Днк гепатита в вирусная нагрузка

Гепатит В признается одним из самых опасных заболеваний печени, которое имеет много осложнений. Для выявления патологии проводится ряд диагностических методов. С их помощью определяется наличие заболевания, его стадия, степень распространения. Часто используется метод определения вирусной нагрузки при гепатите В.

Сдавали ли Вы когда-нибудь кровь на Гепатит В?

ДаНет

Возбудитель гепатита В

Заболевания, относящиеся к группе гепатитов, имеют сходную симптоматику. Но в основе механизма развития болезней – возбудители, не находящиеся друг с другом в близком родстве. Возбудителем гепатита В является вирус семейства гепаднавирусов. Реже он поражает поджелудочную железу и почки.

По исследованиям ученых он намного заразнее микроорганизмов, вызывающих иммунодефицит человека. В среднем инкубационный период составляет 3-6 месяцев. Первые признаки могут появиться спустя 2 месяца с момента заражения.

Вирус попадает в организм разными способами. Прямой путь – через кровь. Но микроорганизмы содержатся и в сперме, влагалищных и менструальных выделениях, слюне. Они обнаруживаются в анализах мочи и кала. Вирус приспосабливается к условиям внешней среды, проникая в организм даже через микротрещинки на коже и тканях слизистых оболочек.

Что такое вирусная нагрузка при гепатите В?

Вирусной нагрузкой называется метод, с помощью которого диагностируется заболевание, определяется его стадия и количество вирусных клеток, поразивших организм. Метод применяется при подозрении на патологию печени и дает развернутую картину изменений.

Если число вирусных клеток в крови выше показателей нормы, говорят о патологическом процессе, затронувшем здоровые клеточные структуры. Необходимо вовремя остановить заражение, назначив адекватное лечение.

Методы определения вирусной нагрузки

Для диагностики вируса в организме пациенту назначают комплексное обследование на присутствие патогенных клеток. Кроме вспомогательных исследований – анализов крови, мочи, кала оценить вирусную нагрузку при гепатите В можно несколькими способами. Каждый из них имеет достоинства и недостатки и применяется с учетом клинической картины и особенностей организма пациента.

ПЦР (полимерная цепная реакция) – самый информативный метод тестирования.

С его помощью обнаруживается даже небольшое количество вируса в крови, когда болезнь находится на ранней стадии развития. Его назначают пациентам, когда нет полной уверенности в диагнозе.

Качественная характеристика ПЦР подразумевает присутствие вирусных микроорганизмов в крови. Количественный показатель показывает, насколько вирус активен. Выявленная активность показывает стадию заболевания, позволяет определить, насколько вирус восприимчив к лекарственным препаратам.

Метод разветвленной ДНК.

Характеризуется меньшей чувствительностью в сравнении с ПЦР и может не обнаружить присутствие вируса на ранней стадии заболевания. Тест применяется с целью подтвердить диагноз при проявлении яркой клинической картины заболевания.

Транскрипционная амплификация – информативная методика диагностики гепатитов и других заболеваний печени.

Обнаружив признаки заболевания, врач назначает УЗИ и КТ печени, взятие образца тканей органа для детального анализа и выявления осложнений и сопутствующих заболеваний.

Таблица с расшифровкой показателей вирусной нагрузки при гепатите В

Существуют общепринятые показатели вирусной нагрузки.

Единицей измерения является концентрация РНК в 1 мл крови. Возможные результаты анализа и их расшифровка представлены в следующей таблице. Степень нагрузки показывает активность вируса.

Степень нагрузки	Числовой показатель
Низкая. Вирус неактивен	меньше 10*3
Умеренная	104 –105
Большая	10*6
Максимально высокая	10*7

По результатам тестирования врач определяет методику лечения. При этом учитываются стадия болезни, индивидуальные особенности организма пациента, его возраст и сопутствующие заболевания. При назначении лекарственных препаратов врач консультирует пациента на наличие противопоказаний.

Если при повторном проведении теста через месяц не наблюдается положительная динамика, связанная с уменьшением количественного показателя, то следует говорить об устойчивости вируса к принимаемым препаратам. В этом случае необходима корректировка лечения и назначение препаратов, подавляющих вирусную активность.

