепатита С (ВГС) безинтерфероновой схемой

Лечение

Для уничтожения вируса гепатита С (ВГС) прибегают к противовирусной терапии. В настоящее время все чаще используются безинтерфероновые схемы. Их основу составляют препараты прямого антивирусного действия (ПППД), которые блокируют (ингибируют) синтез белков возбудителя трех типов:

NS5A (асвиры) – Омбитасвир, Элбасвир, Ледипасвир, Велпатасвир, Даклатасвир;
NS5B (виры) – Беклабувир, Софосбувир, Дасабувир;
NS3/NS4 (превиры) – Боцепревир, Нарлапревир, Симепревир, Телапревир, Паритапревир.

Вне зависимости от активности вирусного заболевания терапия только одним препаратом ППД не проводится. Для достижения устойчивого вирусологического ответа используют комбинации лекарств разных групп.

В зависимости от схемы ПВТ лечение занимает от 8 до 24 недель. Для определения эффективности лекарств периодически выполняют ПЦР-диагностику. На уменьшение вирусной нагрузки указывает сокращение числа вирионов в крови.

Для купирования и профилактики холестаза используются препараты, поддерживающие печень

ферменты (Креон, Панкреатин) – стимулируют пищеварение, предотвращая запоры и интоксикацию;
желчегонные средства (Одестон, Урбихол) – улучшают желчеотведение, стимулируют функции гепатоцитов;
гепатопротекторы (Гепафор, Эссенциале) – ускоряют регенерацию печеночной ткани, уменьшают восприимчивость гепатоцитов к токсинам.

Сочетание вирусной болезни с другими гепатитами (А, Б, Е) или ВИЧ-инфекцией ухудшает прогноз лечения. У таких пациентов чаще обнаруживается высокая активность инфекционного процесса. Но в случае своевременного прохождения ПВТ многим из них удается достичь выздоровления.

Источник