Расшифровка показателей вирусной нагрузки при гепатите В требует квалифицированной оценки со стороны врача. При этом учитывается метод проведения тестирования, на основании которого делаются выводы и ставится диагноз.

Правила тестирования и время проведения

Для проведения тестирования на определение гепатита В исследуется кровь, взятая из вены. Точность оценки анализа зависит от предварительной подготовки пациента:

перед забором крови отдохнуть полчаса;
не принимать пищу перед процедурой:
за сутки до сдачи анализа исключить из рациона жирную и копченую пищу, не употреблять спиртное и отказаться от физической нагрузки;
предупредить врача, если принимались лекарственные препараты.

Проверить количество антител к вирусу можно с помощью экспресс-теста, который продается в аптечных пунктах. Он представляет собой пластиковую полоску. В индивидуальный набор входят пипетка и специальный игольчатый инструмент, которым прокалывают палец. Выделяемая кровь забирается пипеткой в отсек и исследуются ее биохимические составляющие.

Через 15-20 при положительном ответе проявится две полоски. Если вирус отсутствует, ярко выражена одна полоска. В некоторых случаях проявляется слегка окрашенное пятно. Это свидетельство низкой концентрации антител вируса. Такая ситуация наблюдается в случаях, когда проводится терапия или человек только заразился.

Для диагностики повреждения паренхимы необходимы результаты биохимического анализа крови. Изменение концентрации основных компонентов крови говорит о высокой степени поражения органа. Учитываются показатели содержания в крови гемоглобина, СОЭ. При сдаче дополнительных анализов мочи проверяется содержание в ней билирубина и уробилина. Изменяются показатели ферментов печени.

Самым точным является результат, полученный через 7 дней после сдачи крови для определения нагрузки. Отследить динамику позволяет повторное тестирование спустя 30 дней. В запущенных случаях требуется наблюдение за уровнем вирусной нагрузки в течение года.

При отсутствии положительной динамики заболевание становится хроническим. Периоды ремиссии и обострения сменяют друг друга. Пациент должен постоянно наблюдаться у врача и регулярно сдавать анализы.

Какие нормы вирусной нагрузки гепатита В?

Если печень работает нормально, РНК не обнаруживаются в результате анализа крови. Согласно классификации к норме относятся показатели, не превышающие результат в 10*3 МЕ/мл. Это невысокая концентрация вирусных клеток, которые еще не повредили паренхиму печени.

Высокая степень вирусной нагрузки приводит к развитию осложнений, которые затрагивают печень и другие органы. На фоне гепатита развивается цирроз и рак.

( 1 оценка, среднее 5 из 5 )

Источник

пробирка с кровью

Согласно данным статистики ВОЗ, от гепатита В умирают чаще, чем от ВИЧ или «ласкового убийцы» — гепатита С. Носителей HBV также на порядок больше — почти 25% земного населения (инфицированных HCV около 5%).

Такие данные — не повод для паники. Благодаря современным разработкам биофармацевтов гепатит В полностью излечим. Обязательное условие — прежде чем приступать к терапии, необходимо убедиться, что речь идет о патологии, вызванной вирусом и определить степень вирусной нагрузки.

Вирусная нагрузка при гепатите В: что это такое и зачем ее определять

Возбудитель гепатита В — вирус семейства Hepadnaviridae (род Orthohepadnavirus) был впервые выявлен в 1970 году при исследовании инфекций, вызывающих тяжелые патологии печени. Особенность HBV — поражает исключительно человеческий организм. Вирусный патоген выглядит как двухцепочная спираль ДНК, содержащая антиген HBcAg. Именно этот антиген, проникая в ядра клеток печени, разрушает их, делая невозможным самовосстановление органа.

лекарства от гепатита

Опасность заболевания в том, что даже при большом количестве патогенна в крови и высокой скорости репликации (копировании патологичных цепочек), носитель не ощущает явных симптомов. То есть болезнь уже прогрессирует, а повода обследоваться у человека нет. Как результат: гепатит

В диагностируют либо в хронической форме, когда появляется дискомфорт в правом верхнем подреберье и проблемы с ЖКТ, либо на стадии фиброза печени, когда здоровая ткань начала рубцеваться, орган увеличился и начались необратимые изменения.

Если количество клеток, измененных вирусом, выше показателей нормы — это свидетельство патологического процесса (разрушается печеночная ткань). Чем выше вирусная нагрузка, тем быстрее уничтожатся гепатоциты, и печень перестает выполнять природные функции (выведение токсинов, фильтрацию крови и пр.)

Патологичные цепочки ДНК могут копироваться с большей или меньшей скоростью, зависит от особенностей организма носителя, стойкости его иммунитета. Соответственно, вирусная нагрузка растет в укоренном темпе или месяцами остается неизменной.

Определять уровень вирусемии необходимо, чтобы:

подтвердить развитие заболевания или его латентное состояние;
разработать наиболее эффективную схему лечения;
спрогнозировать результат выздоровления.

Какая вирусная нагрузка при HBV считается высокой, а какая низкой

Поводов для медикаментозного вмешательства нет, если клетки, измененные вирусом, не обнаружены или их число не превышает 0,8% от общего числа гепатоцитов. В остальных случаях речь идет о положительном результате (гепатит В выявлен и патоген продолжает распространяться).

показатель ˂ 103 копий /мл свидетельствует о минимальной вирусемии, вирусе в латентной или персистирующей фазе;
о высокой нагрузке говорит цифра 107 копий/мл и выше;
если в результатах анализов на вирусную нагрузку стоит показатель ˂ 2*104 копий/мл, то риск перехода в хроническую форму минимален, а число 2*106 копий/мл показывает, что процесс хронизации уже запущен.

распространение гепатита

Также анализы на вирусную нагрузку при гепатите В показывают, насколько грамотно подобраны противовирусные препараты. Так, если по истечении 3-5 дней с начала терапии количество варионов уменьшается на 75-85%, лечение показывает хороший результат, если нагрузка увеличилась, препараты необходимо менять или дополнять другими средствами.

Почему важно своевременно обследоваться на вирусную нагрузку при HBV

Своевременно проведенные исследования помогут не только назначить эффективное лечение, но и предупредить развитие «сопутствующих» заболеваний. Помимо патологий, затрагивающих печень (фиброза, цирроза, печеночной карциномы, жировой дистрофии) HBV может способствовать развитию:

почечной недостаточности;
сахарного диабета;
кожной атрофии;
хронических воспалений сосудов;
артритов и артрозов;
заболеваний эндокринной системы;
онкологических процессов в лимфатических тканях;
альвеолита (поражение легких);
хронического миокардита;
отека головного мозга.

Кто должен профилактически обследоваться на вирусную нагрузку

шприц с кровью

Путь инфицирования — прямое попадание вируса в организм через биологические жидкости. В 90% случаев это кровь, но риск заражения через сперму, слюну, пот также существует.

Профилактика рекомендуется:

наркоманам и лицам, оказывающим интимные услуги;
людям, не использующим барьерные контрацептивы при беспорядочных половых связях;
пациентам, пережившим переливание крови или посещавшим медучреждения с недостаточным уровнем санитарии;
лицам, которые делали татуировки или пирсинг в нелицензированных салонах;
медперсоналу и работникам учебных заведений.

Увы, но заразиться гепатитом В можно и в быту. Например, если использовать средства гигиены (зубную щетку, бритву или полотенце с остатками биологических жидкостей) носителя.

Вирус невосприимчив к дезинфицирующим средствам, не погибает при замораживании и кипячении. Поэтому, проживая на одной территории с инфицированным, стоит регулярно проходить обследование, чтобы исключить риск развития опасной болезни.

Методы определения вирусной нагрузки при HBV

Вирусная нагрузка определяется двумя способами: качественным и количественным. Задача первого — подтвердить/опровергнуть наличие возбудителя в крови, показать динамику распространения патогенна, форму заболевания.

Второго — показать число измененных вирусом ДНК цепочек в 1 мл биологической жидкости. Наличие вируса по специфичному антигену и антителам, которые вырабатывает человеческий иммунитет, определяют методом ИФА. Для лабораторной диагностики заболевания используют маркеры на:

HBsAg — специфичный антиген, который появляется уже на этапе инкубации вируса.
Анти-HBs — свидетельствует о том, что иммунитет вырабатывает антитела к гепатиту В. Может появиться после вакцинации или контакте с инфицированным, даже если в дальнейшем возбудитель самоуничтожится.
HBeAg – маркер, по динамике которого можно судить о развитии болезни. Если число со временем падает, есть вероятность самоизлечения. Если растет — высок риск перехода болезни в хроническую форму
Анти-HBe — показывает, что организм выработал иммунитет к вирусному воздействию.
Анти-НВс— анализ на суммарные антитела HBcAg-IgM и HBcAg IgG.

Результат иммунологических исследований может выглядеть так:

Количественный анализ — наиболее достоверный способ определить вирусную нагрузку при гепатите В и исключить ошибочные результаты. Исследования проводятся методами:

разветвленной ДНК;
транскрипционной амплификации;
полимеразной цепной реакции.

Все методики имеют сходный принцип — выявляется конкретный РНК с признаками вирусного изменения. Как показывает практика, ПЦР наиболее информативен при определении количества варионов.

Виды ПЦР на вирусный гепатит В

доктор с блокнотом

Полимеразная цепная реакция — это высокочувствительный метод, при котором патологичная РНК выявляется даже при минимальной концентрации вируса в крови.

Проводится качественным и количественным методом.

Качественное исследование проводится поэтапно:

из сыворотки крови выделяется ДНК, которая помещается в специальные реагенты;
подготовленный состав проходит через амплификатор, в котором температурный режим изменяется в 40 раз, способствуя росту числа измененных РНК-цепочек, если они есть;
проводится процедура электрофореза — калибровка ДНК-участков по размерам, в материал добавляют реактив-краситель. Если обрабатываемый образец меняет оттенок, вирус обнаружен, если присутствуют разнородные ферменты, заболевание развивается.

Вариантов ответа может быть два: «обнаружено» или не обнаружено. При сомнительных результатах рекомендуется пересдача анализов через 1-2 недели.

Если качественная ПЦР подтверждает наличие возбудителя, то следующий шаг — определение вирусной нагрузки количественным методом. Такое исследование проводится для:

прогнозирования развития вируса, скорости его воздействия на печень;
составления эффективной схемы лечения и прогноза его успешности (чем меньше нагрузка, тем лучше возбудитель поддается медикаментозной терапии);
определения чувствительности вируса к конкретным препаратам.

Врач-лаборант помещает ДНК, выделенную из крови в специальный состав, и считает количество измененных ферментов в 1мл биоматериала. По международным стандартом принят подсчет в МЕ/мл, но в российских лабораториях часто пишут результат в количествах копий на мл.

Расшифровка результатов количественной ПЦР

Расшифровка	Показатель (копий/мл)
Вирус неактивен (латентная форма или инкубационный период), вирусная нагрузка очень низкая	< 10^3
Возбудитель в малоактивной фазе, вирусная нагрузка низкая	от 10^4 до 10^5
Вирус активен, но нагрузка умеренная	10^6
Высокая активность вируса, значительная вирусная нагрузка	10^7 и выше

Возможен ли ошибочный результат

печень

Ложноположительный или ложноотрицательный результат, а также неправильный подсчет количества копий вирусной ДНК может стать следствием ошибочных действий, как пациента, так и специалиста. Сомнительные или недостоверные результаты возникают вследствие:

неграмотной подготовки к сдаче анализов (например, накануне пациент употреблял жирную пищу или лекарства, которые мешают нормальной свертываемости крови);
несоблюдения правил забора биоматериала (нестерильная пробирка и др.);
загрязнения и неправильного хранения биологического материала;
нарушения хода постановки реакции или использование некачественных реактивов;
присутствия в крови белковых и химических компонентов, которые вступают в реакцию с реагентами, используемыми в ПЦР.

Как снизить вирусную нагрузку при HBV

Гепатит В на сегодняшний день не поддается полному излечению. Пока не существует препаратов, которые гарантированно «убивают» вирус, но остановить репликацию и разрушительное воздействие вполне реально.

Для снижения вирусной нагрузки рекомендуют:

Противовирусную терапию (препаратами прямого противовирусного воздействия или интерфероном). Выбор терапии зависит от клинических показателей пациента и того, какие методики лечение предпочитает лечащий врач. У каждой из схем есть преимущества и недостатки, но практика ВОЗ показывает, что ингибиторы последнего поколения — Виреад, Телбивудин, Адефовир, Энтекавир — более действенны и оказывают меньшую медикаментозную нагрузку на печень и так ослабленную гепатитом.
Соблюдение режима питания. Печень — природный фильтр, который пропускает через себя все токсины. Чем меньше жирной пищи, сладкого, соленого и острого в рационе, тем легче органу «фильтровать» ферменты. Также на время лечения стоит полностью отказаться от алкоголя. Миф о том, что рюмка водки уничтожает патогенную флору, а бокал красного вина улучшает качество крови — опасное заблуждение. Даже 15 граммов спиртосодержащих напитков достаточно для выработки этанола, который является ядом для печени.

таблетки и фрукты

Несмотря на то, что гепатит B в хронической форме пока считается неизлечимым, держать болезнь под контролем и не допускать риска развития осложнений вполне по силам каждому человеку. Все, что для этого нужно — постараться вести здоровый образ жизни и не игнорировать лечение.

Полезное видео про вирусную нагрузку при гепатите В

Источник

Полимеразная цепная реакция — это вид анализа крови, который позволяет безошибочно выявлять вирус гепатита В. Особенностью метода является то, что он способен показать ВГВ на ранних стадиях — уже через месяц после инфицирования, в то время как специфический антиген у больного обнаруживается только через 2 месяца. ПЦР может выявить не только обычный ДНК-вирус, но и мутантные штаммы, которые ни один другой анализ увидеть не позволяет.

При расшифровке ПЦР на гепатит В результаты сравниваются со стандартными значениями. На основе этого делаются выводы о наличии заболевания (положительный результат), концентрации вируса (активности) или отсутствии недуга (отрицательный результат). Обработка данных идет 2 недели.

Виды ПЦР на вирусный гепатит В

Существует 2 вида диагностики, которые назначают при гепатите В. Качественный ПЦР дает возможность с точностью в 100% сказать, есть ли ВГВ в крови или нет. Количественный ПЦР показывает активность вируса, то есть сколько ДНК фрагментов ВГВ содержится в 1 мл крови.

Днк гепатита в вирусная нагрузка

Качественный ПЦР и его трактовка

Проведение анализа крови на гепатит В методом ПЦР может выявить лишь наличие ДНК-фрагментов. Назначается в том случае, когда пациент подозревает о заражении ВГВ (HBV) или когда другие способы диагностики, например, серологические пробы не дают четкого ответа. Расшифровка результатов при проведении качественного анализа очень проста:

отрицательный результат — вируса нет;
положительный результат — вирус обнаружен.

Целью качественного ПЦР является подтверждение или опровержение наличия вируса гепатита В, а также проведение ранней диагностики. Если ВГВ выявлен в течение 1-2 недели после заражения, то лечение станет максимально эффективным. При активном развитии HBV в течение 2-х месяцев и выше, заболевание переходит в хроническую форму и полному излечению не подлежит.

В случае когда качественный ПЦР на гепатит показывает наличие вируса, следующим этапом становится проведение количественной диагностики.

Количественный ПЦР

Для назначение эффективного лечения или оценки результатов проводимой терапии просто знать, что у больного имеется ВГВ, недостаточно. Необходимо определить количественно значение ДНК вируса гепатита В в 1 мл крови, то есть вирусную нагрузку на организм. Этот вид ПЦР на гепатит В проводится в следующих случаях:

Перед назначением лечения.
Для оценки эффективности терапии.
Для определения развития устойчивости вируса к принимаемым препаратам.
Для определения стадии, на которой находится заболевание.

Единицей измерения вируса являются международные единицы (МЕ/мл) или количество копий ДНК/мл, то есть количество ДНК-фрагментов на 1 мл крови. Соотношение между двумя единицами зависит от выбранной тест системы и колеблется от 2 до 7 копий/мл в 1 МЕ/мл. Если система неизвестна, то для пересчета используется усредненное значение:

1 МЕ/мл = 5 копий/мл

Если сразу делается количественный анализ, то граничная норма для диагностирования заболевания составляет 75 МЕ/мл. При результате выше этого показателя, ставится диагноз ВГВ, ниже — ВГВ не выявлен.

Днк гепатита в вирусная нагрузка

Трактовка количественного ПЦР

При гепатите В нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки (виремии), копий/мл:

< 10^3 — нагрузка очень низкая, вирус ведет себя неактивно;
от 10^4 до 10^5 — нагрузка низкая, вирус обычно неактивен;
10^6 — нагрузка умеренная, вирус ведет себя активно;
10^7 — виремия большая, вирус высокоактивен.

Зная количественно, как ведет себя вирус в организме, можно определить форму заболевания (хроническая, острая или носительство), необходимость проведения дополнительных исследований, реакцию организма и вируса на лечение:

Хронический гепатит В диагностируется, если значение трансаминазы будет выше нормы, активность вируса — больше 4, а концентрация ДНК-копий в миллилитре крови составит 10^5 копий.
Носительство определяется по следующей картине, которую дают результаты — концентрация < 10^5 копий/мл, а уровень трансаминазы равен стандартному значению.
Резистентность (устойчивость) при HBV постоянно контролируется во время лечения. Анализы сдаются каждые 3 месяца. Если в один из моментов виремия при гепатите увеличится в 10 раз, то это означает, что ВГВ приспособился к используемым лекарственным препаратам — стал устойчивым.
Благоприятный ход лечения покажет снижение виремии на 85% через 3 дня после начала терапии.
Направление на биопсию печени больной получает лишь тогда, когда показатель АЛТ (аланинаминотрансферазы) превышает нормальное значение не более 2 раз за 6 месяцев, а расшифровка ПЦР на гепатит В показывает виремию > 10^5 копий/мл. Когда же при большой вирусной активности наблюдается повышение уровня АЛТ чаще 2-х раза за полгода, то сразу же назначается антивирусная терапия.

Чтобы узнать, как будет вести себя ДНК гепатит в плане хронизации, то есть перехода к хронической форме из острой, также используются результаты ПЦР-диагностики:

ДНК ВГВ < 2 х 10^4 копий/мл означает, что острая стадия не перейдет в хроническую форму;
ДНК ВГВ лежит в пределах от 2 х 10^4 до 2 х 10^6 копий/мл означает, что у каждого 4-ого больного ВГВ станет хроническим, то есть хронизация составляет 25-30%;
ДНК ВГВ > 2 х 10^6 копий/мл означает, что приобретение хронической формы недуга неизбежно.

Подготовка к обследованию

Для определения наличия ВГВ методом ПЦР делается анализ крови из вены. Процедура всегда проводится строго натощак и лучше всего попасть в лабораторию утром, когда естественное время отдыха от пищи составит 8 часов. Чтобы результаты обследования получились верными, необходимо узнать заранее, как подготовиться к походу в клинику правильно. Дополнительные этапы таковы:

Отказ от жирной пищи, курения, спиртного и занятий спортом за 12 часов до процедуры.
Отдых в течение 20 минут непосредственно перед сдачей крови.
Перед началом процедуры необходимо предупредить медсестру о принимаемых медикаментах.

Внимание! Если диагностика проводится ребенку младше 5-ти лет, то за полчаса до процедуры его нужно поить кипяченой водой по 1 стакану через каждые 10 минут.

Днк гепатита в вирусная нагрузка

Подводя итоги

На сегодняшний день ПЦР-диагностика для выявления гепатита В является самым точным методом. Способ позволяет увидеть скрытые и мутировавшие формы заболевания, выявить недуг на первых неделях после инфицирования и, соответственно, провести эффективное лечение. В зависимости от ситуации проводится качественный или количественный ПЦР, которые направлены на выявление ВГВ и установлении его активности. Чтобы пройти обследование, нужно обратиться к вирусологу, инфекционисту или гепатологу.

Источник